吉萍
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：南京医科大学附属淮安第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人骨髓间充质干细胞对高氧暴露新生大鼠肺组织晚期糖基化终末产物受体通路的影响被引量：5
- 2012年
- 目的探讨晚期糖基化终末产物受体（RAGE）通路在高氧引致新生大鼠肺组织损伤过程中的表达及人骨髓间充质干细胞对其影响。方法24只新生大鼠依据是否高浓度氧暴露随机分为3组：正常对照组（空气环境下暴露7d）、高氧对照组（95％氧暴露7d＋尾静脉注射PBS）、高氧干预组（95％氧暴露7d＋尾静脉注射hMSC5×10^4）；10日龄处死全部大鼠，光镜观察并盲法评分比较肺组织病理学评分；RT-PCR法检测肺组织匀浆RAGEmRNA、NF-κBmRNA表达；Westernblot检测肺组织匀浆RAGE、NF-κB蛋白表达；ELASA检测肺泡灌洗液（BAL）中TNF-d及sRAGE水平；免疫组化法检测肺组织RAGE表达情况。结果与正常对照组相比，高氧对照组及高氧干预组肺组织损伤评分增加（F=51．59，P=0．000）；RAGEmRNA及蛋白（F=37．21，P=0．000；F=15．88，P=0．000）、NF—κBmRNA及蛋白（F=5．695，P=0．011；F=4．223，P=0．0288）、BALF中TNF-α（F=38．29，P=0．000）均增高，而BALF中sRAGE下降（F=4．804，P=0．0191）。高氧对照组与高氧十预组问差异也有统计学意义（均P〈0．05）。但3组间血清TNF-α、sRAGE等差异均无统计学意义。结论人骨髓问充质干细胞可能通过下调RAGE-NF-κB信号通路对高氧肺损伤发挥保护作用。
- 田兆方吉萍李玉红赵赛王祥
- 关键词：高氧症
- 晚期糖基化终末产物受体与肺发育及肺损伤被引量：5
- 2013年
- 晚期糖基化终末产物受体（receptorforadvancedglycationend，RAGE）是细胞表面分子免疫球蛋白超家族的成员之一。作为模式识别受体，它可与多种不同的配体结合。在正常生理状态下，RAGE在大多数组织中一般呈低水平表达，病理状态下其表达上调；而在肺部的I型上皮细胞有较高水平的基础表达，表明其在肺上皮细胞的增殖和分化及保持肺内环境稳态中起重要作用。RAGE在肺部的正常表达遭到破坏可导致多种肺部疾病，如急慢性肺损伤等。它的可溶性形式sRAGE，作为一种诱饵受体，已被证实可作为肺泡I型上皮细胞损伤的重要标志物，说明RAGE在肺的生物学行为中起着重要的作用，并且可能成为肺损伤性疾病治疗的靶点。
- 吉萍俞敏田兆方
- 关键词：晚期糖基化终末产物受体肺损伤治疗靶点
- 新生大鼠肺泡Ⅰ型细胞的原代培养及鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的探讨新生大鼠肺泡Ⅰ型上皮细胞(AECⅠ)的分离、纯化及原代培养方法,为主要以AECⅠ损伤为特征的肺部疾病研究提供模型。方法采用弹性蛋白酶联合胶原酶Ⅰ的消化方法,分离肺组织细胞,然后用肺Ⅰ型上皮细胞顶膜蛋白α(T1-α)单克隆抗体及免疫磁珠进行阳性选择的方法纯化AECⅠ,最后进行原代培养;通过锥虫蓝染色检测细胞活力,倒置显微镜观察细胞生长及形态特征,细胞免疫荧光法检测细胞表面特异性抗原的表达。结果每只鼠可获得AECⅠ(1.4±0.4)×106个,纯度90.5%±3.4%,活力93.4%±3.0%。接种于玻璃培养皿48h后倒置显微镜下观察细胞开始粘附伸展,呈克隆样生长,在4～6天时汇合成薄的单层状。免疫荧光显微镜观察新鲜分离的AECⅠ特异标志物水通道蛋白-5(AQP5)阳性,呈现绿色荧光;AECⅡ标志物前表面活性蛋白C(proSP-C)阴性;培养后的AECⅠ免疫荧光染色呈AQP5阳性。结论利用弹性蛋白酶联合胶原酶Ⅰ消化,免疫磁珠进行阳性选择的方法可成功分离出高产量、高纯度的鼠AECⅠ,能满足体外进一步对AECⅠ生理功能的研究,也可为研究AECⅠ损伤修复机制提供细胞培养的模型。
- 吉萍俞敏李玉红田兆方
- 关键词：原代培养
