周新伏
- 作品数：7 被引量：33H指数：4
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅重点项目湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外扩增临床应用骨髓间充质干细胞的研究进展被引量：5
- 2013年
- 间充质干细胞(MSCs)是一群具有多向分化潜能的成体干细胞,主要存在于骨髓中,有着不同于其他干细胞的生物学特性,在组织工程及再生医学界有巨大的应用潜力。当前,国内外大部分实验室仍是采用经典的胎牛血清培养基在体外大量扩增骨髓间充质干细胞(BM-MSC),以满足科学研究和临床试验所需,但其存在的诸多弊端促使研究者们对培养基的改良进行了多种尝试。该文就体外扩增临床相关数量BM-MSC方法的最新研究进展予以综述。
- 娄典周新伏
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外扩增血清
- 成份脐血治疗造血功能障碍性疾病的应用研究
- 目的:通过开辟成份脐血的制备,并观察成份脐血应用于再障、血液肿瘤化疗中造血 抑制的治疗效果,探索成份脐血的选择性应用方法,以期进一步提高脐血应用疗效,克服全脐血输注的缺陷.同时有利于进一步提高脐血的综合开发应用价值.结论...
- 周新伏
- 关键词：再生障碍性贫血血液肿瘤
- 文献传递
- 脐带血清体外培养临床应用人骨髓间充质干细胞的方法研究被引量：10
- 2008年
- 目的:观察脐带血清等4种不同培养体系体外培养人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)的效果,建立一种适合临床移植需要的人BM-MSCs培养方法。方法:从20例新鲜成人骨髓穿刺液中分离BM-MSCs,分别用含10%脐带血清、胎牛血清(FCS)、成人血清的DMEM/F12培养基和MesenCult培养基培养,流式细胞仪检测细胞表面抗原,成骨诱导体系及脂肪诱导体系分别诱导各组BM-MSCs定向分化。结果:采用4种培养体系都能从骨髓液中分离培养出BM-MSCs,脐带血清和MesenCult组培养的BM-MSCs在增殖数量和速度上相似,而优于FCS和AB型血清组。脐带血清和MesenCult组培养的BM-MSCs表达CD29、CD73、CD105的阳性率比FCS和AB型血清组高(均P<0.05),而CD31阳性率低于FCS和AB型血清组(P<0.05),脐带血清和MesenCult组培养的BM-MSCs诱导为成骨细胞和脂肪细胞阳性率高于FCS和AB型血清组(P<0.05)。结论:脐带血清与MesenCult组培养的BM-MSCs的纯度和体外诱导分化能力相似,优于FCS和AB型血清组,脐带血清适合临床应用。
- 周新伏旷文勇罗自勉张广森符桑刘利华唐铁钢李佳元陈绍芳
- 关键词：骨髓间充质干细胞脐带血清定向分化
- 不同体积分数脐血血清与骨髓间充质干细胞的增殖被引量：1
- 2012年
- 背景:制备脐血血清体外扩增、培养间充质干细胞成为目前的研究热点,但尚无不同体积分数脐血血清对骨髓间充质干细胞的增殖能力的影响的报道。目的:观察比较不同体积分数的脐血血清对骨髓间充质干细胞的增殖能力的影响。方法:无菌条件下取20例人骨髓标本,采用密度梯度离心法提取单个核细胞,分别用体积分数为5%,7.5%,10%,15%,20%的脐血血清+DMEM/F12培养基,行骨髓间充质细胞培养,取第3代细胞,用MTT法观察不同体积分数的脐血血清对间充质干细胞的增殖能力的影响。结果与结论:在体积分数5%,7.5%,10%的脐血血清+DMEM/F12培养基组,细胞增殖能力较佳,明显优于体积分数15%,20%的脐血血清+DMEM/F12培养基组,差异有显著性意义(P<0.05)。说明在较低体积分数脐血血清培养体系中,骨髓间充质干细胞增殖状态活跃。
- 雷晓宇周新伏罗自勉刘利华刘康
- 关键词：脐血血清间充质干细胞细胞培养增殖干细胞
- 脐带血血清培养体系扩增人骨髓间充质干细胞及其生物学特征被引量：15
- 2008年
- 背景：骨髓内的间充质干细胞含量极少，因此课题立项设计之一即如伺得到足够数量的骨髓间充质干细胞，并避免细胞培养过程中因动物血清造成的病原体污染和异种血清所致的过敏反应。目的：拟建立脐带血血清培养系统，以实现体外扩增人骨髓间充质干细胞的目标。设计、时间及地点：开放性实验，于2006-09／2007-10在中南大学湘雅二医院细胞生物实验室完成。材料：12份骨髓标本由中南大学湘雅二医院和湖南省湘潭市中心医院提供，6例采自正常供者，6例采自拟行造血干细胞移植的肿瘤患者。方法：无菌条件下抽取未抗凝的脐带血，静置待血凝块完全析出后吸取血清，离心弃沉淀，取各项病原微生物检测均呈阴性的脐带血血清用于细胞培养，临用前56℃水浴灭活30min。抽取正常供者和肿瘤患者的骨髓液100mL／份，采用Ficoll Paque分离液分离骨髓单个核细胞，加入含体积分数为0．1脐带血血清的DMEM／F12进行传代培养。传至第3代低温、液氮冻存，4-8周后予以解冻复苏，胰蛋白酶消化传代。取第4代骨髓间充质干细胞，锥虫蓝染色后，N／k成骨诱导体系培养14d，碱性磷酸酶染色；加入脂肪诱导体系培养14d，油红O染色。主要观察指标：绘制细胞生长曲线，流式细胞仪测定细胞周期及表面抗原的表达，骨髓间充质干细胞定向分化情况。结果：骨髓间充质干细胞扩增培养至第4代，接种后两三天为生长潜伏期，3-5d为对数增殖期，5-7d细胞生长缓慢进入平台期。采自正常供者和肿瘤患者的骨髓间充质干细胞，冻存前后扩增数量均基本相似（P〉0．05），细胞存活率均〉96％，CD29、CD73、CD105阳性率均〉90％，CD31、CD34、CD45阳性率均〈5％，诱导2周后成骨细胞和脂肪细胞的阳性率均〉85％。结论：应用灭活脐带血清培养体系可成功扩增人骨髓间充质干�
- 旷文勇周新伏张广森刘利华陈绍芳符桑唐铁钢李佳元
- 关键词：骨髓间充质干细胞脐带血清细胞培养定向分化
- 用于造血干细胞移植的人骨髓间充质干细胞体外扩增研究被引量：11
- 2008年
- 本研究旨在检查4种不同培养液体外培养人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)的效果,建立一种基于临床移植需要的分离、培养人BM-MSC的方法,为BM-MSC联合造血干细胞移植的临床应用提供实验基础。采用Ficoll Paque细胞分离液从16例新鲜成人骨髓穿刺液中分离BM-MSC,分别用含10%脐带血血清、胎牛血清、成人血清的DMEM/F12培养液和MesenCult培养液培养,用流式细胞术检测细胞表面抗原,以成骨诱导体系及脂肪诱导体系分别诱导各组BM-MSC定向分化,通过细胞形态观察、免疫表型及免疫化学染色进行鉴定。结果表明:4种培养液都能从成人骨髓液中分离培养出BM-MSC,脐带血血清组和MesenCult组培养的BM-MSC在增殖数量和速度上相似,但均优于FCS组和AB型血清组。脐带血血清组和MesenCult组培养的BM-MSC表达CD29、CD73、CD105的阳性率比FCS组和AB型血清组高(p(0.05),而CD31阳性率低于FCS组和AB型血清组(p(0.05),脐带血血清组和MesenCult组培养的BM-MSC诱导为成骨细胞和脂肪细胞阳性率高于FCS组和AB型血清组(p(0.05)。结论:4种不同培养液能够从成人骨髓液中分离出BM-MSC,脐带血血清组和Mes-enCult组培养的BM-MSC的纯度和体外诱导分化能力比FCS组和AB型血清组高,含有脐带血血清的培养体系具有临床应用价值。
- 旷文勇周新伏张广森刘利华陈绍芳李睿娟肖乐
- 关键词：骨髓间充质干细胞定向分化
- IC162抑制CML细胞增殖、诱导CML细胞凋亡和化疗增敏作用及其机制研究
- 研究背景:慢性粒细胞白血病/(Chronic myeloid leukemia,CML/)是以费城染色体/(Philadephia,Ph/)为特征的多潜能造血干细胞恶性克隆性疾病,其恶性克隆的持续扩充与细胞增殖和凋亡速率...
- 周新伏
- 关键词：K562细胞原代白血病细胞增殖化疗增敏
- 文献传递
