姚湧 作品数:21 被引量:51 H指数:4 供职机构: 安徽医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 安徽省自然科学基金 安徽省高校省级自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
RAPD技术在医学昆虫分类中的应用 被引量:7 2000年 传统形态学分类一直是医学昆虫分类的主要方法 ,但它易受主观因素和环境因素的影响。目前分子生物学的发展为医学昆虫分类提供了新的思路和方法 ,能弥补传统分类方法的不足 ,可进行更为精确的分类。随机引物扩增多态性 DNA(RAPD)技术是 2 0世纪 90年代发展起来的一种以 PCR为基础的 DNA分析方法。本文介绍了该技术的原理、特点 ,并综述了其在医学昆虫分类中的研究和应用。 姚湧 夏立照关键词:医学昆虫 Toll样受体在肝癌细胞的表达及作用 被引量:4 2015年 目的观察Toll样受体(TLR2、TLR4和TLR9)在肝癌细胞组织、癌旁正常组织和肝硬化组织中的表达情况。并重点检测TLR9在肝癌细胞中的作用。方法用RT-PCR方法检测肝细胞癌组织、癌旁正常组织和肝硬化组织中的表达情况TLR2、TLR4、TLR9的表达;用TLR9的激动剂Cp G寡脱氧核苷酸(Cp G ODN)10μg/ml分别作用Hep G2细胞6小时、12小时和24小时后,用MTT法检测细胞生长抑制率。结果与正常组织相比,肝癌细胞组织、肝硬化组织中的TLR9的表达水平明显升高,但TLR2和TLR4的表达水平并没有明显统计学差异;TLR 9激动剂Cp G ODN作用于Hep G2细胞后不同时间均能明显促进细胞生长。结论 TLR9激动剂Cp G ODN可促进肝癌细胞的增殖,提示TLR9可能是肝癌治疗的靶点之一。 张迎寅 姚湧 计永胜关键词:TOLL样受体 肝癌细胞 慢性感染阶段弓形虫包囊在小鼠脑组织的动态病理变化 被引量:2 2023年 目的探究弓形虫慢性感染期间弓形虫包囊在感染小鼠脑部各区域的分布与病理变化对小鼠行为与神经精神的影响。方法使用弓形虫Prugniaud株灌胃小鼠,记录感染小鼠病情;分别在小鼠感染的第10、30、40、90、120、160天取感染小鼠脑组织,分离出海马下丘脑、前额叶、纹状体和小脑区域,HE染色观察并记录各感染区域的包囊数量和神经病理变化。结果弓形虫感染小鼠出现竖毛、弓背等症状,在第40天最为显著,随后逐渐恢复,遗留偏瘫和原地打转等症状;在各时间节点,弓形虫包囊的数量均以海马下丘脑最多,前额叶和纹状体次之,小脑最少;弓形虫包囊的直径随着时间推移均呈增大趋势。慢性感染期间,在脑组织各区域均可观察到弓形虫包囊噬神经现象等特异性病理表现,上述弓形虫脑炎的病理改变在第40天达到顶峰,后逐渐恢复,至第120天增至刺激峰,随后逐渐恢复。结论弓形虫慢性感染期间的行为和神经精神症状与弓形虫包囊在感染小鼠脑部的定位分布有一定的相关性,并呈现动态变化。 吴梦云 蔡茹 李伊凡 汪学龙 姚湧关键词:弓形虫 包囊 脑组织 病理变化 HE染色 浅析医学整合课程中寄生虫学部分的授课策略 被引量:1 2017年 目的探讨《人体寄生虫学》内容在医学整合课程中的授课策略和重点。方法从人体寄生虫学的角度分析教学内容的重复情况和模式,因应提出医学整合课程的中人体寄生虫学内容在不同专业的授课内容和课时安排。结果和结论随着高等医学教育改革的不断深入,系统模块整合课程逐渐成为各医科院校采用的教学模式。此课程将人体解剖学、生理学、生物化学、病原生物学和免疫学等基础课程整合,但是在实践过程中,系统模块整合课程也需要进一步的完善和改进。从人体寄生虫学知识传授的角度分析,本模块课程在教学中应注意结合临床,并以临床症状和致病机理作为授课重点。 姚湧 计永胜关键词:寄生虫学 整合课程 教学 安徽省3种常见蜚蠊的可溶性蛋白质组成分析 被引量:3 2001年 目的 应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)对安徽省 3种常见蜚蠊的可溶性蛋白质区带进行测定 ,为蜚蠊分类提供科学依据。方法 应用冻融匀浆法制备 3种蜚蠊的可溶性蛋白液 ,进行SDS PAGE ,用考马斯亮蓝G 2 5 0染色后 ,观察、计算各蛋白质区带的分子量。结果 黑胸大蠊的蛋白条带数目♂为 2 9条 ,♀为 31条 ;美洲大蠊的蛋白条带数目♂为 2 8条 ,♀为 30条 ;德国小蠊的蛋白条带数目♂为 2 5条 ,♀为 2 8条。通过比较发现 3种蜚蠊的蛋白质区带数目和位置有差别 ;德国小蠊主要蛋白质区带的位置与两种大蠊相差明显 ;♀♂之间也有差别。结论 SDS 姚湧 夏立照关键词:蜚蠊 蛋白质类 电泳 聚丙烯酰胺凝胶 弓形虫膜表面抗原SAG1基因的原核表达及重组蛋白的免疫诊断价值 2011年 目的 探讨重组弓形虫膜表面抗原SAG1基因的表达产物-原核表达蛋白(rSAG1)用于弓形虫病的免疫诊断价值.方法 用异丙基-B-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导大肠埃希菌重组质粒pET28a-SAG1(pET28a-SAG1/BL21)表达,纯化重组pET28a-SAG1/BL21弓形虫膜表面抗原SAG1基因表达产物;用弓形虫缓殖子感染的鼠血清、正常鼠血清和10例弓形虫患者血清为一抗,基因表达产物rSAG1用免疫印迹法进行鉴定,比较rSAG1在弓形虫病免疫诊断中的价值.结果 纯化重组弓形虫膜表面抗原SAG1基因后获得了相对分子质量约38.5×103的表达产物rSAG1;表面抗原SAG1可被弓形虫缓殖子感染的鼠血清所识别;10例弓形虫患者血清在免疫印迹诊断中,有4例出现了弓形虫膜表面抗原SAG1基因表达产物rSAG1.结论 rSAG1具备一定的弓形虫病的免疫诊断价值. 王朝兰 汤冬生 姚湧 汪学龙 王业梅关键词:弓形虫 重组蛋白 免疫诊断 弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响 2019年 目的探讨弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白对妊娠小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响。方法原代培养小鼠子宫基质细胞,用雌二醇、孕酮和cAMP体外诱导蜕膜化的同时加入ROP16重组慢病毒,72 h后qRT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素(PRL)mRNA的表达,流式细胞术检测蜕膜细胞凋亡率的变化,并用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果提取的小鼠子宫基质细胞纯度为95%以上,在体外诱导蜕膜化后,PRL mRNA的表达随时间延长而显著升高(P<0.05),在诱导的蜕膜细胞中过表达ROP16Ⅰ/Ⅲ,相比于对照组,蜕膜细胞的凋亡率降低(P<0.01),凋亡蛋白Bax表达降低,Bcl-2蛋白表达上调。结论弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白会抑制蜕膜细胞的凋亡,可能会影响蜕膜细胞增殖与凋亡的平衡,从而影响胚胎的植入。 金郁 计永胜 姚湧 汪学龙关键词:弓形虫 蜕膜化 凋亡 重组GRA5蛋白免疫诊断弓形虫病价值的研究 被引量:1 2017年 目的原核表达的刚地弓形虫致密颗粒蛋白5(rGRA5)免疫诊断价值的探讨。方法 GRA5基因在RTPCR被扩增,构建pET28a-GRA5原核表达载体,双核酸内酶切及序列测定进行鉴定,pET28a-GRA5IPTG诱导表达后,SDS-PAGE和Western blot法检测该重组蛋白的表达。建立以纯化的重组蛋白的间接ELISA法,检测收集样本血清中弓形虫特异性抗体。结果 PCR反应扩增出为363 bp大小的GRA5基因,所构建的pET28a-GRA5原核表达载体经双酶切显示插入片段大小与上相符,DNA测序结果表明与Gen Bank中录入的GRA5基因经Blast比对序列同源性100%,原核细胞表达的该重组蛋白在SDS-PAGE和Western blot中均有显示(约14 ku)。本实验建立的ELISA法检测的100例弓形虫感染者(血清学阳性)血清中有73例呈阳性,阳性率为73.0%(73/100),其中40例IgG阳性标本的阳性率为72.5%(29/40),30例IgM阳性标本的阳性率为53.3%(16/30),30例IgG、IgM均阳性标本的阳性率为93.3%(28/30),30例阴性血清标本的阳性率仅为6.7%(2/30)。结论本实验获得的原核表达的rGRA5具有一定的弓形虫病免疫诊断的潜在价值。 王楠楠 姚湧 汪学龙关键词:刚地弓形虫 酶联免疫吸附试验 安徽省3种常见蜚蠊基因组多态性DNA的研究 被引量:1 2001年 目的研究随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,用于蜚蠊分子分类。方法提取3种蜚蠊的基因组DNA,鉴定及定量分析。确定RAPD反应总体积、反应条件。选取3条不同的随机排列碱基顺序的多聚核苷酸单链为引物,进行PRPD-PCR扩增反应。将扩增产物制备成DNA图谱,通过对DNA图谱和遗传距离的分析,研究这3种蜚蠊基因组DNA的多态性。结果分别扩增出不同数量和分子大小的DNA片段。3种蜚蠊基因组DNA扩增产物中具有相同的DNA条带,这反映了各蜚蠊基因组DNA具有同源性;3种蜚蠊基因组DNA扩增产物又具有各种独特的DNA条带,DNA条带亮度也有差别。结论 RAPD技术简便、快速、精确,可用于蜚蠊分子生物学分类。 姚湧 夏立照关键词:蜚蠊 基因组DNA 安徽省三种常见蜚蠊可溶性蛋白质和基因组多态性DNA的分析 该文应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)和随机扩增多态性DNA(RAPD)技术获取安徽省三种常见蜚蠊的可溶性蛋白质区带和DNA指纹图谱,对三种常见蜚蠊的可溶性蛋白质和基因组DNA多态性进行分析研究,... 姚湧关键词:蜚蠊 可溶性蛋白质 基因组DNA 随机扩增多态性DNA RAPD 文献传递