孙国杰
- 作品数：11 被引量：44H指数：4
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- 影响动物胚胎干细胞分离和克隆效果的因素研究进展
- 2001年
- 胚胎于细胞分离和克隆是一个复杂的过程,受到许多因素的影响;饲养层细胞、生长因子、基础培养基、胚胎的胚龄、不同的遗传背景等是影响胚胎干细胞分离和克隆的几个重要影响因素。
- 孙国杰桑润滋
- 关键词：克隆胚胎干细胞影响因素动物
- 山羊类胚胎干细胞的分离、克隆研究被引量：10
- 2003年
- 从胚胎发育阶段、饲养层、生长因子等方面对影响山羊胚胎干细胞的分离、克隆的因素进行了研究。结果表明 :囊胚期可作为分离山羊胚胎干细胞收集胚胎适宜阶段 ;小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF)和山羊胚胎成纤维细胞 (GEF)对山羊类ES细胞分离效果影响不明显 ;生长因子LIF和SCF配合使用可分离到山羊的类ES细胞 ,并传至第 4代。
- 孙国杰桑润滋韩建永金东航田树军周振明李俊杰
- 关键词：山羊胚胎干细胞克隆技术生长发育
- 山羊PGCs用于分离与克隆类ES细胞被引量：22
- 2002年
- 选择健康成年本地白山羊 ,自然发情、配种后 4 4 d取胎儿 ,以传统的原始生殖细胞 (PGCs)分离与克隆的方法和PGCs与其胎儿生殖嵴周围组织细胞共同培养的方法获得类胚胎干细胞 (类 ES细胞 ) ,并对山羊类 ES细胞在不同饲养层上进行培养。结果表明 ,采用传统方法和共培养的方法并添加细胞因子均能分离获得类 ES细胞。分离获得的类ES细胞在同源 (山羊 )胎儿细胞饲养层上生长效果较好 ,可传 4代或 5代 ,而在小鼠原代成纤维细胞饲养层上类 ES细胞仅传 3代。另外 ,共培养不添加细胞因子组仅获 1个类 ES细胞集落 。
- 韩建永桑润滋孙国杰王志刚李俊杰
- 关键词：克隆山羊胚胎干细胞原始生殖细胞
- 影响山羊胚胎干细胞分离克隆效果的因素研究
- 本试验就胚龄、饲养层、生长因子及培养系统等因素对山羊胚胎干细胞分离克隆效率的影响进行研究,结果表明,在2种不同饲养层上,囊胚的脱带时间均短于桑椹胚,囊胚的脱带率均高于桑椹胚,而饲养层的种类对胚胎的脱带时间以及脱带率影响不...
- 桑润滋韩建永孙国杰金东航王志刚李俊杰
- 关键词：山羊胚胎干细胞
- 文献传递
- 山羊类ES细胞的分离与克隆被引量：12
- 2003年
- 采集山羊交配后 6～ 8d的桑椹胚、囊胚和孵化囊胚 ,将桑椹胚和囊胚分别放在小鼠原代胎儿成纤维细胞(PMEF)饲养层和同源原代胎儿成纤维细胞 (PGEF)饲养层上比较其脱带时间及脱带率。脱带后 ,将各自一半胚胎切割 ,把含 ICM的半胚分别放在相应饲养层上进行培养 ,另一半整胚在各自饲养层上继续培养 ,而孵化囊胚直接于PGEF饲养层上培养。当 ICM增殖一定程度时进行传代 ,以比较其类 ES细胞分离与克隆的效果。结果表明 ,在 2种不同饲养层上 ,囊胚的脱带时间均短于桑椹胚 ,囊胚的脱带率均高于桑椹胚 ,而饲养层的种类对胚胎的脱带时间以及脱带率影响不大。脱带切割囊胚不论在 PMEF还是在 PGEF饲养层上 ,其贴壁时间均短于脱带整胚及孵化囊胚 ,而贴壁率高于脱带整胚 ,与孵化囊胚相似。脱带整胚及脱带切割胚在 PMEF饲养层上所获类 ES细胞只能维持 3代 ,而在PGEF饲养层上 ,脱带切割半胚和孵化囊胚所获类 ES细胞传至 5代。由此认为 ,对脱带后的胚胎进行切割处理 ,有利于 ICM的贴壁和增殖 ;应用同源原代胎儿成纤维细胞饲养层培养系统 ,有利于类
- 桑润滋韩建永孙国杰金东航田树军
- 关键词：山羊克隆饲养层胚胎干细胞
- 山东胚胎干细胞的分离与克隆
- 桑润滋韩建永王志刚孙国杰金东航李俊杰曹素英赵驻军王立泽
- 该项目对山羊早期胎儿原始生殖嵴细胞（PGCS）和胚胎干细胞（ES）的分离、克隆、传代进行了研究。以DMEM为基础液适量添加不同的生长因子LIF、SCF、BFGF等为培养液，采用PGCS与HET共培养体系获得了山羊PGCS...
- 关键词：
- 关键词：胚胎干细胞克隆
- 山羊胚胎干细胞的分离与克隆
- 桑润滋韩建永王志刚孙国杰金东航李俊杰曹素英赵驻军王立泽
- 该项目对山羊早期胎儿原始生殖嵴细胞（PGCS）和胚胎干细胞（ES）的分离、克隆、传代进行了研究。以DMEM为基础液适量添加不同的生长因子LIF、SCF、BFGF等为培养液，采用PGCS与HET共培养体系获得了山羊PGCS...
- 关键词：
- 关键词：山羊胚胎干细胞克隆
- 从原始生殖细胞分离和克隆兔的胚胎生殖细胞被引量：1
- 2002年
- 研究采用 1 4～ 1 8d兔胎儿的生殖嵴及周围组织与其同源成纤维细胞共培养 ,低糖DMEM +1 0 %NBS +1 0 %FCS +1 0ng/mLLIF +1 0ng/mLSCF+0 1mol/Lβ 巯基乙醇 +1 0 0U/mL青霉素 +80U/mL链霉素作培养基 ,分离出兔原始生殖细胞 (PGC) ,克隆并多次传代。从原始生殖细胞 (PGC)中获得胚胎生殖细胞 (EG)细胞集落 ,1 4d胎儿原代观察到类EG细胞集落 ,传至 4代后丢失。 1 6d胎儿的类EG只传 2代 ,1 8d胎儿没有得到EG细胞集落。EG细胞具有干细胞的诸多特征 ,呈典型的团块状聚集生长 ,碱性磷酸酶 (AKP)染色呈阳性 ,在衰老饲养层的培养基中生长形成类胚体、上皮细胞。
- 桑润滋周振明韩建永孙国杰李俊杰
- 关键词：克隆原始生殖细胞胚胎生殖细胞胚胎发育胚胎干细胞
- 哺乳动物乳腺生物反应器的研究现状及存在问题被引量：13
- 2002年
- 本文在阐述乳腺生物反应器概念的基础上,介绍了乳腺生物反应器的原理及应用现状,指出乳腺生物反应器将在生产新型牛奶和药用珍稀蛋白等方面为人类做出巨大的贡献,最后指出存在的问题并展望了乳腺生物反应器前景。
- 孙国杰桑润滋李俊杰韩建永
- 关键词：哺乳动物乳腺生物反应器
- 从早期胚胎分离和培养兔胚胎干细胞被引量：1
- 2002年
- 采用昆白系小鼠成纤维细胞(MEF)作为饲养层,低糖DMEM+10%NBS+10%FCS+10 ng/mL LIF+10 ng/mL SCF+0.1 mmol/L β-巯基乙醇+100 IU/mL青霉青+80 IU/mL链霉素作培养基,从培养96 h的胚胎中分离出1个兔类ES细胞集落,克隆传至4代,悬浮培养的兔类ES细胞团,可出现囊状胚。兔类ES细胞接种在衰老的饲养层上,出现滋养层细胞和上皮样细胞。
- 周振明桑润滋韩建永孙国杰李俊杰
- 关键词：胚胎干细胞内细胞团胚胎培养
