孙海珊
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:深圳大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 莱茵衣藻启动子功能检测系统的构建
- 雨生红球藻34-1n(Haematococcus plauvialis 34-1n)在强光、盐胁迫和缺氮等条件下会积累大量虾青素,它合成的调控机理是目前研究的热点.β-胡萝卜素酮化酶则是其中的关键酶之一,在强光、盐胁迫和...
- 王潮岗黄惠珠孙海珊胡章立
- 关键词:基因工程T载体莱茵衣藻启动子
- 一种莱茵衣藻启动子功能检测系统的构建被引量:1
- 2012年
- 选用莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)作为检测微藻启动子功能的生物系统,以pSP124质粒为基础,雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶基因bkt1的启动子片段(450 base pair,记作450 bp)为间隔序列,引入两个Eam 1105Ⅰ限制性内切酶位点,构建莱茵衣藻启动子功能检测T载体.将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获得的1 986 bp的bkt1启动子片段直接克隆到T载体上,通过"珠磨法"转化到莱茵衣藻CC-849中,经Zeomycin筛选获得了TranB-0.45和TranBle转基因藻,而1 986 bp的bkt1启动子无转化子,原因可能是其含有负调控元件.PCR结果显示,ble可稳定存在于转基因藻中,bkt1启动子的450bp片段具有启动子活性,能正确表达BLE蛋白.该研究表明,莱茵衣藻和pB-0.45T载体所组成的检测系统可用于藻类启动子研究,为启动子功能的研究提供了一条新途径.
- 王潮岗黄惠珠孙海珊胡章立雷安平
- 关键词:基因工程T载体莱茵衣藻启动子功能克隆