宋伟
- 作品数:26 被引量:69H指数:3
- 供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金军队医药卫生科研基金国家新药研究基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程更多>>
- 重组葡激酶的基因克隆与序列测定
- 1999年
- 从烧伤病房病人烧伤感染创面分离到 9株金黄色葡萄球菌 ,经纤溶活性测定 ,选纤溶活性最高的作为 PCR扩增模板。将扩增出的葡激酶基因片段插入 p UC1 8载体质粒 ,转化大肠杆菌 DH5 α,筛选出 PUC- SAK阳性克隆 ,经 DNA序列测定证实该基因片段为一种新的
- 李倩荫俊雷祚荣宋伟
- 关键词:重组葡激酶基因克隆
- CD14在牙髓和牙龈组织中的免疫组化定位被引量:1
- 2002年
- 目的 :检测CD14在牙髓和牙龈组织的分布 ,探讨CD14在牙髓和牙龈炎症过程中的可能作用。方法 :组织切片技术制备人牙髓和牙龈组织标本 ,用免疫组织化学方法检测CD14在健康和炎症牙髓、牙龈组织的分布。结果 :健康牙髓没有发现CD14免疫阳性细胞 ,炎性牙髓组织病灶处炎细胞呈阳性反应 ;健康牙龈上皮棘层细胞有微弱的阳性反应 ,炎性牙龈上皮棘细胞层强阳性。结论 :CD14参与了牙髓和牙龈组织的炎症反应过程 ;特别是牙龈上皮棘细胞层CD14免疫阳性 。
- 王胜朝荫俊史俊南范继红宋伟
- 关键词:牙髓牙龈牙髓炎牙龈炎
- 抗轮状病毒免疫球蛋白组合物及其制备方法和用途
- 本发明涉及抗轮状病毒免疫球蛋白组合物及其制备方法和治疗轮状病毒腹泻的用途。该组合物为肠溶剂,包含有效量的抗轮状病毒特异性免疫球蛋白和药学上可接受的载体,其中的免疫球蛋白采用无特定病原体鸡,经强化免疫后获得。该组合物可用于...
- 荫俊王效义张松乐侯晓军王忠泽宋伟
- 文献传递
- 重组葡激酶基因在大肠杆菌内的高水平表达及生物学活性研究被引量:1
- 1999年
- 将测序后的葡激酶重组质粒PUC-SAK经酶切后,组装于表达载体pBV220,构建成pBV-SAK表达质粒,转化大肠杆菌。重组葡激酶表达水平达60%~70%,相对分子质量为 15 500,主要以可溶状态存在于细胞中。生物活性测定证实,重组葡激酶具有很强的纤溶活性。
- 李倩荫俊宋伟雷祚荣付玲
- 关键词:葡激酶基因表达生物活性
- 醋酸杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆表达被引量:1
- 2001年
- 根据已知α 乙酰乳酸脱羧酶 (α ALDC)的基因序列 ,用PCR法从醋酸杆菌 (Acetobacterracens)中克隆到约 1kb的DNA片段 ,经DNA测序证明是ALDC基因 ,将该基因重组到质粒pBV2 2 0中 ,转化大肠杆菌 ,实现了高表达 ,获得了目的蛋白表达量约 40 %的转化子 ,为下一步研究其酶活性奠定了基础。
- 王爱娥荫俊宋伟王慧姜永强王景林
- 关键词:醋酸杆菌Α-乙酰乳酸脱羧酶基因克隆
- 重组A型产气荚膜梭菌α毒素C端基因在大肠杆菌中的高效表达被引量:1
- 2003年
- 在成功克隆A型产气荚膜梭菌α毒素C端基因 (cpa40 8基因 )后 ,发现基因N端ATG后密码子在大肠杆菌中的使用频率普遍偏低 ,在不改变氨基酸的前提下 ,对N端基因进行修饰 ,构建重组表达质粒pBV2 2 0 cpa40 8,导入大肠杆菌DH5α中 ,经温度诱导 ,cpa40 8基因获得了高效表达 ,表达量达菌体总蛋白的 43 75 %,表达产物以可溶形式存在。经Western blot分析 ,表达产物能被标准抗α毒素血清识别。
- 林明辉荫俊王慧侯晓军宋伟邢洪光
- 关键词:A型产气荚膜梭菌修饰基因表达
- 重组A型产气荚膜梭菌α毒素C端片段的分离纯化
- 2004年
- 押在构建出高表达、高活性的A型产气荚膜梭菌α毒素保护性抗原工程菌株pBV/cpa408的基础上,对表达产物进行了分离纯化研究。诱导表达菌液离心后,超声破碎沉淀细菌,上清用80%饱和硫酸铵沉淀,沉淀蛋白经透析,上凝胶过滤层析柱分离纯化,得到纯度达95%以上的表达目的蛋白,经SDS-PAGE测定,相对分子质量为15.5×103,序列与文献报道的相符。
- 林明辉荫俊邢洪光王慧侯晓军宋伟
- 关键词:C端片段纯化Α毒素A型产气荚膜梭菌
- 可溶性CD14基因在COS-7细胞的表达被引量:2
- 2002年
- 目的 :构建重组可溶性CD14真核表达载体 ,用瞬时系统表达目的基因。方法 :将可溶性CD14基因定向克隆入真核表达质粒载体 pcDNA3.1+;DEAE -葡聚糖法转染COS - 7细胞 ,72h收集培养上清 ,Westernblot鉴定表达产物 ,ELISA检测表达水平。结果 :酶切鉴定表明重组表达载体构建成功 ;SDS -PAGE显示转染细胞可表达一分子量 5 2 .6× 10 3 u (5 3kDa)的蛋白 ;Westernblot显示 5 2 .6× 10 3 u (5 3kDa)处有免疫阳性蛋白带 ;ELISA检测表明 :转染 72h目的蛋白可达 2 .1μg/mL。 结论 :重组可溶性CD14基因可以在COS -
- 王胜朝荫俊史俊南白洁王威宋伟
- 关键词:CD14真核表达血清髓细胞
- A型产气荚膜梭菌α毒素全基因的分子克隆与核苷酸序列分析被引量:2
- 2003年
- 应用PCR技术,从A型产气荚膜梭菌菌株NCTC64609中扩增出A型产气荚膜梭菌α毒素全基因(cpa1229基因)并将其克隆至pMD18-T载体中。经转化、IPTG/X-gal选择培养,提取质粒,PCR和EcoRI/PstI双酶切鉴定,筛选阳性重组克隆。经核苷酸序列分析证实,cpa1229基因阅读开放框架由1194bp组成。经GenBank检索对照分析,cpa1229基因序列与国外文献报道者同源性达98.3%,表明本实验所克隆的cpa1229基因即为A型产气荚膜梭菌α毒素基因。
- 林明辉荫俊王慧宋伟邢洪光侯晓军
- 关键词:A型产气荚膜梭菌Α毒素分子克隆核苷酸序列
- 从噬菌体展示肽库中筛选脂质A的结合肽
- 2003年
- 以脂质A为靶标,筛选噬菌体展示十二肽库,三轮后随机挑取14个噬菌体克隆进行结合活性鉴定,并对5个克隆进行序列分析。结果表明,14个克隆全部是阳性克隆,测序结果显示4个阳性克隆的序列完全一样。说明筛选到了一个脂质A的结合多肽。
- 姜明王慧荫俊张浩杰宋伟史俊南
- 关键词:噬菌体结合肽脂多糖肽库感染性休克