公共文化服务平台

共 5 条记录，以下是 1-5

全选清除导出

排序方式：

人IL-10真核表达载体构建及其酵母表达和活性鉴定: Interleukin-10(白细胞介素10,IL-10)是美国DNAX研究所的Fiorentino等发现的一种细胞因子。hIL-10可由人体多种细胞产生,具有免疫刺激和免疫抑制双向调节作用,是人体免疫系统的中枢免疫分子...; 陈富超孙万邦封建凯杜联峰黄俊琼罗军敏宋明英; 文献传递

重组hIL-10质粒构建、真核表达及抗皮肤移植排斥的初步研究: 目的：构建hIL-10真核表达载体，探索在毕赤酵母中表达重组hIL-10蛋白，经纯化浓缩，获得较高纯度的目的蛋白并进行抗皮肤移植排斥的初步研究，为进一步研究hIL-10生物学功能和生物制品开发及临床应用奠定基础。 ...; 封建凯; 关键词：皮肤移植目的蛋白移植排斥同种异基因; 文献传递

重组hIL-10质粒构建及其在毕赤酵母SMD1168中的表达和纯化被引量：16: 2010年; 构建重组hIL-10真核表达载体,探索在毕赤酵母中的表达,为进一步研究hIL-10生物学功能及临床应用奠定基础。PCR扩增目的基因hIL-10cDNA,经EcoRI/XbaI双酶切后,将其亚克隆至同样双酶切的载体pPICZaA中,构建表达质粒pPICZaA-hIL-10;电转化法,将其转入毕赤酵母SMD1168,甲醇诱导Mut+型转化子基因表达;对目的蛋白进行检测及纯化。扩增出了目的基因hIL-10cDNA,重组质粒pPICZaA-hIL-10经酶切鉴定和序列测定正确;表达产物经SDS-PAGE分析在42.0kD处可见较浓染条带,Westernblotting分析可见特异条带;ELISA检测72h上清液中目的蛋白浓度可达1.973mg/L;纯化后目的蛋白纯度达67.0%。实现了重组hIL-10在毕赤酵母SMD1168中的成功表达和初步纯化。; 封建凯孙万邦陈富超黄俊琼罗军敏杜联峰姚新生王胜香; 关键词：HIL-10 质粒构建毕赤酵母基因表达

重组人IL-10在毕赤酵母X-33及SMD1168中表达效率的比较被引量：2: 2011年; 目的研究重组人IL-10(rhIL-10)在两株毕赤酵母X-33和SMD1168的表达水平,为rhIL-10的表达选择合适的表达菌株。方法以0.5%甲醇分别诱导毕赤酵母X-33和SMD1168表达rhIL-10,用SDS-PAGE和WesternBlot分析和鉴定rhIL-10,用ELISA法测定培养液rhIL-10含量,用Bradford法测定培养液总蛋白含量并计算rhIL-10占总蛋白的比例。比较同等培养条件下两株酵母表达rhIL-10和总蛋白的水平。结果 SDS-PAGE和Western Blot均检测到42kD左右的蛋白条带;rhIL-10在X-33中的表达量平均达20.00mg/L,在SMD1168中的表达量平均达1.90mg/L,在两株不同酵母中的表达量有显著性差异(P<0.05);同时段的X-33培养液中总蛋白质含量平均为50.00mg/L,rhIL-10占总蛋白的40.00%;SMD1168培养液中总蛋白质含量平均为48.23mg/L,rhIL-10占总蛋白的4.00%。结论 rhIL-10在不同的毕赤酵母表达效率有差异,X-33较1168更适于rhIL-10的表达。; 陈富超曹明燕罗军敏封建凯孙万邦; 关键词：X-33

重组hIL-10在毕赤酵母X-33的表达及其生物活性鉴定被引量：17: 2011年; 目的:用毕赤酵母表达hIL-10并探索合适的表达条件,为IL-10生物制品研发及临床应用奠定基础。方法:以0.5%甲醇诱导酵母X-33表达rhIL-10,用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定rhIL-10,比较不同温度、不同pH值和有无PMSF条件下rhIL-10的表达水平。用ELISA法测定培养液rhIL-10含量,用Bradford法测定培养液总蛋白含量,计算rhIL-10占总蛋白的比例。以淋巴细胞转化试验分析rhIL-10的生物学活性。结果:SDS-PAGE后可见42 kD左右蛋白条带;Western blot也检测到42kD左右特异性蛋白质条带。pH值为6.0、温度在28℃并加入抑制剂时rhIL-10表达量最高值为20 mg/L,同时段培养液中总蛋白质含量为50 mg/L,rhIL-10占总蛋白比例为40%。在外周血淋巴细胞转化试验中,rhIL-10抑制了淋巴细胞的增殖。结论:hIL-10能在毕赤酵母高效表达,表达产物有较好生物活性;发酵条件对rhIL-10的表达水平影响大,改善发酵条件能促进rhIL-10的表达。; 陈富超孙万邦封建凯杜联峰黄俊琼罗军敏宋明英; 关键词：毕赤酵母细胞增殖

全选清除导出

共1页<1>

封建凯