张凡
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 2-DG对肺腺癌A549细胞增殖的影响及其相关机制被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对肺腺癌A549细胞增殖的影响及其相关机制。方法:不同浓度的2-DG与抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)单独及联合处理A549细胞,CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞生存率;DCFH-DA(2',7'-dichlorodihydro uorescein diacetate)染色检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的变化;比色法检测A549细胞内氧化型谷胱甘肽占总谷胱甘肽含量的百分比;实时荧光定量PCR检测细胞内SOD、CAT和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)mRNA的转录情况。结果:2-DG可以显著抑制A549细胞的生长,同时伴随着细胞内ROS产生增多和氧化型谷胱甘肽所占的百分比升高。2-DG干预后,细胞内CAT和GSH-Px mRNA表达水平上调,而SOD mRNA的表达水平未出现明显变化。A549细胞经NAC和CAT预处理后,2-DG的抗肿瘤作用明显减弱,而特异性氧自由基清除剂SOD对2-DG的抗肿瘤作用没有明显影响。结论:2-DG能够抑制A549细胞增殖,其机制可能与诱导ROS的生成,尤其是H2O2的生成有关。
- 张凡宋少莉冯阳黄钢
- 关键词：肺肿瘤活性氧细胞增殖
- H_2O_2对肺腺癌A549细胞葡萄糖和谷氨酰胺代谢的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨H2O2对肺腺癌A549细胞中葡萄糖和谷氨酰胺代谢途径依赖性的改变及可能的作用机制。方法:用不同浓度的H2O2处理A549细胞后,细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞的存活率;荧光探针氯甲基-2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酯[5-(and-6)-chloromethyl-2’,7’-dichlorol uorescein diacetate,acetyl ester,CM-H2DCFDA]染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平;葡萄糖和乳酸测定试剂盒分别检测细胞中葡萄糖的摄取量和乳酸的产生量;CCK-8法检测葡萄糖代谢抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)对A549及H2O2处理过的A549细胞增殖的影响及谷氨酰胺对A549及H2O2处理过的A549细胞增殖的影响。实时荧光定量-PCR检测葡萄糖代谢通路和谷氨酰胺代谢通路上相关基因mRNA表达的变化;蛋白质印迹法检测不同浓度H2O2处理后对A549细胞中异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase1,IDH1)和IDH2蛋白表达的影响。结果:低毒性浓度H2O2(50和100μmol/L)作用2 h后,A549细胞的存活率未受明显影响,但细胞ROS水平增高,葡萄糖消耗增加,乳酸生成增高;葡萄糖代谢抑制剂2-DG对H2O2预处理后的A549细胞的增殖具有抑制作用,低浓度谷氨酰胺对H2O2预处理后的A549细胞有上调生存率的作用。与葡萄糖代谢通路相关基因mRNA的表达被上调,与谷氨酰胺代谢通路相关基因mRNA表达被下调,IDH1和IDH2蛋白的表达水平被下调。结论:H2O2可上调A549细胞对葡萄糖代谢通路的依赖性,而下调对谷氨酰胺代谢通路的依赖性,其作用机制可能与IDH1和IDH2蛋白表达的下调有关。
- 俞小凤张腾黄辰张凡黄钢
- 关键词：肺肿瘤活性氧谷氨酰胺
