张欣怡
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 供职机构：嘉兴学院医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- hWAPL基因shRNA真核表达载体的构建及干扰效果的初步鉴定被引量：5
- 2010年
- 目的：构建针对人半翼基因（hWAPL）的短发夹RNA（shRNA）真核表达载体,并观察其转染效率.方法：根据hWAPL基因序列,设计并合成特异性的小干扰片段,将其定向克隆到带有卡那抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1中,酶切和测序后,用脂质体转染到CasKi细胞中,观察荧光表达,鉴定转染效率.RT-PCR检测结果表明,筛选到的短链hWAPL siRNA能有效抑制内源hWAPL的表达.结果：成功构建了表达shRNA的质粒及其阴性对照质粒,转染到CasKi细胞系中可以特异下调hWAPL mRNA表达,载体转染效率达50%以上.结论：RNAi能特异地下调CasKi细胞中hWAPL mRNA含量,抑制宫颈癌细胞恶性增殖,提示hWAPL可能成为宫颈癌基因治疗的一个新的靶点.
- 曹利仙潘巍巍黄玉蓉张欣怡康燕琴
- 关键词：RNA细胞转染
