李宏涛 作品数:5 被引量:4 H指数:2 供职机构: 哈尔滨医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
新活性蛋白酶与带Ⅲ蛋白 <正>本文在国内外首次报告一种新活性蛋白酶,该酶的活性与带Ⅲ蛋白C-结构域密切相关。带Ⅲ蛋白是存在于红细胞膜上的一种内在性(integral)蛋白质,占红细胞膜蛋白质总量的25%, 傅国辉 姜晓妹 李宏涛酵母双杂合系统AD端阴离子交换蛋白C-末端表达质粒的构建 被引量:2 2002年 利用 PCR方法 ,从阴离子交换蛋白 1(AE1)全长 c DNA中扩增出约 35 0 bp c末端 c DNA片段。测序后将其克隆至 p GADT7载体上。用醋酸锂法将构建好的 p GADT7- AE1- c-末端转染酵母菌 AH10 9,观察其在选择性培养基上的表达情况。结果表明 ,获得了 35 0 bp AE1c-末端 c DNA,p GADT7- AE1- c-末端对酵母无毒性 ,不能激活检测基因 。 李宏涛 傅国辉 秦勇 杜洪清 姜晓姝 刘明 孔宪刚关键词:酵母双杂合系统 C-末端 质粒 克隆 表达血型糖蛋白A和带3蛋白膜段基因的杆状病毒转移载体的构建 被引量:3 2001年 用RT-PCR方法从K562细胞中扩增了410 bp的血型糖蛋白A基因,以含有带3蛋白全长基因的质粒为模板扩增了1.5kb的带3蛋白膜段基因,分别克隆到pMD18-T载体上,筛选到阳性重组子pMD18-T-GPA和pMD18-T-B3m。再将基因分别亚克隆到杆状病毒转移载体pBlueBacHisB中,随机筛选得到重组病毒转移载体pBacGPA和pBacB3m,为表达和进一步研究血型糖蛋白A和带3蛋白的相互关系打下基础。 傅国辉 李宏涛 秦勇 杜洪清 刘明 孔宪刚关键词:血型糖蛋白A 带3蛋白 杆状病毒 基因表达 带3蛋白和GPA基因的克隆与酵母双杂交表达载体的构建 该研究的目的是构建用于文库筛选和酵母双杂交系统两种表达载体.采用PCR和RT-PCR方法,从带3蛋白(Band3)全长cDNA和K562细胞mRNA中分别扩增出约350bp、410bp的带3蛋白c末端和血型糖蛋白A(GP... 李宏涛关键词:带3蛋白 血型糖蛋白A 酵母双杂交系统 文献传递 酵母双杂合系统BD端血型糖蛋白A表达质粒的构建 被引量:3 2002年 目的 :获得血型糖蛋白A(GPA)cDNA片段 ,并构建酵母双杂合BD端表达质粒。方法 :利用RT -PCR方法 ,从K5 6 2细胞mRNA中扩增GPAcDNA片段 ,约 410bp。测序后将其克隆至pbridge载体上。用醋酸锂法将构建好的pbridge -GPA转染酵母菌AH10 9,观察其在选择性培养基上的表达情况。结果 :克隆到的 410bpGPAcDNA编码的氨基酸序列基本与公布序列相同。pbridge—GPA转染酵母菌后 ,在SD/Gal/—His/Ura培养基上出现 1mm大小白色菌落。结论 :获得了血型糖蛋白AcDNA克隆 ,pbridge—GPA对酵母无毒性 ,不能激活检测基因 ,可作为酵母双杂合系统中的靶基因。 李宏涛 傅国辉 姜晓姝 张宝山 孔宪刚关键词:血型糖蛋白 膜蛋白质类