李文姝
- 作品数：84 被引量：96H指数：5
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学哲学宗教更多>>
- “心”会跟爱一起走
- 2005年
- 当人类生命还处于母体胚胎期的第一个月时,心脏就开始了从不停歇的工作。人的一生中,心脏要跳动大约30亿次。而冠心病、风心病、心肌病等心血疾病的发生,使本来不堪重负的心脏雪上加霜。目前,心脏病是造成死亡人数最多的疾病,严重威胁着人们的健康和生命。
- 李文姝
- 关键词：心脏病心态调节紧张情绪
- EB病毒潜伏膜蛋白2多表位DNA联合多肽的免疫效应研究被引量：1
- 2014年
- 目的研究HPV L1携带EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白2(LMP2)多表位DNA联合多肽的免疫效应。方法BALB/c雌性小鼠随机分为4组。pcHPVL1-EBV LMP2DNA免疫组,肌肉注射pcDNA3.1(+)/HPVL1-EBV LMP2多表位DNA,每鼠每次100μg;DNA联合多肽免疫组:先用DNA免疫,每鼠每次50μg,同时皮下注射EBV LMP2多表位肽,每鼠每次5μg;DNA免疫对照组:肌肉免疫空载体pcDNA3.1(+),每鼠每次100μg;多肽免疫对照组:每鼠每次10μg皮下注射不相关多肽。共免疫4次,间隔2周。免疫后第7周收集小鼠血清,采用ELISA法检测小鼠EBV LMP2特异性抗体IgG、IgA以及HPVL1特异性抗体IgG;免疫后第9周测定EBV特异性抗体IgG1与IgG2a亚类,同时采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定小鼠脾细胞CTL的杀伤活性。结果多肽联合DNA免疫组小鼠血清EBV LMP2特异性抗体IgG、IgA A值分别为1.573±0.025和0.436±0.033,单独DNA免疫组分别为1.282±0.051和0.317±0.022,差异有统计学意义(F=80.393,27.722,P<0.05);两免疫组小鼠血清HPV L1特异性IgG A值别为0.648±0.063和0.702±0.023,差异无统计学意义(F=1.952,P>0.05)。DNA免疫组IgG1和IgG2aA值别为0.723±0.023和0.594±0.084,差异无统计学意义(F=6.643,P>0.05),是混合Th1/Th2免疫反应类型;多肽联合DNA免疫组IgG1和IgG2aA值别为0.897±0.042和0.629±0.035,差异有统计学意义(F=72.306,P<0.05),是偏向Th2免疫反应类型。多肽联合DNA免疫组在效靶比为10︰1时,小鼠脾细胞CTL杀伤效应(杀伤率)为27.70%,DNA免疫组为21.50%,差异有统计学意义(F=51.559,P<0.05)。结论多肽联合DNA免疫可产生有效的CTL杀伤效应,更能发挥有效的体液免疫作用,其免疫策略可为EBV相关肿瘤的免疫治疗提供参考。
- 李文姝田晓娟林晓云刘建晓朱珊丽薛向阳张丽芳
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白2多表位联合免疫
- 弓形虫P30乳酸球菌口服免疫小鼠血清中IFN-γ、IL-2及NO含量的测定被引量：5
- 2006年
- 目的观察弓形虫P30乳酸球菌(L.lactis/P30)口服免疫鼠血清中细胞因子IFN-γI、L-2及NO的变化情况。方法L.lactis/P30口服免疫BALB/c小鼠,以gp42乳酸球菌组和生理盐水组为对照,在第3周、第9周及第12周分别收集各实验组小鼠血清,ELISA法测定血清IFN-γI、L-2含量;酶法测定NO浓度。结果L.lactis/P30口服免疫鼠血清中IFN-γI、L-2含量均显著高于两对照组,血清中NO含量随着免疫时间延长与两对照组差异逐渐明显。结论L.lactis/P30口服免疫能有效刺激小鼠细胞因子IFN-γ和IL-2的产生及NO分子的释放。
- 李文姝陆惠民张惠琴黄伟达
- 关键词：弓形虫口服免疫NO
- 透明质酸酶在弓形虫重组融合抗原ROP2-P30基因免疫中的免疫增强作用被引量：1
- 2009年
- 目的:研究透明质酸酶在弓形虫重组融合抗原ROP2-P30基因免疫中的免疫增强作用,初步探讨透明质酸酶在提高质粒DNA分子免疫效应中的应用潜能。方法:弓形虫重组质粒pcROP2-P30联合透明质酸酶以及单独的重组质粒pcROP2-P30肌肉注射免疫BALB/c雌性小鼠,生理盐水和空质粒载体pcDNA3.1作阴性对照免疫,免疫3次,间隔3周。免疫结束后,以纯化的弓形虫重组蛋白ROP2-P30(rROP2-P30)为检测抗原,检测各免疫组小鼠血清中特异性抗体的形成;cell counting kit-8(CCK-8)检测免疫鼠脾细胞的增殖活性;硝酸还原酶法检测免疫鼠脾细胞培养上清中NO的含量。结果:pcROP2-P30+透明质酸酶免疫组特异性抗体生成水平显著高于其它免疫组(均P<0.01);pcROP2-P30+透明质酸酶免疫组小鼠脾细胞受特异性抗原rROP2-P30刺激后,其淋巴细胞的增殖明显高于单独的质粒pcROP2-P30免疫组(P<0.01);pcROP2-P30+透明质酸酶免疫组脾细胞培养上清中免疫活性分子NO的含量也显著升高(均P<0.01)。结论:透明质酸酶在提高弓形虫DNA免疫效应方面显示了免疫增强作用,具有发展成为基因免疫的免疫佐剂的潜能。
- 李文姝孟锐锋张丽芳朱珊丽闵太善
- 关键词：透明质酸酶弓形虫免疫增强
- 一种对沙眼衣原体MOMP具有结合亲和力的多肽及其应用
- 本发明涉及一种对沙眼衣原体主要外膜蛋白特异性结合的多肽及其应用，首次揭示了一种对沙眼衣原体主要外膜蛋白具有结合亲和力的多肽；本发明还提供了该多肽的在诊断检测中的应用，并作为靶向载体在药物或分子靶向试剂的诊断或治疗用途。
- 朱珊丽张丽芳董海艳陈俊石威李文姝李明洋
- 文献传递
- 人源类溶菌酶蛋白4的多克隆抗体制备及其表达分析被引量：4
- 2017年
- 目的:以原核表达的人源类溶菌酶蛋白4(LYZL4)为免疫原制备多克隆抗体,检测LYZL4在睾丸组织中的定位,为阐明其生理功能提供依据。方法:将LYZL4编码基因克隆于原核表达载体pET32a,IPTG诱导重组LYZL4(r LYZL4)表达。分别使用Ni-NTA树脂和甲壳素亲和层析纯化rLYZL4,采用双层琼脂平板扩散法检测杀菌活性。以Ni-NTA树脂纯化产物为免疫原制备兔抗rLYZL4多克隆抗体,通过ELISA测定抗体效价,Western印迹检测抗体特异性后,检测LYZL4蛋白在人体各组织的分布及其在精子和精浆中存在情况,免疫组化确认LYZL4在人睾丸组织中的定位。结果:原核表达系统可有效表达rLYZL4,其对溶壁微球菌及大肠杆菌无杀灭活性。制备的兔抗rLYZL4多克隆抗体具有很高的效价和特异性,在睾丸、附睾及人精子蛋白提取物中可检测到LYZL4存在,在生精小管中,LYZL4定位于圆形精子细胞及长形精子细胞的顶体上。结论:本研究成功以原核表达的rLYZL4制备了该蛋白的多克隆抗体,确认LYZL4在睾丸和附睾有表达,并定位于精子顶体上,提示其可能与顶体结构或功能相关。
- 黄鹏杨智昉徐一新鲍建瑛张宁曹晓娥李文姝
- 关键词：原核表达系统多克隆抗体睾丸精子
- 一种对HPV18E6蛋白具结合亲和力的多肽及其应用
- 本发明提供一种对HPV18E6蛋白具有结合亲和力的多肽，以葡萄球菌A蛋白的Z结构域作为支架，将其表面氨基酸残基模拟抗体结合位点进行随机突变，通过噬菌体展示技术构建突变文库，以HPV18E6作为靶抗原对该文库进行亲和筛选，...
- 张丽芳朱珊丽陈俊李文姝张静
- 呼出气中挥发性有机化合物检测在肺癌早期诊断中的应用
- 2018年
- 目的:探讨呼出气中挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs)检测在肺癌早期诊断中的应用价值。方法:采用气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GCMS)方法检测肺癌患者与健康对照者呼出气中VOC成分和含量的变化,筛选可用于肺癌早期诊断的挥发性物质。结果:在受试者呼出气中检测到24种VOC,其中肺癌患者呼出气中3-己烯-2-酮和3-羟基-2-丁酮的平均峰面积明显大于对照组(P值均<0.05)。进展期(Ⅲ和Ⅳ期)肺癌患者呼出气中3-己烯-2-酮和3-羟基-2-丁酮的平均峰面积均显著大于早期(Ⅰ和Ⅱ期)肺癌患者(P值均<0.05),2组患者呼出气中3-己烯-2-酮和3-羟基-2-丁酮的平均峰面积均明显大于对照组(P值均<0.05)。小细胞肺癌患者呼出气中3-羟基-2-丁酮的平均峰面积显著大于非小细胞肺癌患者(P <0.05),3-己烯-2-酮的含量在2组间的差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:肺癌患者呼出气中3-己烯-2-酮和3-羟基-2-丁酮含量明显增高,提示这2种物质可用于肺癌早期诊断的挥发性指标,呼出气GC-MS检测方法对于肺癌的早期诊断具有良好的应用价值。
- 张宁孙庆文李文姝李宏韩力黄鹏
- 关键词：肺肿瘤挥发性有机化合物气相色谱-质谱法
- 弓形虫优势表位融合于HPV16L1“N端”的融合体可显著提高表位免疫反应性
- 2021年
- 弓形虫和人乳头瘤病毒(HPV)具有共同的免疫保护人群,选择HPV16型晚期结构蛋白1(HPV16L1)为载体,携带弓形虫多表位(RSepitope)以期提高表位免疫原性同时可实现共免疫效应。文中分别以构建的融合体RSepitope-HPV16L1(RSepitope融合于HPV16L1"N"端)以及HPV16L1-RSepitope(RSepitope融合于HPV16L1"C"端),脂质体转染COS-7细胞后,RSepitope-HPV16L1融合体形式可以在转染细胞中得到有效转录和翻译,分别可检测到相应的RSepitope和HPV16L1的mRNA和蛋白,但HPV16L1-RSepitope融合体形式在转染细胞中检测不到目标抗原的mRNA和蛋白。融合体采用"DNA初免-蛋白质加强免疫"的方案免疫BALB/c小鼠,酶联免疫吸附试验(ELISA)和酶联免疫斑点试验(ELISPOT)分别检测到RSepitope-HPV16L1免疫鼠血清中显著升高的体液和细胞免疫反应(即最高水平的RSepitope特异性抗体IgG和IFN-γ),且比较单独RSepitope免疫组(不与HPV16L1融合),产生的是显著升高的Th1和Th2免疫反应类型,提示HPV16L1作为表位载体的优势效应。而HPV16L1-RSepitope融合体形式体内也未能诱导有效的免疫反应。以上研究提示,HPV16L1"N"端可能是较为合适的表位融合位置,融合体表位特异性免疫学效应显著提高,研究结果为提高表位疫苗的免疫原性提供了一个合理的载体融合策略。
- 谭晓淳林中民吕金辉谢自新陈薪安李文姝
- 关键词：弓形虫HPV16L1免疫效应
- 人乳头瘤病毒16型E7过表达细胞的鉴定及其迁移效应的影响被引量：1
- 2021年
- 鉴定人乳头瘤病毒16型早期蛋白7(HPV16E7)过表达细胞及其迁移效应的影响,为后续基于HPV16E7靶向分子作用机制的研究奠定工作基础。脂质体转染法将本室保存的pcDNA3.1⁃HPV16E7重组真核表达质粒分别转染人胚肾293T细胞(HPV16型DNA阴性)、宫颈癌SiHa细胞株(HPV16 DNA阳性),转染48 h后收集细胞,提取RNA,RT⁃PCR扩增相应的目的基因,Western Blotting和间接免疫荧光实验检测HPV16E7目的蛋白在细胞中的表达。转染24 h的细胞进行细胞划痕和Transwell实验,检测过表达细胞迁移行为的变化。RT⁃PCR结果显示:分别从E7质粒转染的293T、SiHa细胞的cDNA中,均可扩增到250 bp的目的条带;Western Blotting分析结果显示:以HPV16E7单克隆抗体为检测抗体,转染细胞的裂解液中均能在相对分子质量(Mr)约为15000处出现特异性目的条带;间接免疫荧光结果显示:转染细胞中均能检测到目的绿色荧光,且分布于胞浆及细胞核周围;细胞划痕和Transwell实验结果显示:转染E7细胞的迁移效应显著提高。本研究证实了HPV16E7转染细胞后可成功表达,且过表达细胞明显促进了细胞迁移行为,为后续基于HPV16E7迁移相关分子机制及靶向干预等研究奠定了前期工作基础。
- 谭晓淳姜洁林中民谢自新蒋朋飞张丽芳李文姝
- 关键词：人乳头瘤病毒16型E7过表达迁移
