李红海
- 作品数：7 被引量：27H指数：3
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- 环介导恒温扩增方法检测痰液标本中的肺炎链球菌
- 肺炎链球菌(S.pneumoniae)是一种临床常见的重要病原菌,其常导致大叶性肺炎、支气管炎等。对痰液中肺炎链球菌的检测是判断肺炎、支气管炎致病原因的重要手段。传统检测肺炎链球菌的方法包括菌落形态、奥普托欣敏感试验、血...
- 李红海李向阳杨锦红鲁勇陈丽
- 文献传递
- 环介导等温扩增检测肺炎链球菌方法的建立及临床应用被引量：9
- 2008年
- 目的建立环介导等温扩增（LAMP）快速检测肺炎链球菌的方法。方法根据美国国家生物信息中心（GenBank）上提交的肺炎链球菌R6株的lytA基因序列（登录号AE008540）设计特异LAMP引物，以盐酸胍-苯甲醇法提取阳性血培养瓶中细菌DNA，然后以LAMP技术扩增lytA基因，反应条件为63℃45min，采用肉眼观察浊度和琼脂糖电泳的方法来观察结果。结果在196份阳性血培养瓶中，采用LAMP法检测到肺炎链球菌16株，与传统方法比较，其检测肺炎链球菌的灵敏度和特异度均达到100％，且检测时间缩短为1h左右。模拟标本的检测结果显示该方法的最低检测限为10^2CFU／ml。结论该方法灵敏度高，特异性强，操作方便快速，适合从临床标本中检测肺炎链球菌。
- 周义正陈丽李红海杨锦红李向阳
- 关键词：链球菌肺炎核酸扩增技术
- MicroScan Walkaway96全自动微生物分析仪检测超广谱β-内酰胺酶结果评价
- 超广谱β-内酰胺酶(Extended spectrum beta lactamases ESBLs)主要是由大肠埃希菌和克雷伯菌属等肠杆菌科细菌在抗生素选择压力下产生。产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是医院感染的重...
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- 文献传递
- 环介导恒温扩增方法检测痰液标本中的肺炎链球菌被引量：7
- 2009年
- 目的:建立在痰标本中应用环介导恒温扩增(LAMP)技术对肺炎链球菌进行快速检测的方法。方法:根据基因序列数据库(GenBank)上提交的肺炎链球菌R6株的lytA基因序列(登陆号AE008540)设计特异LAMP引物,对痰液标本进行LAMP法检测。同时进行传统微生物检测和PCR检测。结果:所有传统微生物检测肺炎链球菌阳性的27例标本在LAMP法检测和PCR检测中也为阳性,在传统微生物检测肺炎链球菌阴性的27例标本中LAMP法有9例检出阳性,PCR法有4例阳性,统计分析表明3种方法的阳性率没有显著性差异。结论:尽管3种方法的阳性率没有显著性差异,但由于LAMP法能够更加快速、简便地检出肺部的肺炎链球菌感染,所以LAMP法对快速诊断肺炎链球菌感染仍有重要的意义。
- 李红海李向阳杨锦红鲁勇陈丽
- 关键词：肺炎链球菌核酸
- 实时荧光定量PCR检测阴道加德纳菌的方法与应用被引量：2
- 2009年
- 目的：建立检测阴道加德纳菌的实时荧光定量PCR方法，用于细菌性阴道病的诊断。方法：按照Amsel诊断标准诊断细菌性阴道病；定性PCR检测患者阴道分泌物中的阴道加德纳菌；实时荧光定量PCR测定患者阴道分泌物中的阴道加德纳菌的DNA含量，同时测定标本中总的细菌16SrRNA的DNA含量进行校正，即用阴道加德纳菌的DNA含量／16Sr RNA的DNA含量比值来表示阴道加德纳菌的相对含量。用受试者工作曲线（ROC）评价对细菌性阴道病的诊断价值。结果：定性PCR的特异度为31．9％，敏感度为93．2％。实时荧光定量PCR检测阴道加德纳菌含量的线性范围1×10～1×10^5拷贝数／ml。阴道加德纳菌在细菌性阴道病中的相对含量为0．5613400，明显高于霉菌性阴道炎（P〈0．01）、其他阴道炎（P〈0．01）及健康体检者（P〈0．01）。但与滴虫性阴道炎无明显差异（P〉0．05）。ROC曲线分析结果显示，曲线下面积（AUC．ROC）为0．909，当阴道加德纳菌的DNA含量／16Sr RNA的DNA含量的截断值为0．1026035时，其诊断细菌性阴道病的总体敏感度和特异度分别为92．9％和80．3％。结论：实时荧光定量PCR检测阴道加德纳菌的方法敏感度和特异度较高，准确性和重复性良好。对细菌性阴道病的诊断有一定的临床应用价值。
- 陈丽李红海鲁勇李向阳杨锦红
- 关键词：阴道加德纳菌细菌性阴道病实时荧光定量PCR
- LAMP快速检测沙门菌invA基因的方法建立与应用被引量：8
- 2009年
- 目的:建立一种环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)反应快速检测沙门菌的方法。方法:根据美国国立卫生研究院基因序列数据库(GenBank)上的鼠伤寒沙门菌的特异invA和fimA(登录号:M90846和M18283)基因序列,设计特异引物,提取标本DNA,然后以LAMP技术扩增invA基因,PCR方法扩增fimA基因,采用琼脂糖电泳观察结果。结果:91份血培养阳性报警瓶,LAMP和PCR法检测出阳性18份,与最终培养结果一致;30份粪便标本,LAMP和PCR法检测出阳性5份,培养阳性3份,LAMP测限达到102CFU/mL。结论:LAMP是一种简便、快速、特异和敏感的检测临床和环境标本中沙门菌的有效方法。
- 鲁勇李红海陈丽李向阳杨锦红
- 关键词：沙门菌核酸
- 环介导恒温扩增法检测痰液标本中肺炎链球菌被引量：1
- 2009年
- 目的建立环介导恒温扩增(LAMP)技术快速检测痰标本肺炎链球菌的方法。方法根据基因序列数据库(GenBank)的肺炎链球菌R6株lytA基因序列(AE008540)设计特异LAMP引物,对痰液标本进行LAMP法检测,同时进行传统微生物检测和PCR检测。结果传统微生物检测肺炎链球菌阳性的27例标本,LAMP法检测和PCR检测也为阳性;在传统微生物检测肺炎链球菌阴性的27例标本中,LAMP法有9例检出阳性,PCR法有4例阳性,统计分析表明三种方法的阳性率无显著性差异。结论三种方法检测的阳性率无显著性差异,但LAMP法能够更快速、简便地检出肺炎链球菌感染。
- 李红海李向阳杨锦红鲁勇陈丽
- 关键词：肺炎链球菌核酸
