李雪琴
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：安徽医科大学研究生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 猪链球菌2型表面蛋白Fhb与补体系统组分蛋白相互作用分子机制的研究
- 猪链球菌2型/(Streptococcus suis serotype2，SS2/)是近年来新发的一种重要的人兽共患病病原体，人经伤口感染猪链球菌后主要引起脑膜炎、心内膜炎、败血症和链球菌中毒性休克综合征（STSS）等症...
- 李雪琴
- 关键词：猪链球菌2型相互作用天然免疫
- 文献传递
- 猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_1000的表达、纯化及活性分析被引量：1
- 2013年
- 目的构建猪链球菌细胞壁蛋白SSU05_1000基因的重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并研究其对细胞间紧密连接的调控作用。方法以05ZYH33基因组为模板设计引物,构建pET30a-SSU05_1000重组表达质粒,转化到大肠杆菌中诱导表达,用镍亲和层析的方法对目的蛋白进行纯化,Western blot检测其对人脑微血管内皮细胞紧密连接的调控。结果构建的SSU05_1000重组表达质粒能够在大肠杆菌中高效表达,纯化的SSU05_1000蛋白纯度达90%以上,Western blot结果显示其与人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)相互作用后,可以下调细胞间紧密连接蛋白Claudin-5的表达。结论 SSU05_1000蛋白能够破坏人脑微血管内皮细胞的紧密连接结构,提示其在猪链球菌穿血脑屏障(BBB,bloodbrain barrier)过程中起重要作用。
- 王涛郑玉玲袁媛江华郝淮杰李雪琴姜永强
- 关键词：猪链球菌
- 2型猪链球菌双组分调控系统SalK/SalR抗吞噬机制的初步研究
- 2013年
- 目的确定双组分调控系统SalK/SalR在2型猪链球菌抵抗THP-1单核细胞来源的巨噬细胞(THP-MΦ)吞噬中的作用。方法透射电子显微镜观察野生株05ZYH33和突变株ΔsalKR荚膜的变化,革兰氏染色及免疫荧光方法观察猪链球菌与THP-MΦ细胞的相互作用,通过THP-MΦ细胞吞噬模型评价猪链球菌的抗吞噬能力。结果透射电子显微镜观察发现突变株ΔsalKR荚膜消失,革兰氏染色结果和免疫荧光标记实验显示salKR缺失导致更多的猪链球菌被THP-MΦ细胞吞噬,THP-MΦ细胞吞噬模型进一步证实突变株ΔsalKR比野生株更容易被THP-1细胞吞噬。结论双组分调控系统SalK/SalR通过调控荚膜的形成来抵抗THP-MΦ细胞的吞噬。
- 付忠琳骈亚亚李雪琴郑玉玲马世良袁媛霍春月
- 关键词：2型猪链球菌荚膜
- 猪链球菌H因子结合蛋白截短体的表达、纯化及其结合人血清IgG的活性分析
- 2014年
- 目的构建带His标签的2型猪链球菌H因子结合蛋白(Fhb)截短表达片段Fhb-N(45-344aa)和Fhb-C(345-664aa)的重组质粒,并在大肠杆菌中表达,获得高纯度的重组蛋白,鉴定其与人血清IgG(hIgG)结合的活性。方法以05ZYH33基因组为模板并设计引物扩增目的片段,构建His-Fhb-N和His-Fhb-C重组表达质粒,利用亲和层析纯化目的蛋白并用Western blot法进行验证。蛋白G亲和层析柱从健康人血清中纯化人IgG(hIgG),Western blot法和生物膜干涉(BLI)鉴定和分析His-Fhb与hIgG结合的活性。结果成功构建了带His标签的原核表达质粒并获得了His-Fhb-N和His-Fhb-C截短表达蛋白,验证出Fhb特异性地与hIgG结合,且结合区域位于Fhb-N(45-344aa)。结论 Fhb能够结合hIgG,结合区域位于Fhb-N。
- 李雪琴刘鹏骈亚亚郑玉玲姜永强袁媛霍春月
- 关键词：2型猪链球菌
