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杜文华

作品数：10 被引量：34H指数：5
供职机构：西南大学生物技术学院更多>>
发文基金：重庆市科技攻关计划中央高校基本科研业务费专项资金重庆市蚕桑重大科技专项更多>>
相关领域：生物学农业科学环境科学与工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 6篇生物学
  • 5篇农业科学
  • 1篇环境科学与工...

主题

  • 8篇家蚕
  • 5篇基因
  • 4篇氟化物
  • 3篇克隆
  • 3篇基因克隆
  • 2篇转基因
  • 2篇P450基因
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白结构
  • 1篇多态
  • 1篇多态性
  • 1篇序列标签
  • 1篇原核表达
  • 1篇蜘蛛
  • 1篇蜘蛛丝
  • 1篇蜘蛛丝蛋白
  • 1篇中肠
  • 1篇中毒
  • 1篇色素P450
  • 1篇识别方法

机构

  • 10篇西南大学

作者

  • 10篇杜文华
  • 9篇朱勇
  • 7篇米智
  • 7篇隆耀航
  • 4篇李冠楠
  • 4篇阮成龙
  • 3篇曾媛琴
  • 2篇付巧娟
  • 2篇赵天福
  • 2篇李傲祥
  • 1篇张春冬
  • 1篇张金叶
  • 1篇李姣蓉
  • 1篇邹勇
  • 1篇柳照应
  • 1篇辛佳
  • 1篇徐康隆

传媒

  • 5篇蚕业科学
  • 2篇昆虫学报
  • 1篇生态学报
  • 1篇蚕学通讯

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2013
  • 3篇2012
  • 2篇2011
  • 3篇2010
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
家蚕细胞色素P450基因Bmcyp6u1的克隆、序列分析与表达谱被引量：5
2010年
细胞色素P450第6亚家族基因为昆虫所特有,与抗性相关。为了检测家蚕Bombyx mori cyp6u1基因是否与耐氟性相关,首先克隆了cyp6u1基因。采用生物信息学方法获得与黑腹果蝇Drosophila melanogaster cyp6u1基因同源的家蚕B.moricyp6u1基因序列,预测该序列的开放阅读框(ORF)为1476bp,编码491个氨基酸,推定的蛋白质分子质量为56.15kD,等电点为9.23。以家蚕5龄第3天幼虫精巢cDNA为模板,设计特异引物PCR扩增出一条约1500bp的条带,大小与家蚕cyp6u1序列的ORF预测值接近,命名为Bmcyp6u1基因(GenBank登录号:HM130560)。同源性分析表明,Bmcyp6u1基因与蜜蜂Apis mellifera的同源基因cyp6AS13的相似性为56%,与拟南芥Arabidopsis thaliana的cyp72A82的相似性为48%,与人Homosapiens的cyp3A7基因的相似性为50%。芯片数据分析表明,Bmcyp6u1基因在家蚕5龄第3天幼虫各组织表达量很低,只在精巢组织(5龄第3天)稍有表达,推测该基因具有组织特异性。
曾媛琴徐康隆邹勇张金叶张春冬杜文华隆耀航米智朱勇
关键词：家蚕基因克隆
氟化物对不同抗性家蚕品种的GST和AChE酶活性影响及雌雄个体间的酶活性差异被引量：4
2012年
为了探明家蚕的耐氟性机制以及耐氟性在不同性别蚕体间的差异,以家蚕耐氟品种T6和氟化物敏感品种734为材料,自5龄起蚕开始分雌雄喂食清水和200 mg/kg NaF溶液浸泡后的桑叶,检测幼虫中肠谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和头部乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性变化。添食氟化物后耐氟和敏感家蚕品种5龄幼虫中肠的GST活力随添氟时间的变化趋势与对照组比较一致,且与对照组相比酶活性均呈增高趋势;敏感品种734添氟组5龄雌蚕的GST平均活力为雄蚕的1.486倍,耐氟品种T6添氟组5龄雌蚕的GST平均活力为雄蚕的1.529倍。敏感品种734对照组5龄幼虫在试验第3天头部的AChE酶活性显著升高,但添氟组雄蚕在试验第2天AChE酶活性即显著升高,而雌蚕的AChE酶活性在整个5龄试验期均呈平缓下降趋势;耐氟品种T6添氟组5龄雌、雄幼虫的AChE活力与对照组差异不大,酶活力随添氟时间的变化趋势也与对照组较为一致,均在第3天出现最低值;2个品种添氟组AChE酶活性的性别差异与GST相反,即雄蚕的AChE平均活力大于雌蚕。推测氟化物处理后耐氟家蚕品种仍然能够保持AChE酶活性水平,从而呈现对氟化物的耐受性;2种类型解毒酶活力在雌雄家蚕间的差异可能暗示同一品种雄蚕的耐氟能力较多涉及靶标抗性,而雌蚕的耐氟能力较多依赖于代谢抗性。
阮成龙米智杜文华李冠楠隆耀航朱勇
关键词：家蚕氟化物抗性谷胱甘肽-S-转移酶
家蚕细胞色素P450基因Bmcyp6A8的克隆及序列与表达分析被引量：1
2010年
昆虫细胞色素P450第6亚家族(CYP6)氧化酶在对异源有毒物质的代谢中具有重要作用。采用生物信息学方法获得与果蝇CYP6亚家族基因cyp6A8同源的家蚕cyp6A8基因序列,预测该基因的开放阅读框(ORF)为1572bp,编码523个氨基酸,推定的蛋白分子质量为61.52kD,等电点为8.17。以家蚕5龄第3天幼虫头部cDNA为模板,用设计的特异引物PCR扩增出一条约1500bp的条带,大小与家蚕cyp6A8基因的ORF预测值接近,命名为Bmcyp6A8基因(GenBank登录号:GQ241737)。同源性分析结果:Bmcyp6A8基因与野桑蚕cyp6AE8基因的相似性为93%;与棉铃虫cyp6AE12基因的相似性为57%;与人cyp3A43基因的相似性为48%。芯片数据分析显示Bmcyp6A8基因在家蚕5龄第3天幼虫的头部、表皮与中部丝腺前部高量表达,与家蚕CYP6亚家族的其它横向同源基因不同的是,只有该基因在中部丝腺前部表达,推测其具有功能特异性。
曾媛琴米智隆耀航杜文华朱勇
关键词：家蚕基因克隆
棒络新妇蜘蛛拖牵丝蛋白基因编码序列的克隆及重组表达
蜘蛛丝既质轻又坚韧,是一种集强固性与柔韧性于一体的综合性能优良的天然蛋白质纤维,作为高性能材料在工业、军事如降落伞绳索、轻质吸能的军事防护服、航天用复合材料等方面有重要的应用价值。同时蜘蛛丝具有良好的生物相容性和可降解性...
杜文华
关键词：基因克隆原核表达转基因
文献传递
基于PCR的转基因家蚕快速识别方法
2017年
在转基因家蚕的制作方法中,基于piggyBac转座子的显微注射法是当前最常用和最有效的方法。通过piggyBac转座子方法获得的家蚕,由于其以随机方式切出和转座的特征,所获得家蚕的转入位置往往带有随机性,不可人为预测和控制。利用转基因插入位置的随机性,配合转入的目的基因序列识别,建立了家蚕指纹识别方法。该方法快捷方便,可用于转基因家蚕品种繁育过程中的品系识别和转基因家蚕知识产权的举证手段。
赵天福杜文华杜文华辛佳付巧娟朱勇
关键词：转基因家蚕PCR
氟化物对家蚕血液羧酸酯酶及全酯酶活性的影响被引量：3
2013年
为了探讨氟化物对家蚕代谢机制的影响,以家蚕耐氟品种T6和氟化物敏感品种734为研究对象,从5龄起蚕开始分别添食50、100、200、400mg/kg NaF溶液浸泡后的新鲜桑叶,检测家蚕血液中羧酸酯酶(CarE),全酯酶活性的变化。结果表明,734、T6添氟组的CarE活性分别是对照组的73%—88%和72%—81%,734两个低浓度添氟组的CarE活性与对照组和两个高浓度添氟组的差异极显著(P<0.01),T6各处理组之间的差异不显著。734、T6添氟组的全酯酶活性分别是对照组的89%—97%和73%—92%,734各处理组之间的差异不显著,T6对照组的全酯酶活性仅与最高浓度添氟组差异极显著(P<0.01)。说明氟化物对家蚕血液CarE和全酯酶活性具有一定的抑制作用。
米智阮成龙李姣蓉付巧娟杜文华李冠楠隆耀航朱勇
关键词：家蚕氟化物羧酸酯酶
添食氟化物对家蚕中肠组织细胞色素P450和b5含量的影响被引量：6
2010年
为了探讨家蚕对NaF的代谢机制,以家蚕耐氟品种T6和敏感品种734为材料,5龄起蚕分别添食用200、400mg/LNaF溶液浸泡后的桑叶,检测蚕体内氧化酶系重要成员细胞色素P450和b5的含量变化。添食NaF后的168h内,耐氟品种T6中肠组织的细胞色素P450含量比添食清水对照组高3～7倍,细胞色素b5含量的增长与细胞色素P450含量的增长具有较高的相关性(R2=0.8220);添食不同浓度NaF溶液的差异不显著。添食NaF后的24～48h,敏感品种734中肠组织的细胞色素P450含量迅速增加,为添食清水对照组的1～2倍,随后逐渐下降,细胞色素b5含量的增长与细胞色素P450含量的增长无较好的线性关系(R2=0.4727);添食不同浓度NaF溶液的差异不显著。在氟化物作用下,耐氟品种T6中肠组织的细胞色素P450、b5含量显著增加,对氟化物敏感品种734中肠组织的细胞色素P450、b5含量变化相对较小,推测细胞色素P450和b5与家蚕对氟化物的代谢具有一定关联。
米智柳照应朱勇李傲祥曾媛琴杜文华隆耀航
关键词：家蚕细胞色素P450细胞色素B5
家蚕氟中毒后中肠NADPH-细胞色素P450还原酶和NADPH-细胞色素C还原酶活性的变化被引量：6
2012年
为了探究家蚕对NaF的代谢机制,以家蚕耐氟品种T6和氟化物敏感品种734为材料,从5龄起蚕开始分别添食50、100、200、400 mg/kg NaF溶液处理后的桑叶,检测蚕体中肠微粒体酶液中的黄素蛋白NADPH-细胞色素P450还原酶(CPR)和NADPH-细胞色素C还原酶(CR)的活性变化。氟物化敏感品种734的4个NaF处理组第3天的中肠CPR活性低于对照组,其余时间几乎都高于对照组,400 mg/kg NaF处理组在第4天的CPR活性最高,且各NaF处理组的CPR活性差异显著(P<0.05);耐氟品种T6 NaF处理组和对照组的中肠CPR活性整体上呈先升后降的趋势,几乎都在第2天达到最高值,各组之间的差异不显著(P>0.05)。氟化物敏感品种734的4个NaF处理组的中肠CR活性呈现先升后降的趋势,而对照组呈下降趋势;耐氟品种T6的50、100、400 mg/kg NaF处理组在第1～2天的中肠CR活性呈明显下降趋势,之后的变化相对较小,对照组的CR活性仅在第3～4天略高于NaF处理组,而其余时间NaF处理组的CR活性较高。2个家蚕品种添食不同浓度NaF后的中肠CR活性差异均不显著(P>0.05)。试验结果显示,耐氟品种T6在NaF作用下中肠的CPR和CR活性变化范围(分别为对照组的0.4～2.0倍和0.3～2.9倍)远小于氟化物敏感品种734这2种酶的活性变化范围(分别为对照组的0.6～9.3倍和0.4～4.6倍)。初步推测CPR和CR与家蚕对氟化物代谢具有一定的关联。
米智阮成龙李冠楠杜文华隆耀航朱勇
关键词：家蚕氟化物
蜘蛛丝蛋白基因工程的研究进展被引量：6
2011年
蜘蛛丝是一种天然蛋白纤维。由于蜘蛛丝蛋白特殊的序列结构,使其具有独特的理化性能、力学性能及超收缩性能和优良的生物学性能。随着蜘蛛丝在多领域功能性材料应用价值的发掘,蜘蛛丝蛋白基因工程研究不断深入。简要介绍了蜘蛛丝的性能,重点综述蜘蛛丝蛋白序列基本结构和外源表达的研究,以及重组蜘蛛丝蛋白在多种宿主(包括细菌、酵母、植物、动物细胞及家蚕)中表达的研究进展,希冀通过基因工程的手段获得蛛丝蛋白并进行规模化开发生产得到更深入的研究与关注。
杜文华赵天福朱勇
关键词：蜘蛛丝力学性能蛋白结构
家蚕第12连锁群EST-SSR标记的筛选和分析被引量：6
2011年
为了探究家蚕Bombyx mori EST-SSR标记的多态性,对检索获得的家蚕第12连锁群的4465条EST序列进行了分析,整理和拼接后得到581条非冗余EST序列,总长度约为480kb。其中,有122条序列中共检测到154个EST-SSR,占所研究的EST序列的2.73%,平均每3.12kb含有一个EST-SSR。在所检测的EST-SSR中,三核苷酸和四核苷酸重复是主导类型,分别占总数的36.36%和28.57%,大部分表现为Perfect形式;核苷酸重复平均长度约为16.2bp,最长为30bp。进一步进行同源性分析,发现有26条序列可以在NCBI中检索到同源序列,在这些序列中一共含有40个SSR,其中14个(35.0%)位于5'-UTR,11个(27.5%)位于3'-UTR,15个(37.5%)位于CDS区。根据筛选到的微卫星序列设计11对引物,其中8对引物有扩增产物,且条带清晰;应用引物ES1204对8个家蚕品种进行PCR扩增都呈现多态性。结果说明通过家蚕EST数据库发掘SSR标记是一条可行的途径。
米智李傲祥阮成龙李冠楠杜文华隆耀航朱勇
关键词：家蚕连锁群表达序列标签EST-SSR标记多态性
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