杨万山
- 作品数：61 被引量：207H指数：9
- 供职机构：延边大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技厅资助项目吉林省中医药管理局中医药科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 蛴螬提取物抗肿瘤作用的实验研究被引量：7
- 2007年
- 目的探讨蛴螬提取物抗肿瘤作用及其作用机制。方法采用寇氏（Korbor）法计算小鼠急性经口LD50及其95％可信限；用蛴螬提取物灌胃观察其对S180荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用，并采用比色法测定S180荷瘤小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量。结果①蛴螬提取物的小鼠急性经口LD50及其95％可信限为48．73（46．43—51，14）g／kg；②蛴螬提取物小、中、大剂量组对小鼠移植性肉瘤S180实体瘤的抑瘤率分别为18．64％、39．47％、53．24％；③经过蛴螬提取物治疗后，荷瘤小鼠血清MDA较模型组明显下降，而SOD活性则显著增加（P〈0．01）。结论蛴螬提取物属低毒中药，具有抗氧化作用，可能是其抗肿瘤机制之一；蛴螬提取物在体内具有抑制小鼠移植性S180肉瘤生长的作用。
- 金龙男孙抒杨万山李基俊
- 关键词：蛴螬提取物抑瘤率超氧化物歧化酶丙二醛
- 千金藤素通过PI3K-AKT信号通路抑制前列腺癌细胞DU145增殖、侵袭和迁移被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨千金藤素(CEP)对前列腺癌细胞株DU145增殖、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:CCK-8测定药物浓度对细胞增殖的影响,细胞免疫荧光测定上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白荧光强度,迁移实验及划痕实验测定细胞转移能力,Western blot检测EMT相关蛋白及PI3K-AKT信号通路蛋白表达。结果:CEP≥10μmol/L时,可抑制DU145细胞增殖(P<0.05),Vimentin和Snail表达下降,E-cadherin表达增加(P<0.05),Vimentin荧光强度减弱,E-cadherin荧光强度增强(P<0.05),细胞侵袭迁移能力均被抑制(P<0.05),p-PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P<0.05)。结论:CEP可能通过PI3K-AKT信号通路抑制前列腺癌细胞DU145增殖、侵袭和迁移。
- 梁泽旭杨万山董秀哲
- 关键词：千金藤素增殖上皮-间充质转化PI3K-AKT
- MTT法检测蝙蝠葛活性成分的抑制肿瘤增殖作用被引量：7
- 2010年
- [目的]研究蝙蝠葛活性成分对多种瘤株的抑制肿瘤增殖作用.[方法]取体外培养的人宫颈癌Hela细胞株、人肺癌A-549细胞株及人肝癌HepG-2细胞株,给予蝙蝠葛活性成分作用24h,MTT法检测抑制增殖作用.[结果]蝙蝠葛活性成分作用于人宫颈癌Hela细胞株时,抑制率最高达到99.9%,对人肺癌A-549细胞株时最高达到99.4%,对人肝癌HepG-2细胞株时最高达到87.8%.[结论]蝙蝠葛活性成分对人宫颈癌Hela细胞株、人肺癌A-549细胞株及人肝癌HepG-2细胞株具有明显的抑制增殖作用,抑制率有随着质量浓度增加而升高的趋势.
- 杨万山孙抒吕贺
- 关键词：宫颈肿瘤肝肿瘤
- 蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡的影响被引量：9
- 2008年
- 目的:研究蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响,为天然药物蛴螬的开发提供实验和理论依据。方法:应用MTT法检测蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株的抗增殖作用及细胞毒活性;通过倒置显微镜、HE染色、吖碇橙(AO)/溴化乙啶(EB)荧光染色方法观察肿瘤细胞的形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;应用免疫细胞化学技术(S-P法)检测用药前后凋亡通路中Bcl-2、Fas、caspase-9、caspase-3的表达改变,探讨蛴螬提取物对凋亡通路的影响。结果:(1)用MTT法检测结果表明,蛴螬提取物在体外对MCF-7人乳腺癌细胞株有明显的抑制增殖作用,实验组与对照组相比其生长抑制率有显著差异(P<0.01),而且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性;(2)倒置显微镜观察表明,实验组可见胞核固缩、碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化;(3)HE染色表明实验组胞核浓缩呈蓝黑色、胞浆呈淡红色、核染色质浓缩、呈碎块状,有凋亡小体形成;(4)经AO/EB荧光染色观察结果表明,实验组出现凋亡细胞;(5)流式细胞仪结果表明实验组凋亡率明显增加,呈时间依赖性;(6)免疫细胞化学染色结果表明,实验组Bcl-2表达下调,Fas、caspase-3、caspase-9表达均上调,与对照组比差异显著(P<0.01)。结论:①蛴螬提取物在体外显著抑制MCF-7人乳腺癌细胞株增殖;②蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响机制可能是通过下调Bcl-2,上调Fas、caspase-3、caspase-9的蛋白表达而起作用,是经由细胞凋亡的线粒体途径和死亡受体途径来完成凋亡的启动和执行。
- 金华孙抒于柏艳杨万山金铁峰
- 关键词：蛴螬提取物MCF-7细胞蛋白质BCL-2半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 小白菊内酯对人肝癌细胞HepG-2细胞Caspase-3和NF-κB蛋白表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:研究小白菊内酯对人肝癌细胞Hep G-2增殖抑制和诱导凋亡作用的机制。为小白菊内酯在临床上早日应用于肝癌患者提供理论及实验依据。方法:用体外培养的方法培养人肝癌Hep G-2细胞;用四唑盐(MTT)比色法检测小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞的抗增殖及细胞毒作用;用倒置显微镜、HE染色光学显微镜;用免疫组织化学染色法检测小白菊内酯作用人肝癌Hep G-2前后Caspase-3、NF-κB蛋白阳性表达变化的情况。通过以上实验研究小白菊内酯在体外对人肝癌Hep G-2在细胞增殖、细胞凋亡等方面的影响及其作用机制。结果:(1)MTT法结果显示:小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞的作用影响具有浓度和时间依赖性;(2)细胞形态学观察:倒置显微镜观察到对照组细胞贴壁生长,伸展性良好,细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密。小白菊内酯作用人肝癌Hep G-2 24h以后,增殖速度减慢,细胞贴壁能力下降,细胞之间连接疏松。药物作用48h以后,增殖速度大大减慢,大部分细胞变圆漂浮在培养瓶中。药物作用72h以后,几乎无活细胞,并且可见死细胞碎片;HE染色光学显微镜下观察:对照组细胞呈梭形和多角形,细胞之间连接紧密,细胞胞浆丰富,细胞核完整;药物作用24h以后,细胞伸展减弱,有一部分细胞呈现圆形,细胞之间连接疏松,核浓缩,染色质出现边聚;药物作用48h后视野中可见凋亡细胞和死亡细胞,细胞浆浓缩、染色质浓缩成新月形和"出泡"现象的变化;(3)免疫组化结果显示:实验组Caspase-3表达增加,NF-κB表达降低,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞有明显的抑制增殖作用,呈现出浓度和时间的依赖性;小白菊内酯对人肝癌Hep G-2细胞株有诱导凋亡作用,其诱导人肝癌Hep G-2细胞凋亡机制可能与NF-k B、Caspase-3等信号转导有关。
- 韩琨景杨万山孙抒辛悦
- 关键词：小白菊内酯人肝癌HEPG-2细胞增殖抑制凋亡
- 小豆蔻明对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响及其机制被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨小豆蔻明(CAR)对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:宫颈癌HeLa细胞分为对照组(不进行任何处理)和不同浓度(10、20和40μmol∙L-1)CAR组(给予10、20和40μmol∙L-1CAR)。CCK-8法检测处理24、48和72 h后各组宫颈癌HeLa细胞活性,菌落形成实验检测各组宫颈癌HeLa细胞克隆形成数,Hoechst33258染色观察各组宫颈癌HeLa细胞凋亡形态表现,Western blotting法检测各组宫颈癌HeLa细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,各时间点不同浓度CAR组HeLa细胞活性明显降低(24 h:P=0.0118;48 h:P=0.0004;72 h:P=0.0022);与对照组比较,不同浓度CAR组HeLa细胞克隆形成数均明显降低(P<0.01);与对照组比较,不同浓度CAR组HeLa细胞出现明显核聚集、皱缩或碎裂的凋亡形态;与对照组比较,不同浓度CAR组HeLa细胞中Bcl-2、p-PI3K(P=0.0118)和p-AKT(P=0.0349)蛋白表达水平明显降低,Bax蛋白表达水平明显升高,Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.01)。结论:CAR通过调控PI3K/AKT信号通路诱导凋亡并抑制HeLa细胞增殖。
- 崔银峰柴梦钰杨万山潘颖
- 关键词：小豆蔻明宫颈肿瘤细胞增殖细胞凋亡
- γ-干扰素对MGC-803胃癌细胞株诱导凋亡作用及其机制研究被引量：9
- 2005年
- 目的 研究干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用,并 探讨其诱导凋亡作用的机制。方法 应用MTT法检测IFN对MGC-803胃癌细胞株的抗增殖作用的影响及细 胞毒活性;通过MTT染色法、HE染色、扫描电镜观察凋亡细胞的形态学改变;应用(TdT-mediateddUTPnick endlabeling)TUNEL法定量检测IFN γ诱导凋亡的情况;通过免疫细胞化学法测定P53、P16、C-myc、Bcl-2、Bax 的阳性表达率。结果 IFN-γ在1250～10000u/ml范围内对MGC-803胃癌细胞均有抑制作用(P<0.05), MTT染色法观察:正常肿瘤细胞着色均匀,凋亡细胞缩小成深蓝色,死亡细胞空泡样,不着色。扫描电镜及 TUNEL法均观察到实验组细胞体积变小,可见凋亡小体突出于肿瘤细胞表面。凋亡率随作用时间和浓度增加而 升高,实验组P53、P16、C-myc蛋白表达没有明显变化(P>0.05),Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达上调,与对 照组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论 IFN-γ可抑制MGC-803胃癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡。其 作用机制可能是与通过上调肿瘤细胞Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达有关。
- 李雪梅孙抒王建光李香丹杨万山
- 关键词：MGC-803诱导凋亡BCL-2蛋白表达P^16细胞体积凋亡小体
- CIK细胞对MGC-803胃癌细胞株抗增殖及诱导凋亡作用的研究被引量：13
- 2004年
- 目的 :研究多种细胞因子诱导的杀伤细胞 (Cytokine inducedkillcells ,CIK)对MGC 80 3胃癌细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用 ,并探讨其作用机制。方法 :应用MTT法检测CIK细胞对MGC 80 3胃癌细胞株的抗增殖作用的影响及细胞毒活性 ;通过HE染色、扫描电镜和透射电镜观察凋亡细胞的形态学改变 ;通过免疫细胞化学法测定p5 3、p16、C myc的阳性表达率。结果 :MTT比色法表明随着CIK细胞与胃癌细胞效靶比增加及作用时间延长 ,抑制率明显增强 (P <0 0 1)。CIK细胞作用于胃癌细胞 2 4小时后 ,形态学观察胃癌细胞发生凋亡或坏死。CIK实验组p5 3、p16、C myc蛋白随作用时间延长表达均下降 ,与对照组相比均有显著性差异 (P <0 0 1)。结论 :CIK细胞是一种新型高效具有较强杀伤体外胃癌细胞的免疫活性细胞。其杀伤MGC 80 3胃癌细胞的作用机制之一可能是通过下调p5 3、C myc的蛋白表达。
- 孙抒李雪梅王建光杨万山李香丹
- 关键词：CIK细胞P53蛋白表达P16蛋白表达C-MYC蛋白表达
- 蛴螬提取物诱导人肺癌A549细胞凋亡的机制研究被引量：7
- 2009年
- 目的:观察蛴螬提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法:采用MTT法检测蛴螬提取物对人肺癌A549细胞的生长抑制率;用HE染色方法观测凋亡细胞的形态学变化;运用免疫组织化学SP法检测用药前后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达改变。结果:用蛴螬提取物处理的人肺癌A549细胞生长抑制率明显高于对照组;施药早期细胞出现凋亡形态学变化;A549细胞经蛴螬提取物处理后CyclinD1表达均下降。结论:蛴螬提取物在体外对人肺癌A549细胞株有显著的增殖抑制作用,其机制与下调CyclinD1的表达有关。
- 崔春爱李莉杨万山孙抒
- 关键词：蛴螬A549CYELIND1凋亡
- 小白菊内酯对人宫颈癌Hela细胞株生长与迁移的影响及其相关分子机制的研究被引量：2
- 2017年
- 目的探讨小白菊内酯对人宫颈癌Hela细胞株生长与迁移的影响及其相关分子机制，为小白菊内脂的进一步抗肿瘤药物研发提供实验基础。方法应用CCK-8检测细胞活性，HE染色观察细胞形态学变化，细胞划痕实验检测细胞迁移能力的变化；细胞免疫化学染色检测BCL-2和NF—κB基因在细胞内表达，Western—blot方法检测细胞迁移相关蛋白Twist—relatedprotein1（Twistl）表达的变化。结果小白菊内酯作用后的Hela细胞的生长受到抑制，并诱导细胞凋亡。肿瘤细胞的迁移能力受到明显的抑制，实验组和对照组差异显著（P〈0．05），但是24h和48h差别并不明显；BCL-2和NF—κB基因在细胞内表达明显下调，Twistl表达明显下调，和Oh比较区别显著（P〈0．05），但是24h和48h并无明显区别。结论小白菊内酯能够抑制Hela细胞株生长与迁移能力，可能和抑制BCL-2，NF—κB基因与Twistl表达有关。
- 杨万山陈升宏孙抒刘成俊盛晴宇潘颖玄延花
- 关键词：小白菊内酯HELA细胞株
