柳刚
- 作品数：97 被引量：226H指数：8
- 供职机构：山东大学第二医院更多>>
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- 人脐带间充质干细胞共培养改善改善高糖诱导的足细胞凋亡:HGF的介导作用
- 目的 探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对高糖诱导的足细胞凋亡的影响及机制.方法 细胞分组为:(1)正常糖组(NG);(2)高糖组(HG);(3)甘露醇组(NG+MA);(4)HUC-MSCs 共培养组(HUC-...
- 柳刚关广聚齐文文吕莎莎程静宋燕明彤彤
- 尿绒毛膜酶试剂盒的研制及在糖尿病肾病早期诊断中的价值
- 关广聚曹娅丽胡晓燕柳刚李龙凯李学刚文蓉珠
- 该研究首先通过分离纯化尿中绒毛膜包囊，再通过免疫动物、细胞融合、传代培养等方法制备尿绒毛膜包囊抗体；将制备的抗体纯化后包被酶标板，研制出了具有较高敏感性和特异性的尿绒毛膜酶（又称刷状缘酶）检测试剂盒；然后将该试剂盒应用于...
- 关键词：
- 关键词：糖尿病肾病
- 阻断血管紧张素ⅡⅠ型受体对糖尿病大鼠肾脏MIF表达的影响及意义
- 关广聚吕学爱柳刚李学刚吴涛孙巧玲
- 肾淋巴管结扎对单肾切除大鼠的肾损害作用
- 2009年
- 目的:探讨肾淋巴循环障碍及单侧肾脏切除对大鼠肾脏功能结构的损害。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为3组:双肾淋巴管结扎组(2KL),左肾淋巴管结扎伴右肾切除组(1KL),假手术组(sham)。分别在术后1、2、4、8周每组各处死6只。测定24 h尿蛋白和血尿肌酐。用PAS和Masson染色观察肾组织病理改变。用RT-PCR检测TGF-β1、Smad2/3、I型胶原(col I)mRNA的表达量;用免疫组化和Western blotting方法检测组织col I、TGF-β1、Smad2/3和磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)的蛋白表达量及主要表达部位。结果:2KL和1KL大鼠出现明显的蛋白尿和肾功能衰竭,1KL大鼠的肾脏损害尤其明显,随着时间推移逐渐加重,并出现明显的组织病理改变。2KL和1KL大鼠肾组织中col I、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3的蛋白和(或)基因表达水平也明显增高(P<0.01),且主要表达在肾小管上皮细胞及肾间质。1KL大鼠的表达也明显高于2KL大鼠。结论:肾淋巴循环障碍可导致大鼠肾脏功能及小管间质的损害,并随时间而加重。当淋巴循环障碍伴对侧肾切除时,损害明显加重。
- 柳刚孙玫李德祥张桃艳关广聚陈兵李学刚
- 关键词：淋巴循环肾切除术转化生长因子Β
- 高同型半胱氨酸血症与2型糖尿病脑梗死的关系及其影响因素的研究被引量：7
- 2005年
- 目的研究高同型半胱氨酸血症(HHcy)与2型糖尿病脑梗死之间的关系及其影响因素.方法应用高效液相色谱分析方法测定2型糖尿病脑梗死组(DS组)、2型糖尿病无并发症组(DNC组)患者和正常对照组血Hcy浓度,放免方法测定各组的叶酸、维生素B12水平.结果 DS组、DNC组的Hcy水平和HHcy的发生率均显著高于正常对照组(均P＜0.05);DS组的Hcy水平及HHcy发生率显著高于DNC组(均P＜0.05).单因素相关分析显示2型糖尿病患者血中Hcy水平与体质量指数、尿素氮、肌酐(Cr)、糖化血红蛋白(HbAlc)、Cr清除率呈正相关(r=0.455、0.36、0.48、0.4,P＜0.05～0.01),与叶酸、维生素B12水平呈负相关(r=-0.21、-0.34,均P＜0.05);多元逐步回归分析示维生素B12、HbAlc、Cr清除率和叶酸是影响Hcy水平的因素.结论 HHcy是2型糖尿病脑梗死的一个危险因素.2型糖尿病患者Hcy水平受维生素B12、叶酸、肾功能以及代谢紊乱程度的影响.
- 牟忠卿陈丽董明侯新国柳刚
- 关键词：脑梗死糖尿病同型半胱氨酸高同型半胱氨酸血症
- 人脐带间充质干细胞共培养减轻高糖诱导的足细胞固有免疫反应被引量：1
- 2017年
- 目的探讨人脐带间充质干细胞（HUC-MSCs）对高糖状态下Toll样受体（TLR）介导的足细胞固有免疫反应的影响。方法将小鼠足细胞分为4组：正常糖浓度组（NG）、甘露醇组（NG＋MA）、高糖浓度组（HG）、高糖浓度下足细胞与HUC—MSCs共培养组（HG＋MSC）。刺激72h后，ELISA方法检测各组培养基上清中炎性因子白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子仅（TNF-α）、TLR配体热休克蛋白70（HSP70）、高迁移率族蛋白1（HMGB1）的表达，实时定量PCR法检测各组细胞表面及细胞提取物中TLR2、TLR4的mRNA表达，Western印迹检测TLR2、TLR4、髓样分化因子88（MyD-88）、磷酸化P65（p-P65）的蛋白表达，免疫荧光染色观察P—P65在足细胞内的定位。结果与NG组比较，HG组炎性因子IL-6、TNF-α、TLR配体HSP70、HMGBl的蛋白表达增多（均P〈0．05），TLR2、TLR4的mRNA和蛋白水平增加（均P〈0．05），MyD-88及P—P65蛋白表达增多（均P〈0．05），免疫荧光染色可见P．P65核内转移。与HG组比较，HG＋MSC组炎性因子IL-6、TNF—α，TLR配体HSP70、HMGB1蛋白表达减少（均P〈0．05），TLR2、TLR4mRNA和蛋白水平减少（均P〈0．05），MyD-88、P—P65的蛋白表达减少（均P〈0．05），免疫荧光染色示p-P65核内转移不明显。结论高糖刺激可使TLR介导的足细胞固有免疫反应增强，HUC．MSCs共培养可通过抑制TLR通路减轻免疫反应。
- 王英惠吕莎莎宋燕程静刘珊珊张亚萍赵龙王学龄孙丽娜柳刚
- 关键词：足细胞干细胞间充质固有免疫
- 人脐带间充质干细胞共培养改善高糖诱导的足细胞凋亡被引量：7
- 2014年
- 目的：探讨人脐带间充质干细胞（HUC-MSCs）对高糖诱导的足细胞凋亡的影响及其机制。方法小鼠足细胞（MPC5）细胞被分为6组：（1）正常糖浓度组（NG）；（2）高糖组（HG）；（3）甘露醇组（NG＋MA）；（4）HUC-MSCs共培养组（HUC-MSCs）；（5）HUC-MSCs＋重组人肝细胞生长因子（HGF）中和抗体组（HGF-NtAb）；（6）重组人肝细胞生长因子组（rhHGF）。刺激72 h后，流式细胞术检测足细胞凋亡率；Western印迹法检测凋亡标志蛋白多聚ADP核糖聚合酶（PARP）、细胞凋亡抑制因子Bcl-2的表达；细胞免疫荧光法检测足细胞相关分子的表达及排列；Hoechst染色法检测足细胞凋亡水平；ELISA法检测HUC-MSCs分泌HGF水平。结果与NG组比较，HG组MPC5细胞凋亡标志蛋白PARP的表达增多，Bcl-2表达减少，处理72 h组组间比较差异有统计学意义（P﹤0.05）；足细胞相关分子podoplanin表达减少，足细胞凋亡率增高（P﹤0.05）。与HG组比较，HUC-MSCs组，rhHGF组PARP的表达减少、Bcl-2表达增加（P﹤0.05）， podoplanin表达正常，足细胞凋亡率减低（P﹤0.05）。与HUC-MSCs组比较，加入HGF中和抗体后PARP的表达增多，Bcl-2表达减少（P﹤0.05），podoplanin表达减少，足细胞凋亡率增高（P﹤0.05）。结论高糖刺激可诱导足细胞发生凋亡和损伤，HUC-MSCs共培养可以改善高糖诱导的足细胞凋亡和损伤，HUC-MSC可能通过分泌HGF缓解高糖诱导的足细胞凋亡和损伤。
- 齐文文吕莎莎柳刚程静宋燕明彤彤关广聚
- 关键词：足细胞肝细胞生长因子
- 肾淋巴循环障碍对大鼠肾功能和组织结构的影响
- 2007年
- 目的:观察肾淋巴循环障碍对大鼠肾脏功能及组织结构的影响。方法:雄性Wister大鼠48只,随机分为模型组和假手术对照组各24只。每组分别在术后1、2、4、8周各处死6只。测定24 h尿蛋白和血肌酐。PAS和Masson染色观察肾组织病理改变,并行半定量分析。透射电镜观察肾脏超微结构改变。结果:模型组大鼠尿蛋白显著增加,且随时间推移肾功能逐渐减退,并出现明显的组织病理改变,尤其小管损伤指数及小管间质纤维化指数明显高于对照组(分别为P<0.01和P<0.05)。电镜结果显示,肾小球内皮细胞中线粒体多出现低密度或空化,系膜插入,局部足突细胞融合。结论:肾淋巴循环障碍可致大鼠肾脏功能及小管间质损害,并随时间延长而加重,提示肾淋巴循环障碍为引起慢性肾损害的原因之一。
- 张桃艳关广聚陈兵柳刚李学刚侯香华
- 关键词：淋巴循环肾功能肾间质
- 苯那普利与氯沙坦及其联合应用对糖尿病肾病大鼠Nephrin表达的影响
- 目的探讨苯那普利、氯沙坦及联合应用对糖尿病肾病大鼠nephrin蛋白表达的影响,比较在延缓糖尿病肾病 (DN)进展方面作用的不同。方法采用一侧肾切除腹腔注射STZ(55mg／kg)建立糖尿病大鼠模型,以血糖大于 16．7...
- 陈兵张燕柳刚刘海英侯香华关广聚
- 文献传递
- ACE2基因通过调控Nrf2/HO-1通路改善肾缺血再灌注损伤
- 2023年
- 目的探讨血管紧张素转化酶2(ACE2)对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞HK-2氧化应激、炎症、凋亡及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的影响。方法将ACE2慢病毒转染HK-2细胞,按照实验需要分为常氧组(Control组)、缺氧复氧模型组(H/R组)、缺氧复氧转染阴性对照慢病毒组(H/R-NC组)和缺氧复氧转染ACE2慢病毒组(H/R-ACE2组)。细胞经H/R处理后,通过CCK-8法检测细胞活力;RT-PCR及ELISA法检测炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平;比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)表达水平;Western blotting法检测胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、Nrf2、HO-1的蛋白水平。采用Nrf2抑制剂ML385以及HO-1抑制剂SnPPIX抑制Nrf2/HO-1通路,Western blotting法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax、Nrf2、HO-1的蛋白表达水平变化,比色法检测SOD和MDA表达变化。结果与Control组相比,H/R组细胞活力降低(t=7.58,P<0.001),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均增加(t_(MDA)=11.08,P_(MDA)<0.001;t_(PCR-IL-6)=5.82,P_(PCR-IL6)<0.001;t_(PCR-TNF-α)=7.69,P_(PCR-TNF-α)<0.001;t_(PCR-IL-1β)=4.80,P_(PCR-IL-1β)=0.001;t_(ELISA-IL-6)=34.11,P_(ELISA-IL-6)<0.001;t_(ELISA-TNF-α)=14.12,P_(LISA-TNF-α)<0.001;t_(ELISA-IL-1β)=9.63,P_(ELISA-IL-1β)<0.001;t_(Caspase-3)=2.73,P_(Caspase-3)=0.026;t_(Bax)=27.75,P_(Bax)<0.001),SOD活性、Bcl-2和ACE2蛋白水平下降(t_(SOD)=7.74,P_(SOD)<0.001;t_(Bcl-2)=75.49,P_(Bcl-2)<0.001;t_(ACE2)=11.41,P_(ACE2)<0.001)。与H/R组相比,H/R-ACE2组细胞活力增加(t=3.61,P=0.002),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均下降(t_(MDA)=6.15,P_(MDA)<0.001;t_(PCR-IL-6)=3.34,PPCR-IL-6=0.006;t_(PCR-TNF-α)=3.65,P_(PCR-TNF-α)=0.007;t_(PCR-IL-1β)=4.06,P_(PCR-IL-1β)=0.004;t_(ELISA-IL-6)=14.62,P_(ELISA-
- 张嘉颖宿荣允王英惠王洪刚柳刚
- 关键词：血管紧张素转化酶2缺血再灌注损伤
