柳洪涛
- 作品数:17 被引量:1H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金:国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 一种脑炎病毒蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种与脑炎病毒疫苗相关蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白是如下1)或2)的蛋白:1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白;2)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加...
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- 文献传递
- 一种以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用
- 本发明涉及以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用,尤其涉及一种重组冠状病毒及其应用。本发明提供的蛋白,来源于含鼠肝炎冠状病毒(mouse hepatitis virus,MHV)A59株,命名为mNSP1,是如下...
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- 痘苗病毒载体基因修饰系统的建立及重组冠状病毒的应用
- 本发明涉及以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用,尤其涉及一种重组冠状病毒及其应用。本发明提供的蛋白,来源于含鼠肝炎冠状病毒(mouse hepatitis virus,MHV)A59株,命名为mNSP1,是如下...
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- 文献传递
- 痘苗病毒载体基因修饰系统的建立及重组冠状病毒的应用
- 本发明涉及以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用,尤其涉及一种重组冠状病毒及其应用。本发明提供的蛋白,来源于含鼠肝炎冠状病毒(mouse hepatitis virus,MHV)A59株,命名为mNSP1,是如下...
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- 脑炎病毒蛋白及其一种编码基因与应用
- 本发明公开了一种与脑炎病毒疫苗相关蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白是如下1)或2)的蛋白:1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白;2)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加...
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- 脑炎病毒蛋白及其一种编码基因与应用
- 本发明公开了一种与脑炎病毒疫苗相关蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白是如下1)或2)的蛋白:1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白;2)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加...
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- 一种脑炎病毒蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种与脑炎病毒疫苗相关蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白是如下1)或2)的蛋白:1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白;2)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加...
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- 脑炎病毒蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种脑炎病毒蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白是如下1)或2)的蛋白:1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白;2)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同...
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- 文献传递
- 鼠肝炎冠状病毒非结构蛋白1及其突变体的原核表达被引量:1
- 2012年
- 目的:构建鼠肝炎冠状病毒(MHV)非结构蛋白1(NSP1)及其突变体(NSP1 mu)的原核重组表达质粒,在大肠杆菌中分别融合表达重组NSP1及NSP1 mu。方法:以现有质粒载体为模板,扩增编码NSP1及NSP1 mu的基因片段,并克隆至pMD18-T克隆载体;菌落PCR鉴定阳性克隆并测序分析;将阳性克隆的目的片段亚克隆至表达载体pET-28a,并转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,PCR和双酶切鉴定转化菌落;将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并加入IPTG诱导表达,SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达。结果:PCR扩增得到表达NSP1及NSP1 mu的特异片段,并克隆到pMD18-T载体,测序结果正确无误;构建了NSP1和NSP1 mu的重组表达质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)中分别融合表达了重组NSP1及NSP1 mu,表达的目的蛋白均能与His单克隆抗体特异结合;用Ni-NTA琼脂糖试剂盒纯化重组蛋白,获得可溶性的NSP1及NSP1 mu,相对分子质量分别为27×103和28×103。结论:在大肠杆菌中分别表达并纯化获得了大量可溶性重组NSP1及NSP1 mu。
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- 关键词:突变体纯化
- 一种脑炎病毒蛋白及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种脑炎病毒蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白是如下1)或2)的蛋白:1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白;2)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同...
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