王劲
- 作品数：177 被引量：381H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 提高生物耐盐抗旱性能的抗逆功能体系AcSeDcDw及其应用
- 本发明利用合成生物学方法设计创建了一种具有提高宿主细胞抵抗高盐、干旱胁迫能力的功能体系AcSeDcDw。本发明构建了该抗逆功能模块的重组载体，通过农杆菌介导侵染转化的方法将其在模式植物拟南芥和油菜中整合重建。实验证明，所...
- 林敏王劲周正富燕永亮左开井
- 文献传递
- 用体外定向进化的方法对EPSPS合酶基因草苷膦抗性机制的研究被引量：1
- 2007年
- 为了寻找EPSP合酶中某些与草苷膦抗性相关的位点,利用体外定向进化技术,对可变盐单胞菌HT7的EPSP合酶基因,荧光假单胞菌G2的EPSP合酶基因以及按植物偏爱密码子合成G2的EPSP合酶基因,进行DNA shuffling,通过EPSP合酶缺陷型菌株E.coilER2799的功能互补筛选,获得了7个草苷膦抗性有较大变化的EPSP合酶突变体.
- 王劲徐婧金丹杜世章
- 关键词：体外定向进化EPSP合酶
- 棉花组织培养过程中外植体所需的激素浓度及配比的研究
- 2011年
- 本文研究了以下胚轴为外植体材料的棉花组织培养过程中,愈伤组织诱导、胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎(胚状体)的诱导所需要的最佳激素浓度及配比。研究结果表明:以上三个诱导过程所需要的最佳激素浓度及配比分别为IAA、KT(激动素)、2,4-D各0.1mg/l或者ZT(玉米素)0.1mg/l、0.05mg/l IAA+0.1mg/l KT或者0.1mg/l ZT、不加入任何种类的激素或者尽量加入低浓度的激素。
- 孙英坤代其林龚元亚田霞杨娟谢琳王劲
- 关键词：棉花下胚轴胚状体
- 一种含羟侧基聚酰亚胺/二氧化硅杂化薄膜的制备方法
- 一种含羟侧基聚酰亚胺/二氧化硅杂化薄膜的制备方法，其特点是将含羟侧基聚酰胺酸或聚酰亚胺1～1400重量份溶解于溶剂中，配成质量百分比浓度为5～15%的溶液，加入0～250重量份含环氧基的硅烷偶联剂，在0.1～10重量份催...
- 顾宜黄毅王劲刘习奎汤嘉陵盛兆碧
- 文献传递
- 农杆菌介导的棉花遗传转化过程中诸因素对出愈率的影响被引量：1
- 2012年
- 研究了农杆菌介导的棉花遗传转化过程中影响外植体出愈率的一些相关因素.结果表明:卡那霉素(Kan)的浓度以50 mg/L或75 mg/L为最好,农杆菌菌株EHA105的浸染能力较强,7 d苗龄的棉花无菌苗下胚轴为最佳的遗传转化外植体材料,下胚轴外植体经预培养后再经农杆菌菌液浸染更有利于胚性愈伤组织的形成,同时农杆菌菌液浸染时间以3 min为最佳.
- 孙英坤代其林龚元亚田霞谢琳杨娟王劲
- 关键词：棉花外植体农杆菌出愈率
- GAPB基因原核表达载体的构建
- 2011年
- 以拟南芥cDNA为模板,用PCR扩增出GAPB的基因全长,然后将GAPB基因片段连接到PET28a(+)载体上,构建重组质粒并转化大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和酶切鉴定筛选出阳性克隆,测序正确后,再将阳性克隆的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果表明:成功构建了原核表达载体PET28a(+)-GAPB,为后续的GAPB融合蛋白的表达以及纯化奠定了基础。
- 田霞代其林龚元亚孙英坤谢琳杨娟王劲
- 关键词：融合蛋白
- 甘蓝型油菜耐盐基因克隆及表达研究
- 利用基因工程技术培育作物新品种(抗逆和抗病等)是当前生物学研究的热点之一.拟南芥的Na<'+>/H<'+>逆向转运蛋白被证实具有将Na<'+>从细胞质转运到液泡中储藏的能力,可用于基因工程育种以培育耐盐作物.为了探索不同...
- 王劲
- 关键词：耐盐基因转化
- 水杨酸和NO联合浸种对NaCl胁迫下油菜种子萌发和幼苗生长的影响被引量：4
- 2017年
- 以甘蓝型油菜品种兴油177为材料,用200μmol/L水杨酸和不同浓度的NO(0、50、100、200、400、800、1 000μmol/L)联合浸种,考察联合浸种对100 mmol/L Na Cl胁迫下油菜种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,适当浓度的水杨酸和NO联合浸种可显著缓解盐胁迫对油菜造成的损害,促进种子的萌发及幼苗生物量的积累;显著提高幼苗叶片脯氨酸、可溶性蛋白含量,以及抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)]活性,同时降低丙二醛(MDA)含量。其中以200μmol/L SA+400μmol/L NO处理效果最佳。
- 吕旭才王金玲王劲钟雪梅马明莉杜梅何娇代其林
- 关键词：油菜NACL胁迫种子萌发抗盐性
- PRK基因原核表达质粒的构建被引量：1
- 2011年
- 以拟南芥cDNA为模板,扩增出PRK基因,构建重组质粒pET-28a(+)-PRK转化大肠杆菌DH5α。经PCR鉴定和酶切鉴定筛选出阳性克隆,将阳性克隆的质粒转化到大肠杆菌表达载体BL21中,构建PRK基因原核表达载体。测序结果表明pET-28a(+)-PRK载体构建成功。
- 龚元亚代其林田霞孙英坤谢琳杨娟王劲
- 关键词：PCR
- 耐辐射异常球菌R1 HIN蛋白基因培育耐盐植物的应用
- 本发明发现耐辐射异球菌Deinococcus radiodurans R1中的HIN蛋白基因(DR1372)具有增强原核生物及植物的抗逆能力。本发明构建了包含上述基因的重组载体，把它们分别导入原核及真核宿主细胞。实验证明...
- 王劲江世杰张维陈明陈震林敏
- 文献传递
