王新卫
- 作品数：9 被引量：87H指数：5
- 供职机构：南京农业大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省科技支撑计划项目引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 两个黄花梨防御素基因的克隆、分析及表达研究(摘要)
- 果树病害大多由真菌引起,每年由真菌引起的果树病害给果品生产造成了巨大损失。提高果树对真菌病害的抗性,最大可能地降低果园病害发生率一直是果树科研工作者追求的目标。分子生物学的快速发展,使得通过研究植物机体内在防御系统并有目...
- 王新卫刘金义崔海荣乔玉山
- 关键词：真菌防御素黄花梨原核表达
- 文献传递
- 葡萄雌能花相关基因VvMS2的克隆及表达分析被引量：5
- 2013年
- 【目的】从欧亚种葡萄‘魏可’和‘钟山红’的花中分离出VvMS2基因,为研究葡萄雌能花形成的分子机理和分子育种奠定基础【。方法】在NCBI中寻找与拟南芥雄性不育基因MS2同源性最高的葡萄序列(CBI29968),设计特异引物进行克隆测序,通过生物信息学方法分析结构特征,利用实时荧光定量RT-PCR技术研究其在‘魏可’各组织中及‘魏可’和‘钟山红’雄蕊发育不同时期中的表达特性。【结果】VvMS2基因cDNA编码区全长为1 755 bp,编码584个氨基酸,含有NAD结合域和雄性不育C-末端区域。VvMS2对应基因组DNA全长2 776 bp,含有9个外显子和8个内含子。基因编码蛋白质分子量为64.74 kD,等电点为8.84。该基因与GenBank中其它来源的MS2蛋白序列的相似性为40%—71%。VvMS2为花蕾特异表达基因,且仅在花粉发育四分体期到二核期有表达,单核期‘魏可’的表达量显著高于同时期‘钟山红’。【结论】推测该基因异常表达与‘钟山红’葡萄雌能花形成有关。
- 郑焕张计育王新卫章镇季晨飞陶建敏
- 关键词：葡萄基因克隆
- 中国梨生产、贸易与国际竞争力分析被引量：18
- 2010年
- 梨是世界重要水果,也是中国主要的出口果品之一。进入21世纪以来,世界和中国的梨生产、贸易和竞争力都有了新的变化。文章以FAO(联合国粮农组织)数据为基础,通过对数据不同角度的分析,对中国梨生产、贸易和国际竞争力进行了研究。结果表明,2000-2007年中国梨收获面积不断扩大,产量大幅度提高,在世界梨生产中所占的比重不断增加,但是梨单位收获面积产量仍低于世界平均水平;中国的梨出口量在世界梨贸易中所占比重持续增加,梨出口具有很强的国际竞争力,但竞争力的维持是以较低的出口价格为代价的。针对中国梨生产和贸易中存在的问题,文章讨论了改善中国梨生产和提高梨果国际竞争力的措施。
- 王新卫刘金义孙兴民崔海荣王燕乔玉山章镇
- 关键词：竞争力
- 苹果基因组SSR位点分析与应用被引量：28
- 2011年
- 【目的】通过对‘金冠’苹果基因组SSR位点的统计分析,为蔷薇科果树应用SSR分子标记进行高通量的遗传分析提供理论与实践基础。【方法】运用NCBI数据库中‘金冠’苹果基因组数据,分析其SSR位点分布情况,并根据SSR位点的搜索结果,设计68对引物(每条染色体设计4对),利用苹果品种对所设计引物进行应用性验证并利用梨杂交群体进行通用性检测。【结果】苹果基因组中SSR序列主要是完全重复型,17条染色体共存在163 426个SSR位点,平均每隔3.22 kb存在1个。单核苷酸至三核苷酸重复基序在染色体水平上分布较均匀,而四核苷酸至六核苷酸重复基序的分布差异较大。单核苷酸与二核苷酸重复基序所占比例最大,两者占基因组内SSR位点总数的91.67%,单核苷酸重复基序主要以A/T重复为主,二核苷酸的重复基序主要以AT/TA重复为主。在苹果品种中验证所设计的68对引物,有62对可以扩增出预期目的片段,37对存在扩增多态性。在梨杂交群体上应用所设计的68对引物,有40对具扩增目的片段,其中16对具扩增多态性。【结论】苹果基因组内SSR分布呈现一定的规律性,初步验证SSR位点在亲缘关系较近的物种间高度保守并可以通用,基于基因组数据发掘SSR位点用于后续的相关遗传研究具有可行性。
- 关玲章镇王新卫薛华柏刘艳红王三红乔玉山
- 关键词：苹果基因组SSR
- 梨果实酸/低酸性状的SSR分析被引量：13
- 2011年
- 以八月红(Pyrus communis L.‘Bayuehong’)×砀山酥梨(P.×bretshneider‘Dangshansuli’)F1代杂交分离群体(共118株)为试材,测定了成熟果实的酸含量,从表型上分析了梨果实含酸量的遗传规律。利用225对源自梨和苹果基因组的SSR引物,结合分离群体分离分析法(Bulked Segregant Analysis,BSA)和选择基因型分析(Selective geno-typing,SG)法,对酸/低酸性状进行群体分离分析,结果表明,标记KU10与果实酸/低酸性状连锁,遗传距离为12.15cM,并由此将果实酸/低酸性状的QTL初步定位到梨遗传图谱的第2连锁群上。表型分析和标记分析结果表明,梨果实酸性状对低酸性状为显性,受加性效应和环境因素的影响,同时存在一定的非加性效应。
- 刘金义崔海荣王龙王新卫杨健章镇李秀根乔玉山
- 关键词：SSRBSA
- 砂梨ACC合酶cDNA全长克隆及其反义与正义表达载体构建被引量：2
- 2008年
- 为构建干扰砂梨(Pyrus pyrifolia Nakai)ACC合酶基因表达的遗传转化载体,利用RACE技术从'早生新水'成熟果实cDNA中克隆了ACC合酶的cDNA,该cDNA全长为1939bp,命名为Pyp-ACS,GenBank登录号为EF566865。Pyp-ACS核苷酸序列含有5′末端非翻译区109bp、1488bp完整的开放阅读框和3′末端非翻译区342bp(含25bp的Ploy+(A))。Pyp-ACS编码495个氨基酸,与白梨(Pyrus×bretschneideri Rehd.)、西洋梨(Pyrus communisL.)、中国李(Prunus salicina Lindl.)、桃(Prunus persica(L.)Batsch)、梅(Prunus mume Seib.et Zucc.)、苹果(Malus×domestica Borkh.)和柿(Diospyros kaki Thunb.)有较高的同源性。该氨基酸序列具备ACC合酶7个保守区和组成该酶活性中心的12个氨基酸残基,即SLSKDMGFPGLR,进一步验证了克隆的正确性。以pYPX145载体为基础,分别将Pyp-ACS编码区序列反向和正向插入相应位点构建反义和正义表达载体,并分别命名为pPyp-ACS(-)和pPyp-ACS(+),目的基因由双35S启动子所控制。分别将这2个表达载体导入根癌农杆菌菌株(Agrobacterium tumefaciens)EHA105,为耐贮藏转基因梨的遗传转化提供载体。
- 乔玉山宋长年王新卫李志强熊爱生姚泉洪章镇
- 关键词：砂梨CDNA
- 砂梨EST-SSR引物开发及其应用被引量：16
- 2010年
- 利用GenBank和GDR数据库中的995条梨EST序列开发砂梨SSR引物,并根据开发的EST-SSR引物对砂梨西子绿×喜水F1群体的遗传变异进行分析.结果发现：（1）60个SSR位点分布于54条EST序列中,占整个EST数据库的5.4%,其中二核苷酸重复基元出现频率最高,达51.7%,其次为三核苷酸重复基元占25%.23类重复基序中AT重复基序出现的频率最高,为32.3%.（2）利用开发的25对EST-SSR引物对西子绿×喜水F1群体的遗传变异分析结果表明,其中9对引物呈现多态性,多态性引物占设计引物的36%;多态性引物扩增产物在F1群体中的等位基因数（No）平均为2,有效等位基因数（Ne）平均为1.932 4,平均杂合度观测值（Ho）和期望杂合度（He）分别为1和0.480 9.
- 崔海荣刘金义佟兆国王新卫章镇乔玉山
- 关键词：砂梨EST-SSR分子标记
- 神秘果素基因合成及其液泡积累表达载体DC-miraculin的构建被引量：4
- 2010年
- 在不依赖神秘果(Synsepalum dulcificum Daniell)植物资源的条件下,根据已报道的神秘果素基因序列合成24条寡核苷酸引物,通过重叠延伸PCR法合成了神秘果素全基因。为使神秘果素导向液泡积累,利用菜豆蛋白C末端四肽的液泡定位功能,在人工合成基因的3'末端加入了编码液泡定位短肽的核苷酸序列。将该基因序列插入植物表达载体YH4215,成功构建了神秘果素植物双元表达载体,命名为DC-miraculin。载体上的神秘果素基因由双CaMV35S启动子控制,转基因植物的报告基因为gusA,抗性筛选标记为潮霉素抗性基因hpt。
- 王新卫章镇朱月林高志红乔玉山
- 关键词：基因合成液泡
- 黄花梨及其绿皮芽变果皮发育特性和差异表达基因的克隆与功能分析
- 果皮色泽是梨果重要的农艺性状和商品外观品质之一，也是消费者在购买前先得到的感官感受之一。培育不同果皮色泽的梨果以满足消费者多元化的需求是梨育种的一个长期目标，梨的果皮色泽研究正逐渐成为梨研究的热点。研究褐皮和绿皮梨果皮发...
- 王新卫
- 关键词：黄花梨防御素分子育种
