王晓敏
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：江南大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- rhddADAM15抑制肝癌细胞Bel-7402增殖的作用研究
- 2014年
- ADAM15属于跨膜蛋白ADAM家族中的一员,在乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌等多种实体瘤中均发现其表达量提高。ADAM15在降解细胞外基质、介导细胞的黏附、细胞间信号转导及在肿瘤发展进程中起到重要作用。因其去整合素区域含有RGD序列,ADAM15可与多种整合素相互作用。在前期工作中,实验组利用大肠杆菌表达系统表达了重组人ADAM15去整合素区域蛋白,记作rhddADAM15。该研究将进一步针对rhddADAM15抑制肝癌细胞Bel-7402增殖的机理进行分析及探讨。SRB法显示,rhddADAM15可抑制Bel-7402细胞增殖并呈剂量依赖性,IC50为1.14μmol/L;利用DAPI核染发现,rhddADAM15可显著诱导Bel-7402细胞凋亡;流式细胞仪分析发现,rhddADAM15浓度为6μmol/L时,(87.44±7.25)%的细胞发生凋亡;PI单染分析细胞周期表明,rhddADAM15作用后,部分Bel-7402细胞周期被阻滞于S期及G2/M期,并呈剂量依赖性,4μmol/L rhddADAM15处理后G0/G1期含量下降约14%;Western blot分析显示,rhddADAM15可下调Bel-7402细胞周期蛋白CDC2的表达,抑制CDC2-Tyr15的去磷酸化,引起G2/M期的阻滞。
- 侯颖储敏王晓敏陈蕴金坚
- 关键词：去整合素凋亡CDC2
- 重组人ADAM15去整合素区域蛋白抑制肿瘤细胞增殖作用的研究
- 2014年
- 观察重组人ADAM15去整合素区域蛋白干预肿瘤细胞增殖效应,为研究其作用机制提供基础。采用SRB法筛选重组人ADAM15去整合素区域蛋白敏感肿瘤细胞,分析其剂量依赖关系。利用流式细胞仪分析重组人ADAM15对肿瘤细胞周期的影响,并利用DAPI染色检测其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。重组人ADAM15去整合素区域蛋白对于观察的8种肿瘤细胞的增殖均有明显的抑制作用,其中人宫颈癌细胞Hela及野生型乳腺癌细胞MCF-7最为敏感,IC50分别为2.97,2.90μmol/L,当其浓度低于8μmol/L时,细胞增殖抑制率与蛋白浓度呈剂量依赖关系。选择Hela细胞进行周期检测发现,重组人ADAM15去整合素区域蛋白浓度高于2μmol/L时,Hela细胞周期开始出现S期阻滞,G2/M期含量下降,并出现核凋亡现象。当蛋白干预浓度达6μmol/L时,(53.57±1.43)%的Hela细胞出现凋亡。重组人ADAM15去整合素区域蛋白通过阻滞细胞分裂和诱导凋亡抑制肿瘤细胞的增殖。
- 侯颖储敏杜芳芳王晓敏陈蕴金坚
- 关键词：去整合素增殖细胞周期凋亡
- 重组人ADAM15去整合素区域蛋白抑制HeLa细胞的增殖及迁移被引量：1
- 2014年
- 观察重组人ADAM15去整合素区域蛋白(记做rhdd ADAM15)干预He La细胞在体内外的增殖及迁移效应,初步鉴定了其作用的相关通路,为研究其作用机制提供基础。利用SRB法及划痕法测得rhdd ADAM15对He La体外的增殖及迁移均有明显的抑制作用,IC50分别为2.44、1.60μmol/L,当其浓度低于8μmol/L时,细胞增殖及迁移抑制率与蛋白质浓度呈剂量依赖关系;利用瞬时转染法在He La细胞内过表达rhdd ADAM15,致使He La细胞的迁移能力下降,细胞周期出现S期阻滞,阻滞率约为5%;SRB法表明,MAPK通路激动剂EGF可以逆转rhdd ADAM抑制He La细胞增殖的效应;利用斑马鱼肿瘤移植模型,观察得到rhdd ADAM15对斑马鱼体内He La细胞生长及转移均有明显的抑制作用。以上结果表明,rhdd ADAM15可抑制He La细胞体内外的增殖及迁移,这种抑制作用与MAPK信号通路密切相关,作用靶点在细胞外及细胞内均有分布。
- 侯颖储敏蔡燕飞杜芳芳王晓敏陈蕴金坚
- 关键词：去整合素迁移MAPK斑马鱼
