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王颖: 作品数：37 被引量：73H指数：5; 供职机构：广州军区广州总医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体的制备被引量：3: 2006年; 目的:用不同的方法制备Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体,探索Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗可行的应用途径。方法:采用冻融法、逆相蒸发法、钙融合法分别制备Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体,在透射电镜下观察脂质体颗粒的大小,应用紫外分光光度计检测蛋白疫苗的包封率,并用ELISA法对Hsp70-HSV-2gD抗原活性进行测定。结果:逆相蒸发法制备的Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体包封率最大,达到(53±2.0)%,所制备的脂质体粒圆形,直径大小较一致,约600 nm,具有抗原活性。结论:成功制备了Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体,逆相蒸发法为制备Hsp70-HSV-2gD融合蛋白疫苗阳离子脂质体的最好方法。; 樊建勇杨慧兰王捷关蕾王颖成桂明仕瑶慧; 关键词：单纯疱疹病毒阳离子脂质体蛋白疫苗

人源性单纯疱疹病毒Ⅱ型抗gD蛋白噬菌体单链抗体库的构建: 目的利用HSV-2病毒IgG、IgM抗体阳性的生殖器疱疹患者外周血淋巴细胞,构建人源单链抗体库.方法：取患者外周血淋巴细胞提取总RNA,逆转录成cDNA,以其为模板,分别扩增抗体重链及轻链可变区基因,将重链、轻链可变区...; 王颖杨慧兰樊建勇

pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体的制备被引量：1: 2006年; 目的制备pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体，为基因免疫和基因治疗寻找一种简单、经济、有效的DNA投递系统。方法采用逆向蒸发法，用卵磷脂、胆固醇、十八胺制备成阳离子脂质体包封pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗，在透射电镜下观察脂质体颗粒的大小，应用紫外分光光度计检测DNA疫苗的包封率，免疫组化检测其转染真核细胞的效果。结果制备的脂质体呈圆形、粒径大小较一致，平均粒径为580nm，DNA疫苗脂质体包封率达到50％～55％，能有效转染真核细胞。结论成功制备了pVAX-Hsp70-HSV2gD DNA疫苗阳离子脂质体。该方法作为提高基因免疫效果的简单、经济、有效的手段之一，为其进一步的研究打下了基础。; 樊建勇杨慧兰关蕾王颖仕瑶慧; 关键词：单纯疱疹病毒阳离子脂质体包封率 DNA疫苗

HSV-2 LATs对宿细胞miRNAs调控机制的生物信息学分析: 王颖樊建勇杨慧兰

CpG DNA诱导抗生殖器疱疹保护性免疫的应用前景: 2005年; 天然免疫是人体抵抗生殖器疱疹的第一道防线,在急性感染早期限制病毒复制并促进获得性免疫。最近发现,哺乳动物的天然免疫系统,通过TLR特异识别保守分子细菌DNA;阴道局部使用人工合成的细菌DNA(即CpG ODN),在疾病动物模型中证实能诱导强大的抗生殖器疱疹的免疫保护作用。这为临床上制定抗生殖器疱疹的新策略提供了科学依据。本文旨在概述CpG DNA诱导抗生殖器疱疹免疫的新进展和发展趋势。; 成桂明曹春来关蕾王颖杨慧兰; 关键词：生殖器疱疹天然免疫保护性免疫天然免疫系统疾病动物模型

人疱疹病毒2型LAT对Has-mir-634下调细胞周期蛋白1表达的研究: 王颖樊建勇杨慧兰

HSV-2型2.2kb潜伏相关转录子细胞生物学效应: 目的研究人单纯疱疹病毒2型(herpes simple virus type 2,HSV-2)2.2kb潜伏相关转录体(latency associated transcript,LAT)对体外培养Hela细胞的生物学...; 毕建军杨慧兰樊建勇王颖李翠华梁洁

HSV-2型2.2kb潜伏相关转录子对Hela细胞生长特性的影响: 2012年; 【目的】研究人单纯疱疹病毒2型(Herpes simple virus type 2,HSV-2)2.2 kb潜伏相关转录体(Latency associated transcript,LAT)对体外培养Hela细胞生长特性的影响。【方法】将真核表达质粒pcDNA3.1-2.2 kb LAT或pcDNA3.1转染Hela细胞后,观察细胞的生长情况。在4°C和43.5°C应激下,MTT法检测细胞活性,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡。【结果】pcDNA3.1-2.2 kb LAT质粒转导入Hela细胞后,检测到2.2 kb LAT转录;细胞培养2 d转染pcDNA3.1-2.2 kb LAT细胞明显多于转染pcDNA3.1细胞数,两者细胞数分别为1.7±0.09×105/mL和1.45±0.14×105/mL,P<0.05。4°C下pcDNA3.1-2.2 kb LAT组和pcDNA3.1组细胞凋亡率分别为27.6%±5.7%和7.8%±1.5%,P<0.01;43.5°C下pcDNA3.1-2.2 kb LAT组和pcDNA3.1组细胞凋亡率分别为30.5%±4.6%和5.3%±2.0%,P<0.01。【结论】2.2 kb LAT具有促进细胞增殖,提高细胞活力和抗凋亡作用,提示它可能在HSV-2感染中发挥重要作用。; 毕建军杨慧兰樊建勇王颖李翠华梁洁; 关键词：单纯疱疹病毒2型生殖器疱疹凋亡

腺病毒介导HSV-2 gD基因修饰的树突状细胞疫苗制备被引量：2: 2015年; 目的生殖器疱疹尚无彻底治愈的方法。研制有效的生殖器疱疹病毒疫苗是预防和治疗HSV-2感染的关键,文中探讨制备腺病毒介导的HSV-2 g D基因修饰的树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗的可行性。方法将HSV-2 g D蛋白基因克隆到质粒载体Shuttle-2,重组质粒酶切鉴定、测序鉴定后构建重组腺病毒p Adeno-HSV-2 g D。分离小鼠骨髓DC细胞,p Adeno-HSV-2 g D转染DC细胞后用流式细胞术检测DC表型,用免疫组化法、RT-PCR、SDS-PAGE和Western blot方法检测HSV-2 g D的表达情况。结果以HSV-2病毒DNA为模板,采用g D基因引物扩增出相应的目的片段。琼脂糖凝胶电泳显示,PCR产物g D基因同预期的大小一致(1182 bp)。p Adeno-g D DNA用脂质体法转染293细胞10 d,反复冻融获得p AdenoHSV-2 g D重组腺病毒,活性为4×1010IU/m L。流式细胞仪检测结果显示:成熟DC和腺病毒感染后DC,CD40含量为(74.2±3.9)%、(81.3±3.1)%,CD80含量为(73.9±4.1)%、(80.4±2.9)%,CD86含量为(76.1±5.5)%、(83.7±3.9)%,均较不成熟DC的CD40、CD80、CD86含量[(9.7±0.5)%、(7.5±1.2)%、(5.2±1.1)%]升高(P<0.01)。p Adeno-HSV-2 g D-DC和细胞因子刺激诱导成熟的DC细胞表面分子表达差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR、免疫组织化学方法证明HSV-2 g D能在DC细胞内表达,表达产物的SDS-PAGE和Western blot分析发现,在相对分子质量为43000处有外源蛋白表达,与预期蛋白条带一致。结论成功制备了p Adeno-HSV-2 g D-DC疫苗。; 樊建勇王颖杨慧兰梁洁李翠华; 关键词：单纯疱疹病毒树突状细胞

单纯疱疹病毒2gD-Hsp70融合蛋白基因的构建及表达: 构建并原核表达Hsp70-HSV2gD融合蛋白。将Hsp70和HSV-2gD蛋白基因分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,构建成重组质粒pGEX-4T-Hsp70-gD,并测序鉴定。重组质粒pGEX-4T- Hsp7...; 樊建勇杨慧兰王颖关蕾; 文献传递

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