白兰芳
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：化学工程生物学更多>>
- 雷帕霉素发酵生物活性的测定方法被引量：4
- 2000年
- 由吸水链霉菌 (Str.hygroscopicus) WY93- Z2 7中分离出具有抗真菌和免疫抑制活性的雷帕霉素 ,主要存在于菌丝内 ,少量分泌到细胞外。为适应大量菌种选育工作的需要 ,我们研究了 :(1)几种处理菌丝的方法 ,结果以 SDS裂解菌丝操作简便 ,省时 ,成本低 ;(2 )固体发酵与液体发酵法生物活性结果没有正相关关系 ;(3)一定条件下 ,液体发酵上清液效价可替代菌体效价用于初筛工作。
- 白兰芳武临专徐小敏王以光
- 关键词：雷帕霉素发酵生物活性
- 西罗莫司产生菌Streptomyces hygroscopicus WY-93的诱变育种与代谢研究被引量：15
- 2001年
- 研究了不同诱变方法对西罗莫司产生菌正变率的影响 ,发现紫外线单一因子处理、光复活较为有效 ;用这一条件处理得到一正变株 UV- 8- 6 1,其效价比出发菌株 Z2 7高 2～ 3倍 ,产生抗生素水平经连续传代证明非常稳定。本文还研究了菌落形态与发酵效价以及诱变后正变率与死亡率的关系 ,表明孢子丰富的梅花型或面包型菌株发酵效价较高。以紫外线单一因子、光复活处理死亡率在 99.90 %～ 99.95 %时正变率较高。另外 ,从代谢角度对高产株与原株对碳、氮源的利用及葡萄糖 - 6 -磷酸脱氢酶的活性进行了深入研究 ,发现两者在生长速度 ,碳、氮源的利用方面存在显著差别 ,尤其是高产株葡萄糖 - 6 -磷酸脱氢酶的活性明显高于原株。由此推断 ,高产株 UV- 8- 6 1西罗莫司产量的提高有可能是由于菌体生理代谢旺盛 ,参与戊糖一级代谢的 G- 6 -P脱氢酶活性提高 ,由此增加了作为西罗莫司生物合成环己烷前体的莽草酸的供给。
- 白兰芳徐小敏武临专王以光
- 关键词：西罗莫司生物合成诱变育种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
- 转座子Tn5096对刺孢吸水链霉菌北京变种RF220转座的诱变被引量：1
- 1999年
- 用大肠杆菌／ 链霉菌穿梭质粒ｐＣＺＡ１６８（ ｂｌａ，ｔｓｒ，Ｔｎ５０９６ ，ＣｏｌＥＩｒｅｐ ，Ｓｔｒｅｐ ｒｅｐｔｓ） 多次转化农抗１２０ 产生菌刺孢吸水链霉菌北京变种（ Ｓ．Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｐｉｎｏｃｕｓ ｖａｒ． ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ）ＲＦ２２０ 的原生质体，均未得到转化子。来自吸水链霉菌应城变种（ Ｓ．Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ ｖａｒ．）１０ － ２２ 突变株的链霉菌质粒ｐＩＪ７０２（ｔｓｒ ｍｅｌ＋ ） 可以转化ＲＦ２２０ ，但转化频率只有数十个转化子／μｇＤＮＡ。用来自ＲＦ２２０ 本身的ｐＩＪ７０２ 对消除ｐＩＪ７０２ 后的ＲＦ２２０ 的原生质体进行了再转化，转化率没有明显的提高。用氨苄青霉素和甘氨酸协同处理ＲＦ２２０ 的菌丝体，并经－ ７０ ℃冷冻原生质体再转化，得到了４ 个ｐＣＺＡ１６８ 的转化子。质粒提取、酶切、抗性测定表明：４ 个转化子中ｐＣＺＡ１６８ 中大肠杆菌ＤＮＡ 部分均被切除，成为大小约５０ ～６０ｋｂ的小质粒，命名为ｐ ＷＺＨ１０２（ｔｓｒ，Ｔｎ５０９６ ，ｓｔｒｅｐ ｒｅｐｔｓ） 。用ｐ ＷＺＨ１０２ 上的转座子Ｔｎ５０９６ 对ＲＦ２２０ 进行转座实验。
- 张应禄朱昌雄白兰芳王以光
- 关键词：吸水链霉菌转座子
