白兴文
- 作品数：137 被引量：88H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- A型口蹄疫病毒衣壳蛋白主要抗原表位区的原核表达及免疫效果分析被引量：2
- 2019年
- 为了探索更有效的A型口蹄疫(FMD)表位疫苗,根据已鉴定的A型口蹄疫病毒(FMDV)主要抗原位点,结合基因序列比对分析,选择了A型FMDV流行毒株的主要抗原位点区进行表位蛋白分子的设计表达。所用表位序列包括A/QH/CHA/2013的VP2 70~81位、118~140位,VP1 G-H环131~157位、C末端188~212位,A/WH/CHA/09 VP1 43~48位、VP3 55~72位,以及非结构蛋白3A中的T细胞表位和通用性T细胞表位,构建免疫原蛋白分子命名为ANX2和ANX3,其中ANX2采用了表位序列反向串联的方式进行设计,用大肠杆菌表达免疫原基因,纯化表位蛋白免疫小鼠和猪,分析特异性体液免疫和细胞免疫应答水平,并对免疫猪进行了攻毒保护试验,评价表位疫苗的保护效果。结果显示,ANX2、ANX3重组蛋白以包涵体表达为主,蛋白大小约为41 ku和39 ku,均能与A型FMDV阳性血清发生特异性反应;免疫小鼠和猪后都能产生抗A型FMDV特异性抗体;用表位蛋白刺激免疫小鼠脾淋巴细胞,细胞因子IFN-γ和IL-4均有明显的升高;攻毒后对猪有一定的保护作用,ANX2的免疫效果略优于ANX3,证明表位序列反向串联更有利于抗原表位的展示,从而增强其免疫效果。本研究为A型FMDV表位疫苗的研究积累了经验。
- 汪肖肖孙普贾怀杰李冬付元芳陈应理曹轶梅景志忠白兴文卢曾军刘在新
- 关键词：A型口蹄疫病毒表位疫苗体液免疫
- 一种过表达HS3ST5基因的试剂在促进病毒感染中的应用及重组CHO-K1细胞系
- 本发明提供了一种过表达HS3ST5基因的试剂在促进病毒感染中的应用及其构建的重组CHO‑K1细胞系，属于基因工程技术领域。本发明提供通过将HS3ST5片段克隆到慢病毒载体中构建出重组慢病毒质粒，再经病毒拯救包装出的慢病毒...
- 白兴文卢曾军袁红黄磊宫晓华刘在新包慧芳李平花孙普李冬马雪青陈应理曹轶梅付元芳张婧邓欣雨焦云娟王利豪杨宇轩
- 猪水泡病病毒HK′1/70株基因组全长cDNA的构建及其序列测定被引量：1
- 2007年
- 从实验感染猪水泡病病毒(SVDV)的乳鼠组织中提取RNA,利用长距离的RACE技术,扩增出覆盖SVDVHK′1/70株全基因组的2个忠实性的cDNA重叠片段(3′PCR片段和5′PCR片段),分别克隆进pGEM-T Easy载体。利用AatⅡ和BssHⅡ酶切含5′PCR片段的重组质粒,回收目的片段,定向克隆于含3′PCR片段的重组质粒,构建出了SVDV HK′1/70株全长cDNA重组质粒,然后进行序列测定。结果表明,HK′1/70株基因组全基因组序列长7 401 nt(poly A除外),其中5′NCR长743 nt,该毒株蛋白编码区的核苷酸序列为6 558 nt,编码一个长2 185个氨基酸的聚合蛋白,3′NCR长102 nt,其后是至少含有74个A碱基的poly A尾。在HK′1/70株全长cDNA序列的5′端引入了T7启动子序列,在poly A3′端引入了Psp1406Ⅰ识别序列。通过序列同源性和进化树分析,结果表明,HK′1/70属于第Ⅱ抗原遗传群,SVDV与CB5的遗传关系最近,且位于CB5遗传进化树的分支上。HK′1/70株全长cDNA的序列测定及构建,为拯救SVDV和在分子水平进一步深入研究SVDV打下坚实的基础。
- 郑海学刘湘涛尚佑军张淼涛冯霞白兴文吴锦艳吕建亮孙世琪尹双辉郭建宏谢庆阁
- 关键词：猪水泡病病毒RACE全长CDNA克隆分子克隆
- 一种新型T细胞免疫原的原核表达及对口蹄疫疫苗的免疫增强作用被引量：1
- 2011年
- 主要探讨了T细胞免疫原TI对口蹄疫疫苗的免疫增强作用。设计并原核表达产生了一种包含口蹄疫病毒VP1,VP4,3A和3D蛋白上多个T细胞表位与两个通用T细胞表位的T细胞免疫原,命名为TI;同时表达了O和Asia 1两个型口蹄疫病毒VP1蛋白的串联编码基因,表达产物命名为OA-VP1。将上述T细胞免疫原分别与OA-VP1和口蹄疫灭活疫苗按不同剂量组合免疫小鼠,于免疫后不同时间测定各组小鼠的体液与细胞免疫应答情况。采用微量中和试验检测小鼠O型和Asia1型中和抗体,采用流式细胞检测技术和测定γ-干扰素的水平来分析不同免疫组小鼠细胞免疫的水平。结果显示,与灭活疫苗或OA-VP1单独免疫组相比,添加TI抗原后灭活疫苗(P<0.01)和OA-VP1免疫组(P<0.05)小鼠均能产生高水平的特异性中和抗体;且CD4+T细胞数量显著增多I,FN-γ产生水平显著升高(P<0.01)。说明TI抗原具有很好的诱导特异性体液与细胞免疫应答的作用,是一种很好的免疫增效剂,可作为口蹄疫蛋白亚单位疫苗和灭活疫苗中的一种有效成分,以提高疫苗的免疫效果。
- 赵清孙普刘在新李平花包慧芳曹轶梅白兴文付元芳卢曾军李冬
- 关键词：口蹄疫病毒T细胞表位灭活疫苗亚单位疫苗
- 一种口蹄疫病毒致弱突变株及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种口蹄疫病毒致弱突变株及其制备方法和应用，属于生物技术和生物制品技术领域。口蹄疫病毒致弱突变株是将亲本口蹄疫病毒前导蛋白基因中的Lb AUG突变为ATC或AAA，突变病毒在BHK‑21细胞中的复制能力与亲本...
- 卢曾军刘在新李平花袁红张杰白兴文孙普包慧芳李娜
- 文献传递
- 一种通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒
- 本发明提供了通用型的口蹄疫病毒结构蛋白抗体及其阻断ELISA检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。通用型口蹄疫病毒结构蛋白阻断ELISA抗体检测试剂盒，包括以下组成：包被抗原的酶标板、浓缩生物素标记单抗；浓缩生物素标记单抗中...
- 付元芳李坤卢曾军曹轶梅刘在新王省包慧芳李平花白兴文孙普马雪青张婧李志勇李冬陈应理
- 文献传递
- 一种口蹄疫疫苗新型复合氢氧化铝佐剂以及制备疫苗方法
- 本发明公开了一种口蹄疫疫苗新型佐剂的配方以及用该佐剂的口蹄疫疫苗制备方法。用氢氧化铝佐剂加上2种免疫增强剂PolyI:C和R848，再和口蹄疫抗原混合后免疫小鼠，发现该疫苗的效力类似甚至优于现行的矿物油进口佐剂ISA20...
- 李冬刘在新周春雪卢曾军陈应理孙普谢宝霞曹轶梅付元芳包慧芳李平花白兴文
- 文献传递
- 一种全牛源O型口蹄疫病毒广谱中和抗体的制备方法
- 本发明涉及一种全牛源O型口蹄疫病毒广谱中和抗体的制备方法，属于抗体制备技术领域。本发明所述制备方法包括以下步骤：1)采用O型口蹄疫病毒，对牛进行第一、第二和第三次免疫；2)筛选O型口蹄疫病毒抗原特异性单个B细胞；3)扩增...
- 李坤卢曾军刘在新曹轶梅包慧芳陈应理王省李平花孙普白兴文李冬
- 文献传递
- 细胞内转录拯救Asia1型口蹄疫病毒被引量：3
- 2009年
- 【目的】建立口蹄疫病毒(FMDV)感染性分子克隆的体内拯救技术平台,为深入研究该病毒基因组的结构与功能奠定基础。【方法】将置于T7启动子下的FMDVAsia1/JS/China/2005株全长cDNA的真核重组质粒pFMDV-A经NotI线化后和表达T7RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,进行病毒体内拯救的研究。【结果】转染细胞盲传第3代48h后出现致细胞病变(CPE),第4代10h出现典型的CPE。RT-PCR、间接免疫荧光、电镜等均检测到了拯救的FMDV,而且存在分子标签,表明构建的FMDV全长cDNA分子克隆在BHK-21细胞内成功包装出FMDV。拯救毒与亲本毒对乳鼠的致病力(LD50)差异不显著,具有相似的生物学特征。共转染试验重复多次,均拯救到FMDV病毒。【结论】成功建立了基于质粒为基础的FMDV的体内拯救方法。
- 李平花白兴文卢曾军孙普郭建宏李冬曹伟军陈应理刘湘涛殷宏刘在新
- 关键词：口蹄疫病毒感染性分子克隆病毒拯救
- 一种O型口蹄疫分子标记疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种O型口蹄疫分子标记疫苗，标记疫苗种毒为rV-O/3Ad病毒，rV-O/3Ad的基因组序列为SEQ ID NO：2，所述rV-O/3Ad病毒含3A 91～114位氨基酸的缺失，并且含有缅甸98 VP1氨基酸...
- 刘在新卢曾军李平花白兴文付元芳孙普陈应理李冬包慧芳曹轶梅谢宝霞殷宏
