董士豪
- 作品数：1 被引量：14H指数：1
- 供职机构：河北医科大学第二医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 成熟与未成熟小鼠树突状细胞的生物免疫学特性研究被引量：14
- 2011年
- 目的 研究小鼠骨髓成熟树突状细胞（mDC）与未成熟树突状细胞（imDC）的生物免疫学特性.方法 体外诱导培养小鼠骨髓imDC,经肿瘤坏死因子-α（TNF-α）刺激获得mDC.用小鼠CD11c免疫磁珠纯化DC.电镜观察DC的细胞形态.流式细胞术（FCM）检测细胞表面分子MHCⅡ、CD80、CD86的表达.用细胞增殖检测试剂（CCK-8）检测混合淋巴细胞反应（MLR）中DC刺激同种异基因T细胞的增殖能力.实时荧光定量PCR（QPCR）检测DC上细胞因子mRNA的表达.ELISA检测DC培养上清中的细胞因子表达.结果 电镜观察：imDC比mDC细胞突起少、短.胞质内有更多吞饮泡及溶酶体.FCM检测imDC上MHC-Ⅱ（27.2％）、CD80（27.6％）、CD86（29.5％）的表达水平均显著低于mDC MHC-Ⅱ（97.7％）、CD80（97.2％）、CD86（96.4％）.MLR中相同反应比例imDC刺激T细胞的增殖能力,1∶5（1.63±0.04）,1∶10（1.50±0.08）,1∶20（1.28±0.07）,1∶40（1.19±0.04）,显著低于mDC 1∶5（2.21±0.09）,1∶10（1.92 ±0.02）,1∶20（1.64±0.01）,1∶40（1.45±0.06）,两组间差异均有统计学意义（均P＜0.01）.QPCR检测imDC上IL12p35（0.66±0.13）、IL12p40（0.57±0.10）、IFN-γ（0.74±0.08）mRNA相对表达量（mDC为对照）显著低于mDC（1.00±0.00,P＜0.05）,而TGF-β（1.35±0.09）显著高于mDC（1.00±0.00,P＜0.05）.ELISA法检测imDC分泌IL12p70（6 ±4）、IFN-γ（56±15）显著低于mDC IL12p70（120±22）、I FN-γ（90±15,P＜0.05）,而TGF-β（176±23）显著高于mDC TGF-β（55±18,P＜0.05）.结论 imDC低表达共刺激分子、MHC-Ⅱ和Th1类细胞因子,高表达TGF-β,不能活化T细胞,具有耐受原性.mDC高表达共刺激分子、MHC-Ⅱ和Th1类细胞因子,可激活初始T细胞,具有免疫原性.
- 王克玲郭力施荣富王金丽董士豪
- 关键词：骨髓树突细胞生物学特性
