蔡龙
- 作品数：82 被引量：203H指数：9
- 供职机构：杭州市红十字会医院更多>>
- 发文基金：杭州市科技发展计划项目浙江省中医药科技计划项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 温化蠲痹方诱导胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究被引量：2
- 2010年
- 目的:研究中药温化蠲痹方诱导胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜细胞凋亡作用。方法:选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组(n=10,简称正常组)、造模组,造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。造模成功后随机分为模型组(n=10)、温化蠲痹方组(n=10,简称中药组)、MTX组(n=10)。正常组、模型组、中药组按22.9g·kg-1·d-1剂量分别灌胃生理盐水、温化蠲痹方,均每日1次,MTX组按0.78mg·kg-1·w-1剂量灌胃MTX混悬液,每周1次。给药30天后,运用透射电镜和流式细胞术检测大鼠滑膜细胞凋亡。结果:与模型组比较,治疗后中药组和MTX组大鼠关节炎指数(AI)评分明显降低(P<0.01);与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠AI评分均明显降低(P<0.01)。透射电镜显示,中药组大鼠滑膜细胞凋亡较模型组大鼠滑膜细胞凋亡明显。流式细胞术检测显示,与正常组比较,模型组大鼠滑膜细胞凋亡率明显降低(P<0.05);与模型组大鼠比较,中药组和MTX组大鼠滑膜细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。结论:CIA大鼠滑膜细胞凋亡减少,诱导滑膜细胞凋亡可能是中药温化蠲痹方治疗CIA的作用机制之一。
- 刘喜德刘风云陈滢蔡龙张金禄叶丽红
- 关键词：细胞凋亡滑膜
- CIA大鼠PBMC微小RNA-146a通过Ras-MARK通路发挥对DNA甲基化调控作用研究
- 目的:研究Ras-MARK通路在胶原诱导性关节炎(Collagen-Inducing Arthritis, CIA)大鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)微小...
- 刘喜德蔡龙周红娟王珊珊叶丽红刘敏王安琪
- 重症脓毒症患者辅助性T细胞17及调节性T细胞的监测及意义被引量：5
- 2015年
- 目的观察重症脓毒症患者的Th17及Treg的表达,探讨其在重症脓毒症免疫功能中的作用。方法选择入住ICU的重症脓毒症患者30例组成重症脓毒症组及健康体检者30例组成对照组。所有重症脓毒症患者在入住ICU第1、3、5天进行采血,同时进行SOFA评分,流式细胞仪分别检测2组人群外周血Th17细胞及Treg的比率,比较2组间差异。分析重症脓毒症组患者Th17细胞及各类Treg表达率与SOFA评分的相关性。结果 1重症脓毒症组入住ICU第1天CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25+Foxp3+T细胞及Th17细胞表达率与对照组相比明显增高(P<0.05),重症脓毒症组入住ICU第3天CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25+Foxp3+T细胞及Th17细胞的表达率与对照组相比明显增高(P<0.01),重症脓毒症组入住ICU第5天CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25+Foxp3+T细胞及Th17细胞的表达率与对照组相比明显增高(P<0.01)。2重症脓毒症患者Th17细胞表达率与SOFA评分正相关(r=0.461,P=0.000);CD4+CD25+、CD4+CD25highT细胞的表达率与SOFA评分无相关性;CD4+CD25+Foxp3+T细胞的表达率与SOFA评分负相关(r=-0.375,P=0.000)。结论重症脓毒症患者Th17细胞、CD4+CD25+、CD4+CD25high及CD4+CD25+Foxp3+T细胞的表达率较正常健康人明显增高,Th17细胞及CD4+CD25+Foxp3+T细胞的表达率与脓毒症的严重程度相关。
- 李国辉马纪林石占利李志会方堃蔡龙施华萍
- 关键词：重症脓毒症辅助性T细胞17调节性T细胞
- 抗环瓜氨酸肽抗体与类风湿关节炎的相关性研究被引量：17
- 2007年
- 目的研究类风湿关节炎(RA)患者抗环瓜氨酸肽抗体(CCP抗体)与肿瘤坏死因子(TNF)-α、类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)、血小板计数(PLT)及临床的相关性,以及未分类关节炎(痛)患者6个月后随访转归情况,探讨其在RA早期诊断及发病机制中的意义。方法对9l例RA患者,46例未分类关节炎(痛)患者,45例其他风湿病患者,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清抗CCP抗体、TNF-α,速率散射免疫比浊法检测RF。结果RA组及未分类关节炎(痛)组患者外周血抗CCP抗体水平与TNF-α水平、PLT、关节肿胀度呈显著正相关(r=0.854,P=0.000;r=0.882,P=0.000;r=0.318,P=0.002;r=0.486,P=0.001;r=0.291,P=0.005;r=0.731,P=0.000),RA组及未分类关节炎(痛)组患者外周血抗CCP抗体水平分别与握力呈弱负相关(r=-0.228,P=0.030)、与ESR呈弱正相关(r=0.365,P=0.013);RA组及未分类关节炎(痛)组患者外周血抗CCP抗体水平明显高于其他风湿病组患者(P=0.000);其他风湿病组患者外周血抗CCP抗体水平高于正常组对照组(P=0.011)。46例未分类关节炎(痛)组患者有24例抗CCP抗体阳性,6个月后随访,有32例为早期RA,抗CCP抗体在早期RA的阳性率为72%(23/32),96%(23/24)的未分类关节炎(痛)组抗CCP抗体阳性患者为早期RA。结论抗CCP抗体反映了RA一定的病情活动性;可用于RA早期诊断及利于早期RA的鉴别诊断;抗CCP抗体水平升高,伴有TNF-α、ESR、PLT升高及关节肿胀时,有助于RA早期诊断。
- 刘喜德蔡龙李召东张金禄
- 关键词：关节炎类风湿肿瘤坏死因子-Α抗环瓜氨酸肽抗体
- 温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠外周血单个核细胞微小RNA-146a表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠外周血单个核细胞(PBMC)微小RNA-146a(miRNA-146a)表达的影响,探讨温化蠲痹方治疗CIA的作用机制。方法:选用健康雌性Wistar大鼠,随机分为造模组、正常对照组(10只,简称正常组),造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。再选取造模成功大鼠50只随机分为模型组(10只)、MTX组(10只)、温化蠲痹方低剂量组(n=10,简称中药1组)、温化蠲痹方中剂量组(n=10,简称中药2组)、温化蠲痹方高剂量组(n=10,简称中药3组)。中药1、2、3组分别给予温化蠲痹方22.9 g/kg·d、45.8 g/kg·d、68.7 g/kg·d灌胃,模型组灌胃生理盐水,均每天1次,MTX组按0.78 mg/kg剂量灌胃MTX混悬液,每周1次,连续30 d。采用容积法(排水体积)评价足趾肿胀度。给药结束后,提取各组大鼠外周单个核细胞,采用实时定量PCR法检测miRNA-146a表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠足趾肿胀明显,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,中药1、2、3组和MTX组大鼠足趾肿胀明显减轻,差异有统计学意义(P<0.01);与MTX组比较,中药1、2、3组大鼠足趾肿胀差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,中药1、2、3组和MTX组大鼠足趾肿胀减轻,差异有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠PBMC miRNA-146a表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,中药1、2、3组和MTX组大鼠PBMC miRNA-146a表达均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与MTX比较,中药1、2、3组大鼠PBMC miRNA-146a表达差异无统计学意义(P>0.05);中药1、2、3组比较,大鼠PBMC miRNA-146a表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CIA大鼠PBMC miRNA-146a表达升高。中药温化蠲痹方下调CIA大鼠PBMC miRNA-146a表达无剂量依赖性,其可能通过下调miRNA-146a表达,而调节免疫细胞分化、信号转导等达到治疗CIA的作用。
- 刘喜德冯莹莹蔡龙周红娟叶丽红余建明王云卿杜静杨梦霞
- 关键词：外周血单个核细胞
- 温化蠲痹方对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞微小RNA-146a、DNA甲基化转移酶表达的影响被引量：15
- 2018年
- 目的观察温化蠲痹方对活动期类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)微小RNA-146a (miRNA-146a)、DNA甲基化转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)表达影响及miRNA-146a与DNMTs表达的相关性。方法采用随机数字表法,将60例RA患者随机分为两组:中药温化蠲痹方加西药治疗组(简称治疗组,30例)及对照组(30例)。其中对照组口服甲氨蝶呤片(MTX,每周1次,每次7.5 mg),来氟米特片(LEF,每天1次,每次10 mg),美洛昔康片(每天1次,每次7.5 mg)。治疗组在对照组治疗的基础上,加用温化蠲痹方,每天1剂,分2次口服,疗程12周。观察两组临床疗效、治疗前后症状、体征,包括中医证候疗效分析、健康状况评估(HAQ评分)、疾病活动指数(DAS28)、患者疼痛评估(VAS评分)、晨僵时间等,检测血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、血小板(PLT)计数,运用实时定量PCR方法检测外周血miRNA-146a与DNMTs表达。结果治疗组总有效率[90.0%(27/30)]优于对照组[80.0%(24/30),P<0.05]。与对照组比较,治疗组ACR20、ACR50达标率(分别为43.3%、36.7%)高于对照组(33.3%、26.7%,P<0.05);治疗组DAS28、HAQ评分、VAS评分降低,关节肿胀数、关节压痛数减少、晨僵时间缩短(P<0.05,P<0.01);miRNA-146a、DNMTs、ESR、CRP、RF、抗CCP抗体、PLT计数差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);活动期RA患者PBMCs DNMTs表达水平降低(P<0.01)、miRNA-146a表达水平升高(P<0.01),miRNA-146a表达水平与DNMT1(r=-0.362,P=0.04)、DNMT3a(r=-0.566,P=0.01)、DNMT3b(r=-0.382,P=0.03)呈负相关。治疗组出现肝酶升高、胃肠道反应等不良反应明显降低(P<0.05)。结论 中药温化蠲痹方加西药治疗RA疗效优于单纯西药治疗组,其机制可能与下调活动期RA患者miRNA-146a表达、上调DNMTs表达有关。
- 刘喜德刘敏蔡龙周红娟王珊珊叶丽红杜静王安琪贺利群郑琳琳
- 关键词：类风湿关节炎
- 温化蠲痹方阻止CIA大鼠骨侵蚀作用的研究
- 刘喜德叶丽红骆荣华蔡龙付天红王芳王云卿
- 类风湿关节炎(Rheumatoidarthritis，RA)是一以滑膜异常增生，逐渐出现关节软骨和软骨下骨质破坏为特点的全身性致畸性自身免疫性疾病.治疗RA除了采用抗炎和免疫治疗以外，抑制破骨细胞的激活和分化，探索具有阻...
- 关键词：
- 关键词：类风湿关节炎自身免疫性疾病
- Th1/Th2在结核性脑膜炎发病过程中的变化及临床意义被引量：4
- 2008年
- 目的分析结核性脑膜炎患者CD4+T淋巴细胞的亚型(Th1/Th2)细胞及其Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4在血及脑脊液中的分布特点,探讨系统及局部的Th1/Th2免疫应答在人类结核性脑膜炎病理生理过程中的可能作用。方法利用流式细胞术测定结核性脑膜炎组治疗前、治疗3个月后外周血及脑脊液标本中Th1/Th2的百分含量,同时,应用流式微珠阵列(cyto-metric bead array,CBA)测定血清及脑脊液标本中IFN-γI、L-4的浓度,并测定30例健康对照组外周血中Th1/Th2细胞的百分含量与IFN-γI、L-4的浓度进行对照。结果(1)结核性脑膜炎组治疗前外周血Th1、Th2细胞水平、血清IFN-γ、IL-4的浓度(中位数)治疗前分别为3.8%±0.9%、2.03%±1.51%、29.05、55.05 ng/L;治疗3个月后分别为4.0%±0.8%、1.6%±1.1%、30.60、52.70 ng/L;健康对照组为6.3%±2.6%、1.7%±0.6%、65.95 ng/L、50.30 ng/L。同健康对照组比较,结核性脑膜炎组外周血中Th1水平、血清IFN-γ浓度显著降低(P<0.05),结核性脑膜炎组治疗前与治疗3个月后外周血中Th1、Th2水平、血清IFN-γI、L-4浓度差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)25例结核性脑膜炎组治疗前、后脑脊液标本中Th1细胞水平分别为8.4%±4.6%、7.1%±4.4%,治疗3个月后脑脊液中Th1细胞水平显著降低(P<0.05)。(3)30例结核性脑膜炎组治疗前、后脑脊液标本中IFN-γ的浓度分别为176.45 ng/L、75.50 ng/L,治疗后明显降低(P<0.05)。结论结核性脑膜炎组外周血Th1应答比健康对照组低;结核性脑膜炎组治疗后Th1应答比治疗前减弱,他们之间的因果关系尚待进一步研究。
- 蔡青山蔡龙李凫坚施华萍朱敏
- 关键词：结核TH1细胞TH2细胞
- GeneXpert MTB/RIF和TB-DNA两种荧光PCR方法检测肺外结核脓液样本的效能分析
- 2023年
- 目的:比较GeneXpert MTB/RIF(简称“Xpert”)和结核/非结核分枝杆菌PCR荧光探针法(简称“TB-DNA”)检测肺外结核脓液样本的诊断价值。方法:回顾性分析2021年1月至2023年2月在杭州市红十字会医院收治的疑似肺外结核并在病灶部位获取脓液样本的患者388例,分别对脓液样本进行Xpert、TB-DNA和BACTEC MGIT 960液体培养(简称“MGIT 960培养”)三项检测,以临床诊断为参考标准,比较两种荧光PCR方法在脓液样本中诊断肺外结核的效能。结果:以临床诊断为标准,Xpert和TB-DNA检测的敏感度、特异度和ROC曲线下面积(AUC)分别为84.15%(276/328)、100.00%(60/60)、0.92和84.45%(277/328)、100.00%(60/60)、0.92。以MGIT 960培养为参考标准,Xpert和TB-DNA检测的敏感度、特异度和AUC分别为89.90%(89/99)、35.29%(102/289)、0.63和92.93%(92/99)、35.99%(104/289)、0.65。一致性分析显示:TB-DNA和Xpert与临床诊断高度一致(Kappa值分别为0.62和0.63),MGIT 960培养与临床诊断为极低一致性(Kappa值为0.12)。在388例患者样本中,TB-DNA和Xpert同时检测出MTB阳性262例,两种方法均未检出97例,TB-DNA阳性Xpert阴性15例,TB-DNA阴性Xpert阳性14例。Xpert检测MTB阳性276例,利福平耐药12例,利福平耐药率为4.35%(12/276)。结论:初治肺外结核患者获得脓液样本后可以先使用TB-DNA进行初筛,初筛阳性样本再通过其他检测方法获得耐药信息。
- 邵燕琴朱明智戴玲珊彭利君梅宾方婷婷蔡龙
- 关键词：分子诊断技术
- 温化蠲痹方对胶原诱导性大鼠滑膜血管内皮生长因子表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨温化蠲痹方治疗CIA的作用机制。方法:选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为造模组、正常对照组(10只,简称正常组),造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。再选取造模成功大鼠30只随机分为模型组(10只)、MTX组(10只)、温化蠲痹方组(10只,简称中药组)。中药组给予温化蠲痹方22.9 g/(kg·d)灌胃,模型组灌胃生理盐水,均每天1次,MTX组按0.78mg/kg剂量灌胃MTX混悬液,每周1次,连续30天。给药结束后,运用免疫组化法检测大鼠滑膜VEGF水平。结果:与模型组比较,治疗后中药组和MTX组大鼠关节炎指数(AI)评分明显降低(P<0.01);与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠AI评分均明显降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠滑膜VEGF表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,中药组和MTX组大鼠滑膜VEGF表达水平明显降低(P<0.01),中药组和MTX组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中药温化蠲痹方可能通过下调CIA大鼠滑膜VEGF水平,抑制血管翳形成而治疗CIA。
- 刘喜德叶丽红王云卿蔡龙周红娟杜静冯莹莹杨梦霞
- 关键词：滑膜VEGF
