蔺日胜
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：内蒙古农业大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学经济管理更多>>
- β-甘露聚糖酶基因在野生酵母菌中的整合诱导型表达被引量：2
- 2007年
- 目的:实现β-甘露聚糖酶基因在野生酵母菌中的整合诱导型表达。方法:克隆猪肠道野生酵母菌JSY4的25S rDNA片段;并与YIP5经EcoRⅠ与BamHⅠ双酶切连接,构建载体YIP5-rDNA。BamHⅠ与SalⅠ双酶切YIP5-rDNA,EcoRⅠ与SalⅠ双酶切pGEM-ManⅠ得到ManⅠ基因,BglⅡ与EcoRⅠ双酶切pPIC9K得到AOX1启动子,将三个片段连接,构建高拷贝整合诱导型表达载体YIP5-rDNA-AOX1-ManⅠ。提取DNA用SalⅠ单酶切线性化与pAX15按3∶1的比例共转化JSY4,在含300μg/mlG418的YEPD平板上筛选工程菌转化子,PCR方法鉴定。用2%甲醇诱导共转化工程菌以实现表达。结果:成功表达出β-甘露聚糖酶,其比活力为0.90IU/ml。而且传代10次后仍能检测到ManⅠ基因的表达产物β-甘露聚糖酶。结论:实现了β-甘露聚糖酶基因随共转化工程菌染色体稳定遗传及表达的目的。
- 蔺日胜王和平周平武翠包晓兰赵丽霞
- 关键词：酵母菌Β-甘露聚糖酶
- 如何实现绒山羊养殖业的可持续发展被引量：1
- 2006年
- 中国是世界第一山羊绒生产大国,随着国际上对山羊绒原材料需求的日趋增多,使我国的绒山羊养殖业得到了发展。本文根据绒山羊养殖中所造成的草原生态破坏这一问题,从绒山羊生物学特性和中国绒山羊资源独特性方面论述了我国生态环境的可持续发展与绒山羊养殖的策略。
- 武翠乔灵春香蔺日胜
- 关键词：绒山羊生态环境可持续发展舍饲
- β-甘露聚糖酶基因整合诱导型表达载体的构建及在野生酵母菌中的表达
- 从猪肠道内分离到定植野生型酵母菌4株，分别命名为JSY1、JSY2、JSY3、JSY4。进行G418敏感性研究，发现JSY4作为载体共转化菌株最方便筛选。克隆猪肠道野生型酵母菌JSY4的25SrDNA片段，与YIP5经E...
- 蔺日胜
- 关键词：酵母菌基因表达Β-甘露聚糖酶
- 文献传递
- 蜗牛肝脏β-甘露聚糖酶的分离提取及纯化鉴定被引量：3
- 2008年
- 从蜗牛肝脏组织制备粗酶液后,经硫酸铵分级分离和两次聚丙烯酰胺凝胶制备电泳,纯化到了蜗牛肝脏β-甘露聚糖酶。该酶经SDS-PAGE电泳分析显示为单一条带,其表观相对分子量为37KD。本法纯化的蜗牛肝脏β-甘露聚糖酶,比活力达到992.3U/mg,提纯倍数达8.45倍,回收率为25.12%。
- 赵娜王和平蔺日胜任旭荣杨逸隆
- 关键词：蜗牛Β-甘露聚糖酶制备电泳
- β-甘露聚糖酶基因重组整合组成型表达载体的构建被引量：1
- 2007年
- 应用PCR方法从P.pastorisGS115染色体中扩增了GAP启动子(PGAP),大小为500bp左右,以其取代诱导型表达载体pPIC9K上的AOX1启动子(PAOX1),构建了组成型表达载体pGAP;再从野生型酵母菌JSY4染色体中扩增出25S rDNA保守序列,大小为1 700bp左右,以其取代组成型表达pGAP上的组氨酸脱氢酶基因(H IS4)片断,构建了整合组成型表达载体pGAP-rDNA。再双酶切重组质粒pT002M anⅠ得编码β-甘露聚糖酶的ManⅠ基因片断插入pGAP-rDNA的多克隆位点(MCS),获得含有目的基因ManⅠ的重组整合组成型表达载体pGAP-rDNA-ManⅠ。CaC l2法转化感受态大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行质粒PCR鉴定和单、双酶切鉴定。结果表明:成功构建了重组组成型表达载体pGAP-rDNA-ManⅠ,为下一步野生型酵母菌JSY4中β-甘露聚糖酶的组成型表达打下基础。
- 包晓兰王和平包力高周平蔺日胜赵丽霞
- 关键词：Β-甘露聚糖酶组成型表达GAP启动子
