邓玮
- 作品数：18 被引量：58H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金重庆市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰P115基因对胃癌细胞巨噬细胞移动抑制因子表达的抑制作用被引量：15
- 2011年
- 目的构建高尔基体转运蛋白P115基因shRNA表达载体,探讨P115基因沉默对胃癌细胞株BGC-823中巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)表达的影响。方法设计4对针对P115基因的shRNA序列,构建重组表达质粒,转染高表达P115的胃癌细胞株BGC-823。RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学检测P115及MIF的mRNA和蛋白的表达。结果 4个P115基因shRNA质粒经单酶切和测序证实构建正确;转染BGC-823细胞后,均能抑制P115基因的表达,其中以pGPU6/GFP/Neo-shP115-2的沉默效果最好,其对P115基因mRNA表达的抑制率为75.07%,对P115蛋白表达的抑制率为70.97%;转染pGPU6/GFP/Neo-shP115-2后,MIF基因的mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论 P115基因沉默后,BGC-823细胞MIF的表达明显降低,提示P115可能参与调节胃癌细胞MIF的表达,P115基因可作为研究胃癌发生发展分子机理的新靶点。
- 邓玮易永芬文雪闫田静屈玉玲
- 关键词：胃肿瘤巨噬细胞移动抑制因子RNA干扰
- u-PA系统的调节机制与胃癌的侵袭和转移
- 2006年
- 尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)的过度表达与肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。胃癌是最常见的消化道肿瘤,而u-PA在胃癌中高表达,研究u-PA及其作用,系统的产生调节机制及生物学功能将有助于了解胃癌的浸润转移以及u-PA系统在胃癌临床治疗方面的意义。
- 邓玮易永芬
- 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活物胃癌血管内皮生长因子
- shRNA沉默P115基因对胃癌细胞增殖相关蛋白表达的影响及机制
- 2013年
- 目的探讨高尔基体囊泡转运蛋白(colgi-vesicular transport protein,P115)基因沉默对胃癌细胞株BGC-823中增殖相关因子细胞周期素D1(cyclinD1)、微小染色体维持缺陷蛋白2(mini chromosome maintenance protein 2,Mcm2)和增殖细胞核抗原(proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)表达的影响及其可能的机制。方法采用脂质体介导法将重组表达质粒P115-shRNA2(P115-shRNA2组)和阴性对照质粒shNC(阴性对照组)转染至高表达P115的胃癌细胞株BGC-823中,并设未转染组,经G418筛选出稳定转染细胞,实时定量PCR(Real-time PCR)法检测细胞中P115、巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)、cyclinD1、Mcm2和PCNA基因mRNA的转录水平;Western blot法检测细胞中P115、MIF、pERK1/2、cyclinD1、Mcm2和PCNA蛋白表达水平;免疫共沉淀法检测BGC-823细胞中P115与MIF间的相互作用;ELISA法检测细胞上清液中MIF的分泌水平。结果与未转染组和阴性对照组相比,P115-shRNA2组细胞中P115、MIF、cyclinD1、Mcm2和PCNA的mRNA和蛋白表达水平均明显降低,ERK1/2的磷酸化水平明显下调,BGC-823细胞培养上清中MIF的含量明显降低;P115蛋白可在抗MIF的免疫沉淀物中检出,P115和MIF在BGC-823细胞中存在特异性的相互作用。结论 P115基因沉默下调胃癌细胞中cyclinD1、Mcm2和PCNA的表达,其分子机制可能与P115通过调控MIF的表达和分泌,进而启动下游的ERK1/2信号通路有关。P115可作为研究胃癌细胞增殖分子机制的新靶点。
- 邓玮易永芬屈玉玲闫田静文雪
- 关键词：短发夹RNA胃癌细胞周期素D1细胞增殖
- 高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ和E-钙黏素在正常肝组织及肝癌组织中的表达及其意义被引量：2
- 2011年
- 目的探讨高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(GMⅡ)和E-钙黏素(E-cadherin)在正常肝组织及不同分化的肝癌组织中的表达及其意义。方法采用RT-PCR法检测GMⅡ和E-cadherin mRNA在正常肝组织、高分化及中低分化肝癌组织中的表达;免疫组化SP法及Western blot法检测GMⅡ和E-cadherin蛋白在3种肝组织中的表达,并对GMⅡ和E-cadherin的差异表达进行相关性分析。结果 RT-PCR及Western blot分析显示,GMⅡmRNA和蛋白在正常肝组织中表达水平最低,在中低分化肝癌组织中表达水平最高,在高分化肝癌组织中表达居中,E-cadherin的表达则相反,各组间表达差异均有统计学意义(P<0.05);免疫组化SP法检测显示,GMⅡ主要表达于正常肝组织及肝癌组织的胞浆,在正常肝组织、高分化及中低分化肝癌组织的表达阳性率分别为40%、64%和86%,E-cadherin在正常肝组织的胞膜、胞浆中均有表达,而在肝癌组织中则主要表达于胞浆,其表达阳性率分别为70%、33%和9%,各组间表达差异均有统计学意义(P<0.05);GMⅡ和E-cadherin表达的Pearson相关系数r值为-0.415,P值为0.01。结论 GMⅡ和E-cadherin在肝癌组织中的表达呈负相关,GMⅡ对肝癌的发生发展可能发挥一定的作用。
- 闫田静易永芬邓玮文雪屈玉玲
- 关键词：E-钙黏素肝肿瘤
- 咪达普利和安体舒通对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的干预研究
- 目的 探讨慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化进程中神经激素-细胞因子(AngⅡ、ALD、TNF-α和UCP-2)的变化及ACEI和SPI干预心肌纤维化的作用机制.方法 制作腹主动脉缩窄大鼠心肌纤维化模型,随机分为①模型判断组,②...
- 邓玮
- 关键词：慢性心力衰竭心肌纤维化咪达普利安体舒通醛固酮
- 文献传递
- 胃癌组织Maspin,uPA,MMP-7表达的意义被引量：20
- 2006年
- 目的:观察胃癌及正常胃黏膜Maspin,uPA, MMP-7表达的意义．方法:应用免疫组化SP法检测胃管状腺癌30 例,胃印戒细胞癌30例,正常胃黏膜组织20例中Maspin,uPA,MMP-7的表达情况．结果:在胃管状腺癌中Maspin,uPA,MMP-7 阳性表达率分别为50％,70％和80％;胃印戒细胞癌中阳性表达率分别为46．7％,76．7％和 90％;正常胃黏膜组织中阳性表达率分别为 90％,35％和30％．Maspin的表达与浸润深度、淋巴结转移相关,而与肿块的大小和TNM分期无关．uPA和MMP-7的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关,而与肿块的大小无关．Maspin的表达与uPA和MMP-7的表达呈负相关(P=0．012,r=-0．322;P=0．008,r= -0．341);uPA的表达与MMP-7的表达呈正相关 (P=0．034,r=0．274)．结论:Maspin在胃癌中表达下调,uPA和 MMP-7在胃癌中过表达,他们在胃癌的浸润转移中起重要作用,可作为反应胃癌病理生物学行为的有效指标．
- 邓玮易永芬刘丹丹
- 关键词：胃癌MASPIN尿激酶型纤溶酶原激活物基质金属蛋白酶-7
- BMSC在微泡及BiAb辅助下修复心肌纤维化的实验研究及PⅢNP对冠心病合并代谢综合征患者的预测价值
- 病理性心肌纤维化是心血管疾病中的一个重要研究课题。近年来,干细胞移植在缺血性心脏病的治疗领域显示出独特的魅力。尽管在药物干预、介入治疗和外科手术方面取得了可喜的进展,使心肌纤维化的症状改善,闭塞的血管再通,但是心肌细胞缺...
- 邓玮
- 关键词：心肌纤维化双特异性抗体
- 文献传递
- 胃癌组织和细胞中P115、MIF的表达及意义被引量：10
- 2011年
- 目的观察胃癌组织和细胞中高尔基体转运蛋白P115和MIF的表达情况,探讨其在胃癌发生、发展中的意义。方法用S-P、Western blot和RT-PCR法检测P115及MIF在正常胃黏膜和胃癌组织,3种细胞株(正常胃黏膜上皮GES-1,不同分化程度的胃癌细胞株MKN-28,BGC-823)中的蛋白和mRNA表达情况。结果 P115和MIF在胃癌组织中的阳性表达率分别为73.3%、80%,在正常胃黏膜中的阳性表达率分别为40%、46.7%,胃癌组织中P115和MIF的表达明显高于正常胃黏膜(P<0.01),且P115的表达和MIF的表达呈正相关(r=0.433,P=0.017);胃癌组织中P115、MIF的蛋白和mRNA表达水平明显高于正常胃黏膜组织(P<0.01)。免疫细胞化学,Western blot和RT-PCR结果显示:P115、MIF在胃癌细胞株MKN-28、BGC-823中的蛋白及mRNA表达水平明显高于正常胃黏膜上皮GES-1(P<0.01);且低分化胃癌细胞株BGC-823中P115和MIF的表达水平明显高于高分化胃癌细胞株MKN-28(P<0.05)。结论 P115和MIF的过表达,可能在胃癌的发生过程中起协同作用;对P115和MIF相互作用机制的深入探讨有可能使其成为研究胃癌发生、发展的分子机制的新靶点。
- 邓玮易永芬闫田静文雪屈玉玲
- 关键词：胃黏膜胃癌MIF
- p115基因沉默对人胃癌BGC-823细胞迁移及侵袭能力的影响及其机制被引量：1
- 2012年
- 目的探讨高尔基体囊泡转运蛋白(Golgi-vesicular transport protein)p115基因沉默对人胃癌BGC-823细胞侵袭能力的影响及其机制。方法采用脂质体法将质粒pGPU6/GFP/Neo/p115(p115 shRNA)和阴性对照质粒(shNC)分别转染至BGC-823细胞中,并设空白对照组。转染后48 h,采用RT-PCR、Westernblot和细胞免疫荧光法检测各组细胞中p115基因及蛋白表达的变化,及其对巨噬细胞游走抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)、基质金属蛋白酶-2(Matrix metallopro-teinase-2,MMP-2)、MMP-9基因和蛋白表达的调节;细胞划痕及Transwell小室试验检测细胞迁移及侵袭能力的变化。结果p115 shRNA组细胞中p115、MIF、MMP-2、MMP-9在基因和蛋白水平的表达均较shNC组和空白对照组明显下降(P<0.01);p115shRNA组细胞的划痕愈合能力明显低于两个对照组(P<0.01);p115 shRNA组的穿膜细胞数明显低于两个对照组(P<0.01)。结论在BGC-823细胞中,抑制P115的表达后,可能通过下调MIF、MMP-2、MMP-9的表达,抑制肿瘤细胞的侵袭运动。
- 闫田静易永芬邓玮文雪屈玉玲
- 关键词：RNA干扰巨噬细胞游走抑制因子基质金属蛋白酶2基质金属蛋白酶9胃癌
- maspin、p27、skp2在大肠肿瘤的表达及意义被引量：7
- 2006年
- 目的:探讨大肠癌maspin、p27、skp2的表达, 并探讨其与大肠癌发生、发展的关系．方法:应用免疫组化SP法检测30例结肠管状腺癌、20例结肠腺瘤、20例正常大肠黏膜组织中maspin、p27、skp2的表达情况．结果:30例管状腺癌中maspin、p27、 skp2阳性表达率分别为83．3％(25/30)、 50％(15/30)、36．7％(11/30);20例结肠腺瘤中maspin、p27、skp2的阳性表达率分别为 95％(19/20)、80％(16/20)、10％(2/20),20例正常切缘中maspin、p27、skp2的表达率分别为 95％(19/20)、90％(18/20)、5％(1/20)．maspin 表达与淋巴结转移(P=0．04)和Duke's分期相关(P=0．014);p27、skp2表达与分化程度相关(P=0．014,P=0．001),而与淋巴结转移、 Duke's分期、肿瘤浸润深度无关．maspin表达与p27表达正相关(r=0．447,P<0.05),与skp2 表达无相关性;p27表达与skp2表达无相关性．结论:maspin、p27在大肠癌中表达降低,skp2 在大肠癌中过表达,可作为反映大肠癌分化程度的指标之一．maspin可能在大肠癌的发生、发展(尤其是淋巴结转移)中起作用,有望成为诊断大肠癌及其发生淋巴结转移的分子生物学标记物之一．
- 刘丹丹易永芬邓玮
- 关键词：结直肠肿瘤MASPINP27SKP2免疫组织
