钟怡
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院病原生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LA0202为钩端螺旋体中一孔形成溶血素蛋白(英文)
- 2009年
- 目的研究LA0202为孔形成溶血素。方法体外克隆表达LA0202蛋白。纯化的LA0202蛋白作用绵羊血细胞观察LA0202的溶血活性并用渗透压保护剂PEG6000添加到作用体系研究渗透压保护剂对LA0202溶血活性的影响。透射电镜及扫描电镜观察LA0202作用于体外培养的肝细胞后对细胞的毒性。结果渗透压保护剂PEG6000能够抑制LA0202的溶血活性。LA0202作用于肝细胞后引起肝细胞的毒性损伤。结论LA0202为一孔形成溶血素。
- 杨杨秦金红钟怡何平胡宝瑜郭晓奎
- 关键词：溶血素钩端螺旋体PEG6000溶血活性扫描电镜观察细胞观察
- 问号钩端螺旋体赖株基因组中一个新溶血基因的表达及功能鉴定被引量：3
- 2007年
- 目的对问号钩端螺旋体赖株基因组中LA0202基因进行克隆表达并对重组蛋白的溶血活性进行初步鉴定。方法以问号钩端螺旋体赖株基因组DNA为模板,PCR扩增LA0202基因并重组到原核表达载体pET28b(+),重组质粒经限制性核酸内切酶酶切并经测序鉴定后,在大肠埃希菌BL21中诱导表达重组蛋白。制备绵羊血平板对表达的重组蛋白进行溶血活性鉴定。RT-PCR检测钩端螺旋体赖株体外培养时LA0202基因的转录。结果在大肠埃希菌中成功表达LA0202基因,表达的重组蛋白具有溶血活性。RT-PCR结果显示钩端螺旋体赖株体外培养时LA0202基因发生了转录。结论问号钩端螺旋体赖株体外培养时LA0202基因发生了转录,LA0202可能为一个新的溶血素基因。
- 杨杨秦金红杨宏亮钟怡何平胡宝瑜郭晓奎
- 关键词：问号钩端螺旋体溶血活性溶血素基因蛋白表达
- 问号钩端螺旋体赖株溶血素基因LA0202的溶血机制
- 2009年
- 目的对问号钩端螺旋体赖株溶血素基因LA0202的溶血机制进行研究。方法纯化重组蛋白LA0202并制备多克隆抗体;Western blot验证重组蛋白在问号钩端螺旋体培养过程中的表达;并进行重组蛋白LA0202溶血活性影响因素实验。结果Western blot显示LA0202在钩体培养过程中可以表达,加入二价金属阳离子对重组蛋白溶血活性亦无明显激活作用,加入蛋白酶抑制剂对溶血活性无明显抑制作用,高温条件致使溶血活性丧失,加入渗透压保护剂PEG6000能抑制溶血活性。结论问号钩端螺旋体赖株溶血素基因LA0202为在钩体生长过程中表达的一成孔蛋白类溶血素。
- 杨杨钟怡何平胡宝瑜郭晓奎秦金红
- 关键词：问号钩端螺旋体蛋白表达
- 逆向疫苗学及其应用
- 2006年
- 钟怡何平杨宏亮郭晓奎
- 关键词：亚单位疫苗重组蛋白疫苗减毒活疫苗实验室环境牛痘疫苗病毒疫苗
- 双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性。方法对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b(+),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功能鉴定。同时,以RT-PCR检测LEBIa2503的转录情况。另外,也对双曲钩体菌体本身有无溶血活性进行检测。结果双曲钩体LEBIa2503基因与问号钩体tlyA溶血素基因在蛋白水平上有相同的结构域,属于直系同源基因(orthologues gene)。原核表达的重组融合蛋白在羊血平板上出现β-溶血环。以RT-PCR的方法能检测到在双曲钩体中有LEBIa2503基因的转录,但双曲钩体菌体本身则检测不到溶血活性。结论未发现双曲钩体有溶血活性,但其含有溶血素基因tlyA,并且在普通培养环境下能被转录,这对进一步研究其内在机制奠定了基础,并对探索致病性问号钩体致病机制提供了一定线索。
- 钟怡董珂杨杨冯春燕Picardeau M郭晓奎
- 关键词：溶血素原核表达
- 问号钩端螺旋体赖型IPAV株全基因组测序
- 第一部分 问号钩端螺旋体赖型IPAV 株全基因组测序
钩端螺旋体(Leptospira，简称钩体)是具有独特形态结构、特殊进化地位的一类革兰阴性菌。致病性钩体可引起钩体病，具有重要的医学意义。
200...
- 钟怡
- 关键词：钩端螺旋体DNA序列PYROSEQUENCING溶血素
- 文献传递
