陈浩明
- 作品数：6 被引量：105H指数：5
- 供职机构：清华大学医学院生物医学工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- VK_3诱导悬浮培养的胡萝卜细胞凋亡被引量：2
- 1999年
- VK_3是一种醌类物质,在体内通过氧化还原产生超氧化自由基。我们的实验发现,VK_3对悬浮培养的胡萝卜细胞及原生质体有致死作用。这种作用是浓度依赖性的。100—800μmol/L的VK_3能引起10%—33%的细胞死亡。当VK_3浓度达到1mmol/L时,死亡率达到100%。DNA电泳分析发现,600和800μmol/L的VK_3处理过的细胞和原生质体产生大小为180bp整数倍的梯状条带。而在更高或更低浓度的处理中则没有观察到这种条带。用TUNEL方法检测,在400—800μmol/L浓度的处理中观察到细胞核DNA的断裂。而在更高或更低浓度的处理中则没有观察到这种断裂。由此我们推测,适当浓度的VK_3能诱导胡萝卜细胞及原生质体凋亡。
- 颜长辉陈浩明戴尧仁
- 关键词：细胞凋亡胡萝卜维生素K3细胞悬浮培养
- 用TUNEL法检测植物原生质体的凋亡被引量：18
- 2000年
- TUNEL是近年来发展的一种对凋亡细胞进行原位检测的方法 ,可以特异性地标记完整的凋亡细胞核或凋亡小体的染色体 3’_OH断裂末端 ,但在植物细胞中的应用还不多。本文报道应用TUNEL法检测胡萝卜原生质体的凋亡 ,并与DNA电泳、彗星电泳等方法进行了比较 ,结果表明它是一种适用于植物原生质体凋亡检测的灵敏度较高的方法。
- 周军颜长辉陈浩明戴尧仁
- 关键词：TUNEL胡萝卜原生质体
- 彗星电泳法在植物原生质体凋亡检测中的应用被引量：26
- 1998年
- 应用中性法彗星电泳检测烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＬ．）原生质体的凋亡。结果表明，彗星发生的百分率（彗星率）和发生核质固缩及“核着边”（凋亡形态学标志）的细胞的百分率之间存在明确的相关性。利用标准的细胞凋亡检测手段，包括ＤＮＡｌａｄｄｅｒｉｎｇ及核糖核酸末端转移酶介导的ｂｉｏｔｉｎｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ），都证明这种彗星电泳法可以用来比较精确地检测植物原生质体的凋亡。
- 姜晓芳朱海珍周军陈浩明戴尧仁
- 关键词：细胞凋亡DNA断裂烟草原生质体
- 热激诱导烟草悬浮细胞的凋亡被引量：43
- 1999年
- 烟草细胞经 48℃处理 4h再正常培养可出现典型的细胞凋亡的变化 .DNA梯状条带检测结果显示 ,48℃处理 4h的样品 ,其基因组DNA被降解形成明显的DNA梯状条带 ,表明热激诱发了DNA的核小体间的断裂 ,从而表现出典型的凋亡细胞的生化特征 ,而同样温度处理 2和 9h的样品虽然仍可观察到DNA梯状条带 ,但远不如处理 4h的清晰 .对处理 4h的样品进行核DNA断裂的原位检测 ,多数细胞显示极强的TUNEL阳性 ,表明其细胞核内有很严重的DNA断裂 .利用DAPI荧光染色也观察到细胞质收缩、染色质凝聚和细胞核解体等凋亡细胞的形态学变化 .
- 陈浩明颜长辉姜晓芳夏慧莉朱海珍吴逸戴尧仁
- 关键词：细胞凋亡烟草细胞悬浮细胞热激
- 羟自由基诱导烟草细胞凋亡被引量：43
- 1999年
- 用适当浓度组合的硫酸亚铁和过氧化氢反应以产生羟自由基来处理烟草悬浮细胞，首次观察到了细胞中染色质凝缩、边缘化、细胞核解体等典型的细胞凋亡的形态学特征；在ＤＮＡ 琼脂糖凝胶电泳图谱上观察到因核ＤＮＡ 有规则地在核小体间被降解而产生的阶梯状条带；末端脱氧核糖核酸转移酶介导的３’ＯＨ 末端标记法（ｔｅｒｍｉｎａｌ ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌ ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ （ＴｄＴ）ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄＵＴＰ ｎｉｃｋｅｎｄｌａｂｅｌｉｎｇ，ＴＵＮＥＬ） 检测结果为阳性。这些实验表明，羟自由基确能诱导烟草细胞凋亡。
- 夏慧莉陈浩明吴逸戴尧仁
- 关键词：羟自由基细胞凋亡烟草DNA
- 植物非细胞凋亡体系的构建被引量：7
- 1999年
- 为了研究植物细胞的凋亡机制 ,利用热激诱导凋亡的烟草细胞中的胞质溶胶 ,构建了植物非细胞凋亡体系 .温育在此体系中的正常烟草细胞核 ,出现染色质固缩、形成凋亡小体等典型的细胞凋亡的形态学特征 ,DNA电泳分析观察到核小体间DNA断裂所形成的梯状条带 ,将细胞核进行彗星电泳观测到彗星状的核DNA片段的迁移 .抑制剂研究发现 ,pepstatinA ,leu peptin及EDTA均不能抑制上述形态学变化及生化变化 ,而iodoacetamide却能起到部分抑制作用 ,这与在动物细胞凋亡过程中发挥作用的Caspases的抑制模式十分吻合 。
- 周军陈浩明朱海珍戴尧仁
- 关键词：细胞凋亡非细胞体系蛋白酶植物细胞
