韩文君
- 作品数：6 被引量：45H指数：3
- 供职机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- WSSV-Vp281基因克隆及在毕赤酵母中的表达
- 本研究根据Gene Bank WSSV-Vp281基因序列设计一对引物,在5’引物和3’引物中分别引入EcoRI和XbaI酶切位点。经PCR扩增,将Vp281克隆至穿梭载体pGAPZα-A之GAP启动子下游位点,构建成含...
- 刘庆慧韩文君黄倢
- 关键词：基因克隆毕赤酵母分泌表达
- WSSV-VAP1基因克隆与序列分析被引量：5
- 2005年
- 根据已测序的WSSV VAP1全基因序列设计1对引物,经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析,扩增出约838bp的特异条带,将其回收后克隆入pGAPZαA载体中,并进行序列测定与分析。结果表明,扩增序列与GeneBank登录序列(GenBankNo AF411634)核苷酸同源性100%。序列分析表明,WSSV VAP1基因编码蛋白无跨膜区域,有多个蛋白激酶C、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和糖基化位点,并含有RGD序列,预示其为WSSV浸染中的一个重要蛋白。
- 刘庆慧黄倢韩文君王清印
- 关键词：基因克隆中国明对虾
- WSSV3个编码蛋白的基因密码子偏爱性分析被引量：20
- 2005年
- 运用EMBOSS(TheEuropeanMolecularBiologyOpenSoftwareSuite)的CHIPS(Condon HeterozygosityinaProteinCodingSequence)和CUSP(Createacondonusagetable)程序对WSSV3个编码蛋白的基因密码子偏爱性分析,分析结果与大肠杆菌、酵母及人的密码子偏爱性进行比较。结果显示,WSSV vp37、WSSV vp39及WSSV vp19的Nc(Effectivenumberofcondons)值为49.897、48.640、46.868。3种蛋白的编码密码子使用频率有较大的差异,其在大肠杆菌、酵母及人的密码子偏爱性也有不同,分析结果表明,WSSV vp37和WSSV vp39的密码子与原核生物及人的相差较大,其表达系统选择在酵母较为合适,而WSSV vp19的密码子与原核和真核生物酵母相差较大。
- 刘庆慧黄倢韩文君
- 关键词：WSSV密码子
- WSSV-VP39基因克隆与结构分析被引量：2
- 2007年
- 根据已公布的WSSV-VP39全基因序列(GenBank No.AAL89161)设计1对引物,经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析,扩增出约898bp的特异条带,将其回收后克隆入pGAPZα-A载体中,并进行序列测定与分析。结果表明,扩增序列与Gene Bank登录序列(GenBank No.AAl89161)核苷酸同源性100%。序列分析表明,WSSV-VP39基因编码蛋白无跨膜区域,有多个蛋白激酶C、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和酪氨酸硫酸化位点,1个糖基化位点。蛋白序列比对结果表明,WSSV-VP39与WSSV-VP37具有较高的同源性,其在WSSV侵染中的作用值得关注。
- 刘庆慧韩文君杨冰黄倢
- 关键词：基因克隆
- WSSV-VAP1基因克隆及在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2005年
- 根据 WSSV-黏附蛋白(VAP1)基因序列设计了一对引物,在5'引物和3'引物中分别引入EcoRI和XbaI酶切位点.经PCR扩增,将VAP1基因克隆至穿梭载体pGAPZαA之GAP启动子下游位点,构建成含α-factor信号肽的重组表达载体,获得的重组质粒pGAPZαA-VAP1经线性化后转入毕赤氏酵母SMD1168菌株,构建成分泌型表达VAP1的酵母工程菌株.SDS-PAGE和Western-blot及结合活性检测分析表明,VAP1基因在该体系中得到成功表达,表达产物与对虾细胞膜具明显的结合活性.
- 刘庆慧韩文君黄倢王清印
- 关键词：基因克隆毕赤酵母WESTERN-BLOT毕赤氏酵母分泌型表达穿梭载体
- 养殖大菱鲆烂鳍病病原菌的鉴定及系统发育学研究被引量：19
- 2004年
- 从山东半岛3个养殖场各分离到一株大菱鲆烂鳍病的病原菌,均为革兰氏阴性,短杆状,极生鞭毛,有运动能力,菌落半透明。经常规生理生化特征测试和16SrRNA基因序列对比,表明它们都是同一种细菌。理化特征的结果显示这3株菌均与V.anguillarum的表性特征非常相似。对其16SrRNA基因序列进行分析,并构建了系统发育树,结果表明这些菌株与V.anguillarum亲缘关系最近。综合上述研究结果,将该菌鉴定为V.anguillarum。
- 张正王印庚韩文君李秋芬
- 关键词：大菱鲆RRNA系统发育树VIBRIOANGUILLARUM
