颜廷东
- 作品数：13 被引量：9H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津分子核医学重点实验室更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金中国医学科学院放射医学研究所基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学核科学技术更多>>
- 肿瘤放射受体显像剂—人tumstatin的克隆表达及其鉴定
- 目的人肿瘤抑素(tumstatin)可以抑制肿瘤新生血管的生成,通过用Tc 标记 tumstatin,进行肿瘤的放射受体显像,具有重要和潜在的临床应用价值。克隆 tumstatin 基因,重组表达 tumstatin 蛋...
- 宋娜玲颜廷东赵启仁张春明褚丽萍王德芝贺欣
- 文献传递
- 人tumstatin基因的克隆表达及其鉴定
- 2007年
- 目的重组表达人tumstatin,为人tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础。方法提取HEK293细胞总RNA,通过RT-PCR扩增人tumstatin基因,导入pMD19-T,测序,然后亚克隆至pET28a,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定。结果提取的总RNA经电泳,有清晰的28S和18S两条带。RT-PCR扩增产物长度与理论值750bp相一致。测序证实tumstatin基因正确插入载体中。重组人tumstatin在大肠杆菌中高效表达,表达量约占菌体总蛋白量的30%。Western blot证实所表达蛋白为目的蛋白。结论重组人tumstatin蛋白在大肠杆菌中高效表达,为进一步的tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础。
- 颜廷东宋娜玲赵启仁刘家慧贺欣褚丽萍张春明
- 关键词：TUMSTATIN基因克隆和表达
- 肿瘤抑素T7肽及其衍生物T7-NGR的载体构建及表达
- 目的:为了提高作用靶向性，将导向肽NGR与肿瘤抑素T7肽的C端连接，获得T7肽及其衍生物T7-NGR的载体。方法:通过PCR和合成基因序列方法分别构建了肿瘤抑素T7肽及T7-NGR的克隆载体pMD-T7和pMD-T7N，...
- 贺欣赵启仁宋娜玲颜廷东
- 关键词：基因克隆表达
- 核酸杂交的二次酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析
- 2007年
- 目的建立一种超灵敏的用于核酸杂交分析的方法。方法通过二次酶放大、PCR扩增、Tb螯合物和时间分辨测量技术,测定前列腺特异抗原（PSA）DNA。结果靶PSADNA测定的标准曲线线性范围大于两个数量级;灵敏度为10pmol/L（0.5fmol/孔）;当靶PSADNA为10、30和60pmol/L时,准确度和精密度分别为77%～95%和12.9%～15.3%。结论本法是一种超灵敏的、简捷和快速的全新分析方法,有很好的应用前景。
- 宋娜玲赵启仁李美佳褚丽萍庄湘莲颜廷东贺欣周伟玲张春明
- 关键词：核酸杂交铽
- 放射受体显像剂-人tumstatin的初步研究
- 目的：克隆人肿瘤抑素tumstatin基因,为后期的人tumstatin的表达和tumstatin的放射受体显像奠定基础。方法：从HEK293细胞中提取总RNA做模板,RT-PCR扩增tumstatin cDNA,转入克...
- 颜廷东赵启仁宋娜玲褚丽萍贺欣李玉彬张春明
- 关键词：肿瘤新生血管生成基因克隆基因序列
- 文献传递
- 核酸杂交的镧系元素发光时间分辨荧光分析中关键试剂的研制
- 目的：研制成核酸杂交的镧系元素发光时间分辨荧光分析中的关键试剂。方法：用过碘酸钠法研制成辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素(SA),用戊二醛二步法研制成碱性磷酸酶(ALP)标记链霉亲和素和用化学合成法研制成5-氟水杨...
- 宋娜玲赵启仁李美佳褚丽萍周伟玲颜廷东贺欣张春明
- 关键词：时间分辨荧光核酸杂交镧系元素
- 文献传递
- 放射受体显像剂-人tumstatin的克隆表达及其鉴定
- 目的人肿瘤抑素(tumstatin)可以抑制肿瘤新生血管的生成,通过用99Tcm标记tumstatin,进行肿瘤的放射受体显像,具有重要和潜在的临床应用价值.克隆tumstatin基因,重组表达tumstatin蛋白,为...
- 宋娜玲贺欣颜廷东王德芝张春明唐晓赵启仁
- 关键词：肿瘤抑素肿瘤新生血管生成基因克隆
- 放射受体显像剂-人tumstatin的克隆表达及其鉴定
- 目的：人肿瘤抑素(tumstatin)可以抑制肿瘤新生血管的生成,通过用99Tcm标记tumstatin,进行肿瘤的放射受体显像,具有重要和潜在的临床应用价值.克隆tumstatin基因,重组表达tumstatin蛋白,...
- 宋娜玲贺欣王德芝张春明颜廷东温镭赵启仁
- 关键词：TUMSTATIN基因克隆和表达
- 肿瘤抑素T_7肽及其衍生物T_7-NGR载体构建及表达被引量：9
- 2008年
- 目的为了提高作用靶向性,将导向肽NGR与肿瘤抑素T_7肽的C端连接,获得T_7肽及其衍生物T_7-NGR的载体。方法通过PCR和合成基因序列方法分别构建了肿瘤抑素T_7肽及T_7-NGR的克隆载体pMD-T_7和pMD-T_7N,经酶切和测序鉴定后,将2种载体分别双酶切,经低熔点琼脂糖凝胶电泳分离后,切下目的片段与酶切回收的质粒载体pET28a在低熔点琼脂糖中直接进行连接反应。阳性克隆经酶切和测序鉴定,转化感受态E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。结果酶切和测序鉴定结果正确,分别成功构建表达载体pET-T_7和pET-T_7N,经IPTG诱导,完成了表达条件的优化。Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,当IPTG浓度为1mmol/L时,25℃诱导8h,分别获得了T_7肽和T_7-NGR的表达产物。结论已经成功构建T_7肽和T_7-NGR的表达载体,获得了表达产物,为下一步的小肽活性实验奠定了基础。
- 贺欣赵启仁宋娜玲颜廷东
- 关键词：基因克隆表达
- PSA基因扩增研究及其在核酸杂交中的应用
- 目的建立前列腺癌早期诊断方法。方法培养前列腺癌LNCaP细胞,提取LNCaP细胞总RNA,RT-PCR扩增前列腺特异抗原（Prostate Specific antigen,PSA）基因,用洋地黄毒苷标记PSA DNA,...
- 褚丽萍宋娜玲赵启仁张春明颜廷东
- 关键词：前列腺特异抗原RT-PCR
- 文献传递
