魏化伟
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区科技计划项目内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人B细胞激活因子融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定
- 2013年
- 目的获得人类B细胞激活因子(B cell activating factor,BAFF)胞外段融合蛋白并对其生物活性进行分析。方法构建pET32a/BAFF的原核表达载体,进行原核表达、亲和纯化,并通过SDS-PAGE、Western印迹进行鉴定。利用非还原电泳后的Western印迹与HPLC分析融合蛋白在溶液中的存在形式。ELISA、Octet RED系统检测rhBAFF结合受体TACI的能力并做出实时动力学分析。MTS法检测rhBAFF促进B细胞增殖的活性。结果融合蛋白在大肠杆菌BL21中以可溶形式高效表达,经Ni-NTA纯化获得的目的蛋白纯度超过90%;SDS-PAGE、Western印迹显示在相对分子质量为36×103位置有目的蛋白的特异条带;非还原电泳及HPLC分析表明,重组蛋白以三聚体的形式存在;ELISA、Octet RED系统同时证实BAFF可与受体TACI结合;增殖实验证实重组蛋白具有生物学活性。结论成功获得纯度超过90%的rhBAFF可溶蛋白,实验证实为具有生物学活性的三聚体结构。
- 王茹林周魏化伟彭辉侯春梅冯健男沈倍奋黎燕
- 关键词：B细胞激活因子受体三聚体表达纯化
- 补体C5a受体拮抗剂体外筛选平台的建立被引量：2
- 2011年
- 目的建立稳定的补体C5a受体(C5aR)拮抗剂筛选平台。方法采集人外周静脉抗凝血,与不同浓度C5a、脂多糖及PMX-53孵育10～30 min。通过流式细胞术检测中性粒细胞表面CD11b的表达,溶菌酶检测试剂盒观察中性粒细胞分泌溶菌酶的能力变化,罗丹明-123检测中性粒细胞呼吸爆发的变化,ELISA检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-8的表达变化,Western Blotting检测胞外信号调节激酶(ERK)、蛋白激酶B(AKB或AKT)含量及其磷酸化水平的变化,考察补体C5a刺激及使用阳性药物PMX-53后对各生化指标的影响。结果 C5a刺激人外周血可增强中性粒细胞CD11b的表达,促进溶菌酶释放和IL-8的分泌,激发呼吸爆发,上调ERK、AKT的含量和磷酸化水平,阳性药物PMX-53则能显著抑制C5a的上述生物学效应。结论成功建立C5aR拮抗剂人全血体外筛选平台,为C5aR拮抗剂筛选及功能研究奠定了基础。
- 王会会陈国江杨跃梅魏化伟王立燕彭晖李新颖王一黎燕石艳春
- 关键词：C5A
- C5a分子重要功能表位的确定
- 补体系统是人体天然免疫系统的重要组成部分,包括经典途径、凝集素途径和旁路途径。在补体系统的活化过程中,会产生C3a、C4a、C5a等炎性介质,其中以C5a生物活性最强。它是由C5经C5转化酶裂解产生的一个片段,具有广泛的...
- 魏化伟冯健男黎燕
- 文献传递
- 基于抗原抗体立体结构的功能表位研究
- 抗原表位(epitope),又称抗原决定簇(antigenic determinant,AD)指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团,抗原以此与相应淋巴细胞表面的受体结合,进而引发免疫应答和免疫反应。 抗原-抗体的相互...
- 魏化伟
- 关键词：TNFC5A同源模建抗原表位分子对接
- 文献传递
