么宏强
- 作品数：55 被引量：63H指数：5
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白与Hyal-2蛋白的结合域研究被引量：3
- 2016年
- 试验证明绵羊的Hyal-2不仅可以与绵羊肺腺瘤病毒的囊膜蛋白Env结合,也可以单独与绵羊肺腺瘤病毒SU蛋白亚基结合。为了进一步研究绵羊Hyal-2与SU蛋白可能结合的区域,应用在线生物学软件预测了SU蛋白的膜外区(对应编码基因序列238bp^867bp)将之前已经构建的缺失型SU蛋白真核表达载体pEGFP-C1-(su1-su5)与pDsRed-monomer-N1-hyal-2共转染293T细胞,运用激光共聚焦方法结合免疫共沉淀方法确定SU蛋白和Hyal-2蛋白可能结合区域。激光共聚焦显微镜观察结果表明,SU1-SU5与Hyal-2均存在细胞内共定位。免疫共沉淀方法检测缺失型蛋白SU1-SU5与绵羊Hyal-2均不存在相互作用。su基因所缺失区域238bp^867bp对于SU蛋白与受体的结合都是必不可少的。
- 张月梅赵世华么宏强马学恩
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒
- 绵羊肺腺瘤病病毒NM株衣壳蛋白基因的克隆与原核表达被引量：2
- 2007年
- 为了建立原核高效表达体系,从自然感染绵羊肺腺瘤病病毒内蒙(NM)株的肺肿瘤组织中提取基因组DNA,应用PCR技术扩增编码gag基因衣壳蛋白(Capsid protein,CA)基因,构建CA蛋白的重组表达质粒pGEX-4T-1-CA,经酶切、PCR及DNA测序鉴定后,将阳性质粒转化入Ecoli BL21 CodonPlus中,在IPTG的诱导下表达,表达产物用SDS-PAGE分析鉴定。结果表明,该基因可以在大肠杆菌中以可溶性和包涵体形式高效表达,表达的CA融合蛋白表观分子量约为37 Ku,表达量占全菌蛋白的20%,利用谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析柱纯化可以得到具有较高纯度的表达蛋白,是一种理想的免疫原。本研究为下一步利用重组蛋白研制绵羊肺腺瘤病病毒NM株的单克隆抗体及诊断试制盒等奠定了基础。
- 斯日古楞么宏强马学恩王升启
- 关键词：绵羊肺腺瘤病衣壳蛋白基因克隆
- 营养限制及补偿对羔羊体重及外周血液CD4^+和CD8^+ T淋巴细胞的影响被引量：6
- 2010年
- 本试验旨在研究羔羊营养限制期(第1~60天)和营养补偿期(第61~150天)体重和外周血液中CD4+和CD8+T淋巴细胞的变化规律。选用80只体况中等、平均体重为(14.72±1.10)kg的3月龄乌珠穆沁羔羊,随机分为对照组(CG)、限制组Ⅰ(RGⅠ)、限制组Ⅱ(RGⅡ)和限制组Ⅲ(RGⅢ)4个组。营养限制期4组饲粮能氮水平分别为代谢能(ME):10.88、10.88、9.41和8.62MJ/kg;粗蛋白质(CP):15%、10%、10%和5.7%。营养补偿期各组饲喂同一能氮水平饲粮(ME:9.75MJ/kg;CP:12%)。在试验期每周称重并在第1天、第30天、第60天、第90天和第150天饲喂前从各组羊颈静脉采血,采用流式细胞仪检测羔羊血液中的CD4+和CD8+T淋巴细胞比例。结果表明:1)营养限制结束,RGⅠ组、RGⅡ组和RGⅢ组平均体重均显著低于CG组(P<0.05)。补偿期RGⅢ组平均日增重显著高于CG组(P<0.05)。2)营养限制前期(第1~30天)各组CD4+和CD8+T淋巴细胞浓度均呈上升趋势。补偿期结束时CD4+T淋巴细胞浓度RGⅠ组最低RGⅡ组最高,CD8+T淋巴浓度RGⅡ组最低RGⅠ组最高,差异均不显著(P>0.05)。结果提示,乌珠穆沁羔羊受不同能氮营养水平限制后体重和免疫机能有补偿效应,而且低能高氮比高能低氮限饲后得到的补偿效果较好,表明限饲蛋白质比限饲能量对补偿生长的负影响更大。蛋白质和能量同时限饲补偿生长最差。
- 刘小刚侯先志李大彪考桂兰王海荣么宏强赵媛
- 关键词：营养限制羔羊体重T淋巴细胞CD8+T淋巴细胞
- 绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠体内的表达被引量：1
- 2012年
- 为探讨绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白(OPAV-Env)引起肺泡Ⅱ型上皮恶变的机理,将真核表达质粒pcDNA3.1-env用体内转染试剂经尾静脉转染到幼龄大鼠体内,用RT-PCR及免疫组化法检测绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠体内的表达,并采用SSCP法及基因克隆法结合序列分析检测H-ras基因是否发生突变。结果显示,绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白在大鼠肺脏组织存在表达,但转染21d后和正常大鼠比较,未发现大鼠H-ras基因发生突变。
- 李靖瓦西力周艳喜么宏强于立新敖威华马学恩
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒RAS基因免疫组化单链构象多态性
- 绵羊肺腺瘤病毒受体透明质酸酶-2的原核表达及纯化被引量：1
- 2013年
- 为建立绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)受体透明质酸酶-2(Hyal-2)的原核高效表达体系,本试验设计了扩增JSRV受体Hyal-2基因的特异性引物,应用PCR技术扩增出Hyal-2全长基因,将该基因定向重组于原核表达载体pGEX-4T-1中,构建pGEX-4T-1-Hyal-2重组质粒,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,逐步优化条件至稳定表达,经Western blotting检测融合蛋白成功表达后,通过亲和层析法对融合蛋白进行纯化。结果表明,Hyal-2基因正确地插入到原核表达载体pGEX-4T-1中;经诱导含重组质粒pGEX-4T-1-Hyal-2的表达菌高效表达了带GST标签的目的蛋白;SDSPAGE电泳结果显示目的蛋白分子质量为80 ku,与预期大小一致,经Western blotting验证为带GST标签的融合蛋白;通过谷胱甘肽亲和层析法获得纯化的目的蛋白。本试验结果为进一步制备Hyal-2蛋白的多克隆抗体及深入研究其功能奠定基础。
- 朱福余马学恩于立新么宏强
- 关键词：绵羊肺腺瘤病原核表达蛋白纯化
- 绵羊肺腺瘤病毒检测方法的研究进展被引量：5
- 2014年
- 绵羊肺腺瘤(OPA)是由β-反转录病毒属绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)引起的一种肿瘤性传染病,该病潜伏期长,经呼吸道传播,冬季圈养种羊发病率高,目前无治疗措施,病死率为100%。OPA的持续存在对种羊生产形成了潜在威胁并造成较大经济损失,严重危害养羊业健康发展。所以,对OPA的早期精确诊断是防制本病的前提,尤其是在出入境检验检疫过程中对进出口羊的JSRV检测尤为重要。随着分子生物学技术的不断发展,JSRV分子生物学检测方法也得到不断的创新和改进。作者就近年来针对检测JSRV的聚合酶链式反应(PCR)、核酸探针杂交技术、酶联免疫吸附试验(ELISA)、环介导等温扩增技术(LAMP)等方法的研究概况作一综述,为寻找快速准确并适用于出入境检疫的JSRV检测方法和进一步发展研究新型JSRV检测方法提供参考。
- 朱福余于立新么宏强马学恩
- 人工感染绵羊肺腺瘤病毒内蒙株羔羊的临床病理学研究
- 为探索绵羊肺腺瘤病毒内蒙株(jaagsiekte sheep reuovirus.JSRV-NM)的致病性及绵羊肺腺瘤病的分子发病机理，本文在2004年人工感染实验的基础上，选用改良无角道赛特羊作为实验动物并加大了接毒剂...
- 武志红么宏强于立新马学恩
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒临床病理学发病机理血气指标
- 文献传递
- 绵羊肺腺瘤病毒缺失型SU蛋白真核表达载体的构建被引量：1
- 2017年
- 试验证明绵羊透明质酸酶2(hyaluronidase 2,Hyal-2)可以作为绵羊肺腺瘤病毒的受体与绵羊表面蛋白(surface protein,SU)亚基结合。为了进一步研究绵羊Hyal-2与SU蛋白可能结合的区域,运用生物信息学软件预测了SU蛋白的膜外区部分,然后分别构建了一系列缺失型真核表达载体,将缺失型SU蛋白真核表达载体pEGFP-C1-(su1~su5)转染293T细胞,激光共聚焦显微镜观察结果显示:SU1-SU5融合蛋白定位于细胞质,Western blot结果显示在66 000处出现阳性条带,表明成功构建了SU蛋白缺失型真核表达载体。
- 张月梅马学恩么宏强赵世华
- 关键词：真核表达载体激光共聚焦
- 绵羊肺腺瘤病自然病例的临床病理学观察被引量：5
- 2006年
- 么宏强马学恩于立新张淑琴郑秉武
- 关键词：肺腺瘤病病理学观察自然病例绵羊自然感染病羊
- 胎盘提取物的制备与免疫调节功能及应用研究进展
- 2020年
- 主要介绍了胎盘提取物的制备方法、免疫调节功能以及在生产生活中的应用。总结出,胎盘提取物有着免疫调节、抗氧化、抗肿瘤和营养作用;其制备方法主要有超滤法、酶解法和微生物发酵法,各自具有优势和不足,选择胎盘提取物制备方法时可以根据自有的条件和要求及前人的经验综合判断;在皮肤护理方面,胎盘提取物可以作为抗氧化成分添加到护肤品中以起到延缓皮肤衰老的作用;在疫病治疗方面,能改善肝炎患者的临床症状和肝功能,对胰腺癌细胞的增殖有负调控作用,对于超敏反应也有一定的治疗效果,在神经再生方向效果显著。胎盘提取物在保健品和护肤品研发、疾病治疗方面应用前景广阔。
- 赵素洵玉斯日古楞云皓琪么宏强
- 关键词：胎盘提取物免疫调节
