乔贵林
- 作品数：42 被引量：268H指数：10
- 供职机构：解放军农牧大学军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 一种新型的可调控性真核表达载体
- 1997年
- 最近Gossen等报道了一种新型的可调控性真核表达载体,其主要特点是在真核启动子的上游融合了四环素操纵子结构,通过控制四环素操纵子的开启(on/off)从而启动转录的开始,使得外源基因获得表达。这种结构在转基因动物及基因治疗上有着良好的应用前景。 四环素操纵子结构的开启是在四环素衍生物如强力霉素等的作用下。
- 岳军明梅柱中乔贵林阎喜军殷震
- 关键词：真核表达载体人巨细胞病毒子结构基因治疗转基因动物强力霉素
- 黑熊黄曲霉毒素中毒
- 1992年
- 云南德宏州某珍贵禽兽养殖场饲养130头黑熊,从1990年9月初开始陆续发病,经用抗生素、磺胺和中草药对症治疗无效,死亡熊27头。经检验,此群黑熊患的是黄曲霉毒素中毒,现报道如下。
- 齐桂凤李国荣范泉水乔贵林陆明昌王度林
- 关键词：黑熊黄曲霉毒素中毒
- 电穿孔导入法在家兔精子基因转移中的应用被引量：11
- 2000年
- 用假阴道法采集青紫蓝家兔精液 ,经电击缓冲液清洗、适当稀释后 ,加入质粒 DNA,利用BAERON60 0 0型基因转移仪 ,选择 9组不同的电击条件对其进行电击处理 ,电击后的精子经 DNA 酶消化后作地高辛标记探针的原位杂交检测。结果显示 :( 1 )电穿孔导入法确实能使精子细胞携带上外源基因 ;( 2 )最佳的电击条件为 ,脉冲时间 50 0 ms,电压 6k
- 黄伟民乔贵林赵君赖良学岳军明安靓王凯付殿国殷震李进
- 关键词：基因转移精子家兔外源基因
- 人c-myc乳腺定位表达转基因小鼠的建立
- 2002年
- 以含有 1.6 kb的小鼠乳清酸蛋白 (WAP)上游调序列的 p CAT- WAP和含有人 c- myc c DNA的 p WM为原始质粒 ,构建了 WAP启动子调控下的 c- myc乳腺定位表达载体 p WCS。载体用 Bgl +Bam H 酶切 ,回收 3.5 kb的基因片段 WAP- c- myc- SV40 Poly A,通过显微注射方法导入 C5 7BL/ 6 J× DBA/ 2 JF1 代小鼠受精卵的雄原核内。共注射10 0 0枚卵 ,将存活的约 6 0 0枚卵分别移植至 2 9只假孕母鼠输卵管内 ,获得仔鼠 45只。PCR检测 ,阳性鼠 9只 ,South-ern blot检测 ,阳性鼠 3只 ,其中 1只母鼠 ,2只公鼠 ,在饲养过程中 ,1只母鼠意外死亡。对 2只转基因公鼠的 F1代PCR检测表明 ,仅 1只公鼠具有遗传性 ,在所生的 2 7只 F1代小鼠中有 13只为 PCR阳性。
- 赵君张守峰刘彬任文陟宇丽乔贵林扈荣良殷震
- 关键词：转基因小鼠乳腺C-MYC原癌基因
- 人白细胞抗原-B27(HLA-B27)转基因小鼠的建立
- 2000年
- 人白细胞抗原 -B2 7( HLA-B2 7)与强直性脊柱炎 ( AS)有强相关性 ,为构建 AS动物模型以用于其发病机理和治疗的研究 ,将 HLA-B2 7基因与 β2 -微球蛋白基因等量混合后 ,利用显微注射技术注入昆明小鼠的1 3 70枚受精卵中 ,再将注射后存活的 1 0 50枚卵移植到 58只假孕母鼠体内 ,产仔 97只。PCR检测上述 97只转基因仔鼠 ,结果 2 7只为阳性。Southern blotting检测上述 2 7份 PCR阳性小鼠的基因组 ,结果 8只为阳性 ,表明已成功地建立了 HLA-B2
- 周轶琳乔贵林杨少峰吴启富刘毅张玉勋殷震
- 关键词：HLA-B27转基因小鼠强直性脊柱炎动物模型
- 牛BLG/hEPO和大鼠WAP/hEPO基因在家兔乳腺中的表达被引量：2
- 2002年
- 将人红细胞生成素 (h EPO)基因组 DNA(g DNA)与 1.1kb牛 β-乳球蛋白 (BL G)基因的 5′端上游调控序列融合 ,构建了 p CMV- BL G- EPO- b GH poly A(p CBEA)乳腺定位表达载体。该载体与已构建的大鼠乳清酸蛋白 (WAP)基因 5′端上游调控序列和 h EPO融合基因 p WAP- EPO- WAP3′U TR(p WE3′)和 p CMV- WAP- EPO- b GH poly A (p CWEA )经脂质体包裹后 ,通过显微外科方法 ,经乳腺导管注入妊娠中后期家兔乳腺内 ,进行短暂表达。于家兔分娩后 1～ 2 5 d采奶 ,EL ISA检测乳汁中 EPO含量 ,3个载体均获得表达。表达水平从高到低依次为 p CWEA、p CBEA、p WE3′;表达量为 0 .116～ 0 .75 3μg/ L 。
- 乔贵林赵君岳军明宇丽赖良学张守峰王风阳扈荣良殷震
- 关键词：WAP家兔乳腺基因表达
- 鸭冠状病毒的感染试验被引量：4
- 1992年
- 1988年3月,云南昆明海埂养鸭厂,幼龄北京鸭群之间,爆发了一场以腹泻为主症的急性传染病,调查并证实是由冠状病毒引起的(齐桂凤等,1988),我们随机采了60份与发病鸭同龄健康鸭的粪便,结果有19％的鸭粪中含有少量的冠状病毒。用发病时采集的病料(肠管及粪便)处理后口服接种幼龄鸭,结果幼龄鸭大部分仅呈现轻度腹泻,疾病的严重程度及死亡率,远不如爆发流行时严重。
- 乔贵林范泉水齐桂凤陆明昌沈居仁龙沛然曾子安张新生
- 关键词：冠状病毒
- 人红细胞生成素乳腺特异性表达载体构建及其可行性检验方法的建立被引量：22
- 1999年
- 将大鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的上游调控序列与人红细胞生成素基因组ＤＮＡ融合，构建了ｐＷＡＰ－ＥＰＯ－ＷＡＰ３乳腺特异性表达载体，该载体经脂质体包裹后，通过显微外科技术，经乳腺导管注入妊娠中后期大鼠乳腺中进行表达。经ＥＬＩＳＡ检测，大鼠乳汁中有ＥＰＯ表达，外周血网织红细胞计数法测定表达的ＥＰＯ具有体内生物活性。
- 阎喜军乔贵林岳军明梅柱中赖良学殷震
- 关键词：人红细胞生成素EPO
- 用曲细精管微注射法建立绿色荧光蛋白转基因小鼠被引量：37
- 2002年
- 目的研究曲细精管微注射法建立转基因小鼠的可行性。方法选取人巨细胞病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(pCMV-EGFP)表达载体,应用体视解剖镜和显微注射仪将不同剂量的被脂质体包裹的质粒DNA注射到不同年龄的KM小鼠曲细精管内。在注射后40d左右,雄鼠与雌鼠合笼交配;分娩后3周,剪取仔鼠尾,提取基因组DNA,应用PCR、Southernblotting技术进行整合检测。处死2只首建小鼠,荧光显微镜观察组织冰冻切片中EGFP的表达。结果共注射41只雄性小鼠,存活34只,其中32只具有交配、受精能力,获得仔鼠382只。仔鼠经检测,PCR阳性133只,Southernblotting阳性15只。小鼠的年龄、注射剂量与EGFP的整合率没有明显关系,荧光显微镜观察下没有观察到组织冰冻切片中EGFP明显表达。结论曲细精管微注射法是动物基因转移的一条简便可行的新途径。
- 沈新明乔贵林张玲江培洲黄华姚开泰
- 关键词：绿色荧光蛋白转基因小鼠
- 牛BLG/tPA和牛as1酪蛋白/tPA基因在家兔乳腺中的暂时表达被引量：7
- 2001年
- 为鉴定和筛选用于制备 t PA转基因动物乳腺生物反应器的高效表达载体 ,试验分别以 1.1kb牛 b-乳球蛋白(BL G)基因、1.0 kb牛 as1酪蛋白基因 5′端侧翼调控序列与 1.7kb经过改造的人组织纤溶酶原激活剂 (t PA) c DNA融合 ,构建了 p BL G- PA 2和 pas1- PA2 2个乳腺定位表达载体。载体经酶切鉴定正确后 ,用脂质体包裹 ,并用毛细玻璃管经乳头管导入妊娠中后期的家兔乳腺 ,进行暂时表达。分别于家兔分娩后 1～ 15 d采奶 ,采用琼脂糖平板溶圈法测定乳汁中 t PA的含量和活性。结果 2个载体均获得表达 ,且 p BL G- PA2表达水平高于 pas1- PA 2。 p BL G- PA2和 pas1-PA2在家兔乳汁中的含量分别为 2 0 0～ 85 0μg/L和 5 0～ 2 5 0μg/L。
- 乔贵林赵君赖良学金鼎李银聚扈荣良殷震
- 关键词：乳腺
