任小芳
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 转Vip3Aa基因的球孢白僵菌工程菌的构建及其对马尾松毛虫毒力的增效作用被引量：3
- 2011年
- 根据苏云金杆菌营养期杀虫蛋白基因Vip3Aa序列设计全基因扩增引物,并在引物两端添加合适的酶切位点进行PCR扩增,纯化的PCR产物和载体pbarGPE1分别经Xho I和EcoR I双酶切、连接,构建真菌表达载体pbarGPE1-vip3Aa。将构建好的质粒经Sca I酶切线性化后,利用芽生孢子转化法转入昆虫病原真菌球孢白僵菌Bb13菌株内,得到白僵菌工程菌株Bb13V。RT-PCR结果证明Vip3Aa在工程菌株中已得到成功转录。在室内恒温25℃条件下,用喂食、喷雾以及两者相结合的方法,分别测定1×10^5、1×10^6、1×10^7、1×10^8和2×10^8孢子.mL^-1 5个不同孢子浓度下原始菌株和工程菌株对二龄马尾松毛虫的毒力。结果表明,在前4种不同浓度的处理条件下,采取3种不同的处理方式,工程菌株均比喷雾处理的原始菌株致死率提高30%以上;喷雾处理的毒力提高33.6-62.1倍;喂食处理的致死率均高于喷雾处理。在1×108孢子.mL^-1浓度下,喂食处理的致死率显著高于喷雾处理,致死中时缩短6.89 d。因此,Vip3Aa基因在转入白僵菌后得到了表达,从而赋予白僵菌可观的胃毒作用,使得工程菌对松毛虫的毒力明显增强。
- 任小芳刘振邦朱虹黄勃李增智
- 关键词：球孢白僵菌苏云金杆菌基因工程
- 苏云金芽孢杆菌晶体杀虫蛋白Cry1Ac基因在虫生真菌球孢白僵菌中的表达被引量：1
- 2011年
- 依据苏云金芽孢杆菌晶体杀虫蛋白Cry1Ac基因序列设计引物进行PCR扩增,纯化产物与载体pbarGPE1连接,构建真菌表达载体pBARGPE1-Cry1Ac,通过芽生孢子转化法转入野生型球孢白僵菌中,获得多拷贝转化子;毒力测定结果表明转化子对马尾松毛虫的LC25比出发株降低5.4倍,LD25减少7.1倍,LT25缩短2.2 d,毒力明显提高;喂食处理和虫体喷雾喂食结合处理与单纯虫体喷雾处理相比,累计致死率分别提高了55.6%和63.0%,致死中时分别缩短了4.5 d和5.3 d。结果表明,苏云金芽孢杆菌晶体杀虫蛋白Cry1Ac基因的表达显著提高了球孢白僵菌的毒力。这是Cry1Ac基因首次在虫生真菌中表达。
- 刘振邦任小芳宋文婧朱虹黄勃李增智
- 关键词：BT毒蛋白CRY1AC基因球孢白僵菌
- 苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白基因Vip3Aa在虫生真菌球孢白僵菌中的表达
- 球孢白僵菌作为最为常见的虫生真菌，寄主范围广，且易于大量生产，在自然环境中有时能在寄主种群中形成流行病，有利于抑制虫口的大发生。但由于其对害虫的致死时间较长、对环境条件要求又高，所以球孢白僵菌杀虫剂应用的广泛性受到限制。...
- 任小芳
- 关键词：球孢白僵菌毒力测定
- 文献传递
- 苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白基因Vip3Aa在虫生真菌孢白僵菌中的表达
- 球孢白僵菌作为最为常见的虫生真菌，寄主范围广，且易于大量生产，在自然环境中有时能在寄主种群中形成流行病，有利于抑制虫口的大发生。但由于其对害虫的致死时间较长、对环境条件要求又高，所以球孢白僵菌杀虫剂应用的广泛性受到限制。...
- 任小芳
- 关键词：球孢白僵菌毒力测定虫生真菌
- 文献传递
