刘志强 作品数:6 被引量:13 H指数:2 供职机构: 哈尔滨医科大学附属第二医院 更多>> 发文基金: 黑龙江省科技攻关计划 黑龙江省教育厅科学技术研究项目 黑龙江省卫生厅科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
p21^(WAF1)基因对人食管鳞癌细胞增殖的抑制作用 被引量:7 2009年 目的:探讨p21WAF1(p21)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响.方法:根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组.p21转染组:用脂质体Lipofectamine2000介导将pCDNA3.1(+)-p21质粒转染入EC109细胞;空载体转染组:同样方法将pCDNA3.1(+)-neo质粒转染入EC109细胞;未转染组:未转染的EC109细胞.应用RTPCR、Western blot分别检测p21基因mRNA、P21蛋白变化;流式细胞仪分析细胞周期变化,应用MTT、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p21基因对EC109细胞增殖和凋亡的影响.结果:p21转染细胞中p21 mRNA和P21蛋白高表达;p21转染组EC109细胞生长速度低于空载体组和未转染组;流式细胞仪观察到P21蛋白高表达使EC109细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组(63.120%±2.893%vs41.380%±6.536%,42.173%±5.301%,均P<0.01),S期比例显著低于空载体组和未转染组(18.923%±3.084%vs22.573%±5.463%,26.867%±2.922%,均P<0.01),并出现亚G1峰(凋亡峰).透射电镜亦发现p21转染组发生细胞凋亡.结论:p21基因转染可以抑制人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖并能诱导其发生细胞凋亡. 张学彦 景德怀 刘志强 关景明 刘伟关键词:P21WAF1 基因转染 食管鳞癌 p15^(INK4B)和p21^(WAF1)基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109的协同抑制作用 被引量:1 2009年 目的:探讨p15INK4B(p15)和p21WAF1(p21)基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响.方法:脂质体介导pcDNA3.1(+)-p15和pcDNA3.1(+)-p21转染EC109细胞,稳定筛选后用RT-PCR检测转染细胞p15与p21基因mRNA表达,Western blot检测转染细胞P15和P21蛋白的表达.用MTT法和透射电镜检测p15和p21基因分别及联合转染对EC109细胞增殖与凋亡的影响,流式细胞仪检测EC109细胞周期分布与凋亡率.结果:p15和p21转染组EC109细胞生长速度低于空载体组与未转染组,联合转染组与二者单独转染组相比,亦明显抑制EC109细胞体外生长速度.p15和p21转染组EC109细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组,S期则显著降低(G1期:60.52%±3.75%,63.12%±2.89%vs42.17%±5.30%,41.38%±6.54%;S期:22.67%±1.25%,17.96%±2.03%vs30.96%±3.33%,36.05%±1.78%,均P<0.01),并出现凋亡峰,透射电镜亦发现p15和p21转染组发生细胞凋亡,联合转染组发生更为明显的G1/S阻滞,G1期比例显著升高、S期比例明显降低(G1期:72.83%±2.31%vs60.52%±3.75%,63.12%±2.89%;S期:13.59%±2.59%vs22.67%±1.25%,17.96%±2.03%,均P<0.05),凋亡率明显升高(21.21%±1.78%vs4.32±1.74%,10.83%±2.40%,均P<0.01).结论:p15和p21基因联合转染在体外可以进一步增强对人食管鳞癌EC109细胞的抑制与诱导凋亡作用. 张学彦 刘志强 景德怀 关景明 刘伟 刘铁夫 刘冰熔关键词:P15^INK4B 食管鳞癌 p21^(WAF1)基因对人胰腺癌细胞系BxPC-3增殖的抑制作用 被引量:2 2009年 目的:探讨p21WAF1(p21)基因转染对人胰腺癌细胞系BxPC-3细胞增殖的影响.方法:根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组,p21转染组、空载体转染组和未转染组.应用RT-PCR和Western blot方法检测转染细胞的p21基因表达变化;流式细胞仪分析细胞周期变化,用MTT、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p21基因对BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响.结果:p21转染组细胞存在p21 mRNA高表达和P21蛋白高表达;p21转染组细胞生长速度低于对照空载体转染组和未转染组;流式细胞仪观察到P21蛋白高表达使BxPC-3细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组(59.887%±3.700% vs 47.443%±6.354%,49.223%±2.226%,P<0.05),S期显著低于空载体组和未转染组(21.277%±2.080% vs 35.247%±3.966%,36.013%±1.540%,P<0.01),并出现亚G1峰(凋亡峰).透射电镜亦发现p21转染组发生细胞凋亡.结论:p21基因转染可以抑制人胰腺癌细胞系BxPC-3细胞增殖并能诱导其发生细胞凋亡. 张学彦 姜仪增 刘志强 景德怀 关景明 刘伟关键词:P21WAF1 基因转染 胰腺癌 原发性胆囊癌的诊断及治疗进展 被引量:1 2013年 原发性胆囊癌是胆道系统常见的恶性肿瘤,其发生率在胆道系统中居首位,且发病隐蔽,发现时多属晚期,根治机会少,预后极差。原发性胆囊癌的确切病因目前尚不清楚, 刘志强 孙岩关键词:原发性胆囊癌 胆道系统 恶性肿瘤 发生率 非可疑胆总管结石的胆囊结石患者腹腔镜胆囊切除术术前行磁共振胰胆管造影费用效益分析 被引量:2 2013年 目的探讨非可疑胆总管结石的胆囊结石患者腹腔镜胆囊切除术(LC)术前行磁共振胰胆管造影(MRCP)费用效益分析。方法回顾性分析960例非可疑胆总管结石的胆囊结石患者的临床资料。根据LC术前是否行MRcP检查分为MRCP组(665例)和非MRCP组(295例)。比较两组患者的总住院费用、术后胆总管结石漏诊率、因胆总管结石漏诊的二次入院率、住院时间、术中胆道损伤情况。结果两组总住院费用、住院时间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。MRCP组胆总管结石漏诊率及因胆总管结石漏诊的二次入院率分别为0.15%(1/665)、0,低于非MRCP组的3.73%(11/295)、3.73%(11/295),差异有统计学意义(P〈0.05)。两组患者均无术中胆道损伤。结论就费用效益分析而言,非可疑胆总管结石的胆囊结石患者LC术前常规行MRCP检查是合适的,其在不增加患者总住院费用的同时有效地防止了胆总管结石的漏诊,降低了患者的二次入院率。 刘志强 孙岩关键词:胆总管结石 胆囊结石病 胰胆管造影术 费用效益分析 p15^INK4B基因对人胰腺癌细胞系BxPC3增殖的影响 被引量:1 2009年 目的探讨p15^INK4B(p15)基因转染对人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖的影响。方法采用脂质体将pCDNA3.1(+)-p15质粒及阴性对照pCDNA3.1(+)-neo质粒转染BxPC3细胞,以亲本细胞作为对照组。应用RT—PCR检测细胞p15^INK4B表达;Western blotting检测细胞p15蛋白表达;MTF法检测细胞增殖;透射电镜观察细胞超微结构变化;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果p15转染组细胞恢复p15^INK4B和蛋白表达。培养第2天生长被抑制,至第7天,生长抑制率达47.9%。G0/G1期细胞占(61.56±3.96)%,显著高于空质粒转染组的(47.44±6.35)%和对照组的(49.22±7.23)%(P〈0.05)。出现明显的G1凋亡峰,细胞凋亡率为(5.27±1.04)%,显著高于空质粒转染组的(0.11±0.06)%和对照组的(0.09±0.07)%(P〈0.05)。透射电镜观察到p15转染组发生细胞凋亡。结论体外p15基因转染可以抑制人胰腺癌细胞系BxPC3细胞增殖,并能诱导其凋亡。 张学彦 刘志强 景德怀 关景明 刘伟关键词:胰腺肿瘤 转染