刘改荣
- 作品数：13 被引量：24H指数：3
- 供职机构：浙江中医药大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省科技厅项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pcDNA3.1(+)-NRP1真核表达载体的构建与鉴定
- 2012年
- [目的]从人角质形成细胞系HaCaT中克隆NRP1(Neuropilin-1)基因全长cDNA,构建含NRP1基因的重组真核表达载体,为下一步的NRP1基因功能研究奠定基础。[方法]采用RT-PCR法从人角质形成细胞系HaCaT中扩增NRP1基因全长cDNA,扩增产物通过TA克隆连接到pMD18-T载体进行测序鉴定,然后通过双酶切将全长cDNA克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),最后得到pcDNA3.1(+)-NRP1重组质粒。[结果]成功克隆NRP1基因全长cDNA,并成功构建了pcDNA3.1(+)-NRP1真核表达载体。[结论]pcDNA3.1(+)-NRP1真核表达载体的成功构建可以为NRP1基因功能的进一步研究及其临床基因治疗奠定实验基础。
- 刘培曹毅陈微刘改荣杨晓红陶茂灿罗宏宾
- 关键词：HACAT细胞NRP1真核表达载体
- 姜黄素对肿瘤坏死因子-α诱导的HaCaT细胞增殖及凋亡的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨姜黄素对肿瘤坏死因子（TNF）-α诱导的HacaT细胞增殖及凋亡的影响。方法MTT法检测不同浓度重组TNF-α（0、1、5、10、25、50、100ng／m1）、姜黄素20μmol／L对Hacarr细胞增殖的影响。蛋白印迹实验检测25ng／ml TNF-α和20μmol/L姜黄素作用下Hacarr细胞PCNA、Notch-1的蛋白表达。使用Annexin-V/PI试剂盒在流式细胞仪上检测25ng／mlTNF—d和20μmol／L姜黄素作用下HacaT细胞早期凋亡情况。结果。TNF-α呈浓度依赖性促进HacaT细胞增殖，25ng／mlTNF-α对HacaT细胞的促增殖基本达到最大，20μmol／L姜黄素有效抑制25ng／ml TNF-α对HacaT细胞的促增殖作用，25ng／mlTNF-α对HaCaT细胞无明显促凋亡作用，而20μmol／L姜黄素有效促进HaCaT细胞发生凋亡，并可激发25ng／ml TNF-α对HaCaT细胞的凋亡诱导作用。结论姜黄素可激发TNF-α对HaCaT细胞的促凋亡作用，同时抑制TNF-α对HaCaT细胞促增殖作用。
- 杨晓红曹毅刘改荣代群解凡李园园陈微
- 关键词：银屑病肿瘤坏死因子-Α姜黄素
- 壳聚糖以及聚乙烯亚胺携载pGL3质粒转染细胞的毒性及效率实验研究
- 目的:通过对阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)以及PEI联合壳聚糖介导pGL3质粒细胞内转染的效率及细胞毒性的观察,为其进一步携载目的基因转染细胞做好前期铺垫工作。方法:培养HaCaT及HUVEC细胞,同时制备壳聚糖-PE...
- 曹毅刘改荣王莉陈微李园园杨晓红陶茂灿罗宏宾
- 关键词：聚乙烯亚胺壳聚糖质粒HACATHUVEC
- 文献传递
- 连续性肢端皮炎1例
- 2011年
- 连续性肢端皮炎（acrodermatitis continua）又名固定性肢端皮炎、匐行性皮炎,是好发于指、趾的一种慢性、复发性、无菌性、脓疱性皮肤病。临床上较少见,笔者在临床诊治到1例,现报道如下。1病历简介患者,男,24岁。双手指末端红斑、脓疱伴疼痛反复发作2年,加重3个月。
- 刘改荣曹毅何慧英
- 关键词：连续性肢端皮炎中医
- 卡介菌多糖核酸对慢性湿疹患者外周血IFN-和IL-4表达的影响被引量：11
- 2013年
- 目的观察卡介菌多糖核酸对慢性湿疹的疗效及对慢性湿疹患者外周血干扰素(IFN-)和白细胞介素-4(IL-4)表达的影响。方法采用单盲随机数字表法将60例慢性湿疹患者分为观察组和对照组各30例。观察组口服西替利嗪+肌肉注射卡介菌多糖核酸注射液;对照组口服西替利嗪+肌肉注射0.9%氯化钠注射液。3个月后观察临床疗效,并对外周血IFN-和IL-4指标检测。结果观察组总有效率达83.3%,对照组总有效率达53.3%,两组差异有统计学意义(<0.05);观察组治疗前后IFN-、IL-4水平差异均有统计学意义(<0.05);治疗后观察组与对照组IFN-及IL-4水平差异均有统计学意义(<0.05)。结论卡介菌多糖核酸可通过有效逆转外周血淋巴细胞的IFN-、IL-4表达异常,调整机体免疫功能,有效治疗慢性湿疹。
- 陈艳刘改荣
- 关键词：湿疹卡介菌多糖核酸干扰素Γ白细胞介素-4
- 糖足合剂对糖尿病足大鼠肢端坏疽相关血管因子的影响
- <正>目的观察糖足合剂对糖尿病大鼠肢端坏疽相关血管因子VEGF、NO、ET、Hcy、Lp(α)水平的影响。方法采用链脲佐茵素加低温法复制糖尿足大鼠模型。大鼠分为正常组,模型组,糖足合剂高、中、低剂量组,各组分别给予相应处...
- 陶茂灿杨晓红曹毅刘改荣解凡罗宏宾翁鹤李园园
- 文献传递
- 甘草次酸抑制EGF对HaCaT细胞促增殖作用的机制研究
- 目的:探讨甘草次酸对EGF诱导的HaCaT细胞增殖的影响,并对其可能机制进行相关研究,为甘草次酸在银屑病中的进一步应用奠定实验基础。方法:MTT法检测不同浓度重组EGF(0,1,5,10,25,50,100ng/ml)以...
- 曹毅解凡刘改荣杨晓红代群陈微
- 文献传递
- 卡介菌多糖核酸联合中药对白癜风患者T细胞亚群及Fas/FasL系统表达的调节被引量：5
- 2012年
- 目的 探讨卡介菌多糖核酸（BCG-PSN）联合中药白癜风颗粒治疗白癜风临床疗效及对免疫的调节作用。 方法 流式细胞仪和ELISA法检测BCG-PSN联合白癜风颗粒治疗白癜风前后T细胞亚群及外周血淋巴细胞Fas及FasL的表达水平，并与BCG-PSN及白癜风颗粒单一治疗对照组进行比较。结果 BCG-PSN联合白癜风颗粒治疗组总有效率达82.86%，明显高于BCG-PSN对照组的40.63%（P ＜ 0.01）。各组治疗前外周血CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋均低于健康对照组（P ＜ 0.01）， CD4＋/CD8＋比值升高（P ＜ 0.01）， Fas表达明显降低（P ＜ 0.01）。治疗后CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋较治疗前升高 （P ＜ 0.05），CD4＋/CD8＋比值下降（P ＜ 0.05），Fas明显上升（P ＜ 0.01）。结论 BCG-PSN可通过逆转外周血淋巴细胞的Fas/FasL表达异常，诱导淋巴细胞的正常凋亡，与中药合用起协同作用。
- 吴蓓玲孙洁杨晓红汤国根刘改荣陈琼王虹程立峰戴文静
- 关键词：卡介菌多糖核酸白癜风T细胞亚群FAS/FASL
- 壳聚糖及聚乙烯亚胺携载 pGL3质粒转染细胞的毒性及效率实验研究
- 2012年
- 目的通过对阳离子聚合物聚乙烯亚胺（PEI）以及 PEI 联合壳聚糖介导 pGL3质粒细胞内转染的效率及细胞毒性的观察,为其进一步携载目的基因转染细胞做好前期铺垫工作.方法培养 HaCaT 及 HUVEC 细胞,同时制备壳聚糖-PEI600Da （CP）以及 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒,采用 MTT 法观察壳聚糖、PEI600Da、PEI25kDa、CP 以及 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒对上述细胞的毒性作用,采用虫荧光素酶检测法观察 CP/DNA、PEI/DNA 纳米粒的转染效率.结果 CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒的细胞毒性明显低于 PEI25kDa/DNA 纳米粒的细胞毒性;CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒明显提高 DNA 转染 HaCaT、HUVEC 细胞的效率.结论 CP/DNA、PEI600Da/DNA 纳米粒有效转染 HaCaT、HUVEC 细胞,且细胞毒性低;阳离子聚合物 CP、PEI600Da 作为转染基因转染的载体具有广阔的应用前景.
- 曹毅刘改荣王莉陈微李园园杨晓红陶茂灿罗宏宾
- 关键词：聚乙烯亚胺壳聚糖质粒HACATHUVEC
- 甘草次酸抑制表皮细胞生长因子对HaCaT细胞促增殖作用的机制研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨甘草次酸对表皮细胞生长因子（EGF）诱导的HaCaT细胞增殖的影响，并对其可能机制进行相关研究。方法MTr法检测不同浓度EGF（0、1、5、10、25、50、100μg，IJ）以及不同浓度甘草次酸（0、0．1、I、10、25、50、100la,mol／L）对HaCaT细胞增殖的影响，25p,mol／L甘草次酸、10μmol／LMEKI／2抑制剂（U0126）对25μg／LEGF促HaCaT细胞增殖的抑制作用。蛋白免疫印迹法检测25μg，LEGF对ERKI／2磷酸化的促进作用，25／zmol／L甘草次酸、10／zmol／LU0126对ERKl／2磷酸化的抑制作用，25gg／LEGF、25μmol／L甘草次酸、10μmol／LU0126分别或同时作用下HaCaT细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、Notch-1蛋白的表达情况。使用SPSSl7．0统计软件对实验数据进行t检验、方差分析和相关分析。结果EGF在0～100μg／L范围内促进HaCaT细胞增殖（r=O．798，P〈0．05），在0～50μg／L范围内与HacaT细胞增殖呈线性相关（r=0．859，P〈0．05）。甘草次酸在10—100μmol／L范围内浓度依赖性地抑制HaCaT细胞增殖（r=-0．945，P〈0．01）；25μmol／L甘草次酸明显抑制25μg，LEGF对HaCaT细胞的促增殖作用以及对ERKl／2的促磷酸化作用。同时，25μmol／L甘草次酸、10txmol／LU0126均抑制25Ixg／LEGF对HaCaT细胞PCNA、Notch—I蛋白的促表达作用。结论甘草次酸可抑制EGF对HaCaT细胞的促增殖作用，其机制可能与甘草次酸抑制EGF对HaCaT细胞ERKl／2信号通路的激活有关。
- 解凡曹毅刘改荣杨晓红代群陈微
- 关键词：HACAT细胞表皮细胞生长因子促增殖作用甘草次酸蛋白免疫印迹法磷酸化作用
