刘运超 作品数:60 被引量:81 H指数:5 供职机构: 河南省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省科技攻关计划 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
隐孢子虫细胞免疫作用研究进展 被引量:2 2008年 隐孢子虫病药物防治效果均不理想。因而,许多学者在隐孢子虫免疫方面进行了大量研究。本文综述了免疫细胞、细胞因子等介导的细胞免疫保护作用,以期为该病的细胞免疫和免疫防治提供参考。 王秋霞 庞玉芳 鲁琨 宁长申 张丽萍 李娇 刘运超关键词:隐孢子虫病 细胞免疫 免疫细胞 细胞因子 PCV2b衣壳蛋白C端连接不同B细胞表位对其免疫原性的影响 被引量:1 2020年 为了研制廉价高效的猪圆环病毒2型(PCV2)亚单位疫苗,根据大肠杆菌密码子的偏好性合成PCV2b(GenBank:AY969004.1)cap基因全序列,利用PCR技术,分别将PCV2的2个B细胞表位(226LKDPPLNP233和195HVGLGTAF202)以单独和串联的方式连接到Cap的C端,成功构建至pE-SUMO表达载体,将3个重组载体转化表达菌株BL21(DE3)后诱导表达,经SDS-PAGE分析和Western Blotting鉴定,3种重组蛋白均以可溶形式表达且表达正确。对3种重组蛋白分别进行镍柱亲和层析纯化,再用SUMO蛋白酶除去融合标签,获得无标签的Cap-e1、Cap-e2和Cap-e12蛋白,并分别与相应的弗氏佐剂等体积乳化,将20只6周龄大小的雌性Balb/c小鼠随机分成5组,分别免疫3种重组蛋白,同时设置疫苗组和PBS组作为对照组,并进行免疫评价,比较C末端连接的不同B细胞表位对Cap免疫原性的影响。抗体检测结果表明,除第2周外,各试验组的抗体水平均显著高于PBS组,且连接2个表位的Cap-e12蛋白产生的抗体水平高于只连接1个表位的蛋白(Cap-e1、Cap-e2),而在第6周时,Cap-e12蛋白抗体水平与疫苗组无显著差异。综上Cap的免疫原性与连接表位数量有关,连接2个表位后能显著提高Cap的免疫原性。 刘晴坤 冯华 任春晓 魏蔷 刘运超 张改平关键词:衣壳蛋白 B细胞表位 免疫原性 与猪瘟病毒E2蛋白特定区域结合多肽配基设计及应用 本发明涉及与猪瘟病毒E2蛋白特定区域结合多肽配基设计及应用,属于多肽设计及病毒抗原检测领域。其中,所述的多肽配基序列为FYKRTSSS。本发明借助于分子对接及虚拟筛选技术,在黄病毒科病毒E2蛋白晶体结构的基础上,通过分子... 王方雨 邓瑞广 余秋颖 邢广旭 杨艳艳 刘运超 滕蔓 郝俊芳 柴书军 赵东 郭振华 王晶一种仔猪犬牙剪钳 本发明公开了一种仔猪犬牙剪钳,包括牙钳和牙剪,牙钳包括左钳瓣和右钳瓣,牙剪包括左剪瓣和右剪瓣,左钳瓣和右钳瓣靠轴一侧设置有凹槽,所述左剪瓣和右剪瓣分别匹配套装于左钳瓣和右钳瓣内侧,所述左钳瓣、左剪瓣、右剪瓣和右钳瓣依次叠... 焦文强 邢广旭 陈直 徐引弟 刘运超 王治方 王克领文献传递 2014—2018年猪流行性腹泻病毒N基因遗传变化分析 被引量:1 2019年 为了解猪流行性腹泻病毒(PEDV)N基因的分子流行病学情况,采用RT-PCR方法对2014—2018年采集到的河南、河北、山东、山西、甘肃、湖北、江西以及上海8省市共205份疑似PEDV阳性病料进行PEDV检测,使用RT-PCR方法扩增得到PEDV的N基因片段,回收PCR产物并与pMD20-T载体进行连接,挑选阳性克隆进行测序,分析研究PEDV遗传变异情况。结果显示,205份样品中,有191份样品为PEDV阳性,共得到19株PEDV的N基因序列,N基因全长均为1 326 bp,没有碱基的缺失和插入;将检测到的PEDV的N基因序列与国内外分离株进行比对发现,核苷酸的同源性为94.8%~99.5%,氨基酸的同源性为95.0%~99.3%。进化树分析发现,得到的19株N基因序列与CV777、CH-S等国内外毒株亲缘关系较远;其中,16株与MN、USA-Indiana-2013、USA-Iowa107-2013等近年分离株在一个分支上,为G2a亚群;CH-HENWZ-2015、CH-HENPY-2014、CH-HENZMDPY-2017这3株序列形成另一个分支,为G2b亚群。综上可知,我国PEDV流行广泛,病毒变异频繁。研究结果可为新型疫苗研发以及检测方法的建立奠定基础。 邢广旭 焦文强 刘运超 刘运超 王治方 徐引弟 王克领 张改平关键词:猪流行性腹泻病毒 N基因 分子流行病学 依诺沙星单链抗体核心氨基酸序列及其应用 本发明涉及一种依诺沙星单链抗体的核心氨基酸序列及应用,属于抗菌药物抗原检测领域。本发明借助于分子对接及虚拟筛选技术,在依诺沙星单链抗体晶体结构的基础上,通过分子对接技术,搜寻虚拟多肽库中与靶标蛋白结合模式与亲和力最佳的多... 张改平 王方雨 邢广旭 刘运超 杜加茹 胡曼 邓瑞广文献传递 用RT-PCR技术快速检测猪瘟病毒 本文根据猪瘟病毒(CSFV)端非编码区保守序列设计一对引物,建立了用RT-PCR检测CSFV的方法。应用异硫氰酸胍-酚-仿一步抽提法提取病料细胞总RNA,经RT-PCR扩增,得到与设计片段大小相同的产物(581bp),而... 刘运超 陈玉梅 王爱萍 张改平 鲁琨 李乔木 王秋霞关键词:猪瘟病毒 聚合酶链式反应 猪流行性腹泻病毒部分非结构蛋白真核表达载体的构建与表达 2020年 为了对猪流行性腹泻病毒(PEDV)非结构蛋白进行真核表达载体的构建和表达,进一步研究非结构蛋白与宿主细胞蛋白互作,试验以PEDV-Hubei-2016株为基础,以真核表达质粒pCDNA3.1为载体,根据PEDV非结构蛋白在基因组的位置克隆8个非结构蛋白(NSP1、NSP4、NSP5、NSP6、NSP7、NSP8、NSP9、NSP10)基因,通过在引物添加XhoⅠ和BamHⅠ酶切位点将目的基因连接到pCDNA3.1载体,酶切和测序验证插入序列。将构建正确的载体转染HEK-293细胞,24 h后收取细胞进行Western-blot检测。结果表明:本试验成功扩增了NSP1、NSP4、NSP5、NSP6、NSP7、NSP8、NSP9、NSP10蛋白的基因,连接质粒,酶切、测序验证序列正确。将构建正确的质粒转染HEK-293细胞,24 h后收取细胞,Western-blot检测结果表明,NSP1、NSP4、NSP5、NSP6、NSP7、NSP8、NSP9、NSP10蛋白出现与预期大小一致的条带。说明本试验构建的8个真核表达质粒在HEK-293细胞中成功表达。 焦文强 邢广旭 邢广旭 刘运超 徐引弟 王克领关键词:猪流行性腹泻病毒 非结构蛋白 真核表达 免疫印迹 公猪去势手术操作平台 本发明公开了一种公猪去势手术操作平台,包括底架和操作平台,操作平台包括位于下侧的载板和位于上侧的壳板,两者固定为一体,在载板中部设置有抬升机构,抬升机构两侧区域分别设置有分离控制机构,左右两个平移板的上侧分别设置有固定小... 焦文强 邢广旭 陈直 徐引弟 刘运超 王治方 王克领文献传递 IgA Fc受体研究进展 被引量:3 2012年 IgA Fc受体(FcαRI,CD89)属于免疫受体家族成员,主要表达于单核-巨噬细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和树突状细胞等免疫效应细胞表面。FcαRI能特异的与血清型和分泌型IgA结合,并通过γ链介导一系列免疫反应,包括抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)、补体依赖的细胞毒性(CDC)及细胞吞噬作用等。FcαRI是一种双功能受体,在不同的生理条件下可以介导免疫系统的活化和抑制反应。FcαRI在机体免疫防御和在维持系统免疫平衡方面扮演着重要的角色,有望成为治疗人类疾病的新靶点。本文对FcαRI的结构、功能及其应用等研究现状进行综述。 陈玉梅 张改平 刘运超 邓瑞广 王爱萍关键词:IGA FC受体 ITAM 炎症性疾病