刘通
- 作品数：6 被引量：4H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Apelin促进人诱导性多能干细胞心肌定向分化的研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Apelin对人诱导性多能干细胞(hiPSC)的心肌定向分化作用。方法 hiPSC经悬浮法诱导形成拟胚体,分为Apelin处理组(Apelin组)和对照组。Apelin组在高糖DMEM培养液中加入10μmol/ml Apelin,分别于第3、7、11、15、21天采用RT-PCR、Western blot法检测及免疫荧光染色,观察干细胞全能性标记物Oct4、心肌祖细胞标记物Nkx 2.5、心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达变化。结果 Apelin组iPSC在诱导分化后第3天Oct4和Nanog基因表达水平明显降低,分别为同期对照组的(63.2±10.1)%和(51.7±1.6)%(P<0.01);诱导分化后第7天Nkx 2.5和cTnI基因表达水平明显升高,分别为同期对照组的(162.4±22.5)%和(250.6±22.3)%(P<0.05,P<0.01);诱导分化后第15天时,cTnI表达为同期对照组的(156.2±6.4)%(P<0.05);免疫荧光染色显示,cTnI阳性细胞明显多于对照组。结论 Apelin可明显促进hiPSC的心肌定向分化。
- 马珂刘通黄炜卜庆婷李秀娟赵传旭李霜王亚斌曹丰
- 关键词：多能干细胞肌钙蛋白
- 内源性心脏干/祖细胞活化的研究进展
- 2015年
- 随着现代生活方式的改变和老龄化的问题,心血管疾病已成为威胁人类健康的第一杀手。然而当前医疗诊治技术仍难以彻底改善心肌梗死后缺血性心肌病及心力衰竭患者的预后。干细胞的出现为心肌再生带来了新的希望。与其他成体干细胞相比,内源性心脏干细胞(CSCs)具有分化成心肌细胞和血管内皮细胞的潜能,可对受损心肌起到明显的修复作用。研究发现,心肌梗死后内源性CSCs的激活与多种因素有关。最近几年,内源性CSCs活化介导的心肌修复引起了研究人员极大的兴趣。本文将对CSCs激活所涉及的主要途径进行论述,以深化对内源性CSCs功能的理解。
- 郭涛刘通曹丰
- 关键词：心肌梗死细胞疗法
- 生长分化因子-11促进小鼠诱导性多能干细胞向心肌细胞定向分化的研究被引量：2
- 2016年
- 目的明确生长分化因子(GDF)-11对小鼠诱导多能干细胞(mi PSCs)向心肌细胞定向分化的促进作用,为心肌再生的细胞生物学治疗提供种子细胞和实验依据。方法常规培养小鼠mi PSCs,分为对照组和GDF-11组。GDF-11组在普通分化培养基中加用10 ng/ml的GDF-11。悬滴法诱导培养形成拟胚体(EBs),每日观察搏动拟胚体数目。采用实时荧光定量PCR检测多能干细胞标志物Oct-4、心脏中胚层标志物Flk-1、心脏祖细胞标志物Nkx2.5、和心肌特异性标志物c Tn T的表达变化。用免疫荧光染色观察心肌结构蛋白c Tn I的表达水平。结果GDF-11组的Oct-4表达水平在诱导分化的第3、7天分别为同期对照组的(0.55±0.31)倍(P<0.01)和(0.41±0.57)倍(P<0.05);诱导分化的第10天,GDF-11组的Flk-1和Nkx2.5表达相分别为对照组的(2.09±0.8)倍(P<0.05)和(2.47±0.22)倍(P<0.01);c Tn T的表达在分化后第10天和第14天分别为对照组的(1.81±0.19)倍(P<0.01)和(1.61±0.20)倍(P<0.01);两组均出现了心肌样搏动细胞团,GDF-11组搏动EBs百分比要显著高于对照组(P<0.01)。免疫荧光染色显示,GDF-11组的c Tn I阳性率要显著高于对照组(P<0.01)。结论 GDF-1能够显著促进mi PSCs的心肌定向分化。
- 郭涛刘通陈江炜江振华李秀娟樊苗苗曹丰
- 关键词：诱导多能干细胞小鼠
- 大麻素Ⅱ型受体激动剂促进小鼠心肌梗死后心脏干/祖细胞增殖的作用
- 2014年
- 目的:探讨大麻素Ⅱ型受体(CB2)选择性激动剂AM1241对小鼠心肌梗死(MI)模型中心脏干/祖细胞增殖的作用。方法:40只雄性C57BL/6小鼠通过结扎小鼠心脏左冠状动脉前降支建立MI模型并随机分为4组,每组10只(n=10):①假手术(Sham)组;②MI组;③MI+CB2受体激动剂AM1241(MI+AM1241)组;④MI+CB2受体激动剂AM1241+CB2受体拮抗剂AM630(MI+AM1241+AM630)组。采用小动物超声系统观察小鼠左室射血分数(LVEF)的变化。用免疫荧光染色法观察MI周边区表达干细胞生长因子受体(c-kit)、干细胞抗原1(Sca-1)的阳性细胞数,实时荧光定量PCR测定MI周边区c-kit、Sca-1和多药耐药蛋白P糖蛋白(MDR1)的表达水平。结果:与MI组相比,MI+AM1241组小鼠7 d和14 d心脏LVEF值显著提高(P<0.01)。免疫荧光染色的结果提示,MI+AM1241组c-kit和Sca-1的表达较MI组增多(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,MI+AM1241组c-kit和Sca-1的基因表达水平明显高于MI组(P<0.05)。同时,CB2受体拮抗剂AM630可阻断AM1241的上述作用。结论:CB2受体激活可促进梗死心肌干/祖细胞的增殖,改善心脏的收缩功能。
- 胡文星王亚斌刘通李秀娟马赛梁栋曹丰
- 关键词：心肌梗死祖细胞
- Apelin促进脂肪间充质干细胞增殖、分化修复小鼠下肢缺血损伤的实验研究
- 2012年
- 目的:探讨apelin对于脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)修复小鼠后肢缺血损伤的作用及机制。方法:从β-actin-luc转基因小鼠中分离出表达荧光素酶的AD-MSCs,将20只近交系无报告基因的小鼠随机分为两组,即实验组:后肢注射AD-MSCs+apelin(n=10)和对照组:后肢注射AD-MSCs(n=10)。所有小鼠均结扎股动脉建立后肢缺血模型,股四头肌内注射AD-MSCs(1×106)或AD-MSCs+apelin,激光多普勒成像观察下肢血液灌注,生物发光成像检测细胞的活性。用体外培养的β-actin-luc转基因小鼠AD-MSCs,建立缺氧(6 h)模型。实验分为4组,即对照组、缺氧组、缺氧+apelin干预组及缺氧+apelin+LY294002组。用免疫印迹法检测细胞内激酶磷酸化Akt的表达。结果:在移植后1周内生物发光成像显示,AD-MSCs移植后存在急性死亡,加用apelin组中细胞的存活时间明显延长。离体实验显示,在缺氧环境中apelin干预AD-MSCs后,细胞pAkt的表达明显高于对照组(P<0.05),加入Akt阻断剂LY294002后,细胞磷酸化的水平降低(P<0.05)。结论:apelin对AD-MSCs的后肢缺血治疗具有保护作用,可能在缺血性疾病的治疗中成为重要的干预靶点。
- 梁栋段红莉秦星程康马珂刘通曹丰
- 关键词：APELIN分子影像间充质干细胞缺血
- 心肌营养素-1诱导小鼠诱导性多能干细胞心肌细胞定向分化的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的:观察心肌营养素-1(CT-1)对小鼠诱导性多能干细胞(miPSCs)心肌细胞定向分化的诱导作用。方法:实验分为对照组与CT-1处理组。miPSCs经悬滴法诱导形成拟胚体,第3天培养基中加入1μmol/ml CT-1(CT-1组),对照组采用普通培养基。于第4、7、10和14天,收取细胞样本,采用实时PCR检测心脏特异标志物基因的表达。用免疫荧光染色及流式细胞术检测干细胞标志物Oct4和心肌特异性分化标志物肌钙蛋白I(cTnI)的表达。用透射电镜观察心肌样细胞的超微结构。结果:CT-1组第10天,样本中心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)基因表达的水平为同期对照组的1.75倍,有显著性差异(P<0.05)。免疫荧光染色法检测显示,两组均有cTnI表达。流式细胞术鉴定的结果显示,对照组与CT-1组cTnI的阳性率分别为28.5%和56.4%,有显著性差异(P<0.05)。电镜观察显示,CT-1组肌原纤维及胞内线粒体明显增多,肌纤维排列规则,可见细胞间桥粒连接和缝隙连接。结论:CT-1可显著提高miPSC向心肌细胞定向分化的效率。
- 刘通卜庆婷马珂金岩孙冬冬李秀娟曹丰
- 关键词：心肌营养素-1
