吴广文 作品数:100 被引量:513 H指数:13 供职机构: 福建中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 陈可冀中西医结合发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 自动化与计算机技术 生物学 农业科学 更多>>
BMSCs体外分离培养的实验研究 被引量:3 2008年 目的探索一种正确的BMSCs抽取﹑分离和体外培养方法,建立BMSCs体外培养体系。方法倒置相差显微镜观察BMSCs细胞生长情况及形态变化特点。结果培养的BMSCs呈多种形态,有粗细不均的胞质突起,并且呈集落样生长。二代细胞形态更加单一,呈均匀生长,细胞因相互接触而产生接触抑制。大白鼠BMSCs经体外培养后生长活跃,具有良好的形态特征及生长特点。结论全骨髓贴壁培养法是分离BMSCs的一种比较理想的方法。 吴追乐 李民 刘献祥 李明波 吴广文 林久茂关键词:BMSCS 体外分离培养 软骨组织工程 挂件(清·脉小冲) 1.本外观设计产品的名称:挂件(清·脉小冲)。;2.本外观设计产品的用途:装饰品。;3.本外观设计产品的设计要点:在于形状与图案的结合。;4.最能表明设计要点的图片或照片:主视图。;5.本外观设计产品为薄型产品,省略左视... 吴广文 黄佳瑜 蔡艺伟 林佳敏 罗清清 吴钺 陈俊疏密波最佳波段组合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化 被引量:7 2009年 背景:已证实疏密波对病变组织有兴奋作用,能够促进病变组织的新陈代谢,课题组前期研究发现其对骨性关节炎具有良好的治疗作用。目的:探讨疏密波诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的最佳波段组合,并从分子生物学水平阐明疏密波调控骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的机制。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-10/2008-03在福建中医学院中西医结合研究院完成。材料:清洁级健康4周龄SD大鼠45只,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。疏密波发射仪由福州大学生物医学仪器研究所提供。根据同一周期疏密波比例的不同,分为以下3种工作模式:模式Ⅰ为疏波∶密波=1∶1,模式Ⅱ为疏波∶密波=2∶1,模式Ⅲ为疏波∶密波=1∶2。方法:抽取大鼠骨髓液,用全骨髓贴壁培养法体外分离纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞。取传至第3代细胞,接种后加入含体积分数为0.15胎牛血清的DMEM培养液,根据仪器工作模式的不同分为:疏密波1∶1组、疏密波2∶1组、疏密波1∶2组、空白对照组。各诱导组按干预时间的不同又分为2个亚组:诱导30min和诱导60min,每天诱导1次,共14d。主要观察指标:RT-PCR半定量分析Cbfa1mRNA及Sox9mRNA的表达,甲苯胺蓝染色检测糖胺聚糖的表达,免疫组化染色检测Ⅱ型胶原基质的表达。结果:体外培养14d可获得均质性较好的骨髓间充质干细胞,传至第3代CD45阳性率为1.91%,CD90阳性率为98.22%。诱导14d后,各疏密波诱导组Cbfa1mRNA,Sox9mRNA均呈阳性表达,而空白对照组未表达。甲苯胺蓝染色可见诱导后细胞胞质和细胞外基质异染,空白对照组无明显异染;免疫组化染色可见各诱导组多数细胞的胞浆呈棕黄色阳性表达,且疏密波1∶2组Ⅱ型胶原的表达优于疏密波2∶1组,疏密波2∶1组优于疏密波1∶1组,空白对照组细胞为阴性表达。结论:疏密波能诱导大鼠骨髓间充 吴广文 刘伯龄 刘献祥 陈文列 黄云梅关键词:骨髓间充质干细胞 疏密波 软骨细胞 陈修园论治骨痹的学术思想及用药规律研究 2025年 目的探讨陈修园论治骨痹的学术思想及用药规律。方法研读陈修园主编的《南雅堂医书全集》,从中筛选出骨痹治疗方,随后利用Microsoft Excel软件建立骨痹治疗方中所使用药物的数据库,统计并分析每味中药出现的频次,并统计每味中药按照其主治功效、性味和归经进行分类后累积出现的频次;利用中医传承辅助平台软件(V3.0)Kmeans算法,在所建立的数据库中,对该类疾病相关的药物使用频次进行关联分析。目的是分析并挖掘骨痹治疗方中常见组方的规律,后采用聚类分析法演化出骨痹治疗的核心组方,结合专业知识创建新组方。结果在《南雅堂医书全集》治疗骨痹的40首方剂中,药物出现频次排名前10位的中药依次是当归、川芎、牛膝、甘草、白术、茯苓、附子、白芍、独活和防风;另将使用频次≥10的中药按照其主治功效进行统计排序,发现出现频次排名前5位的中药类别依次为补虚类、活血化瘀类、温里类、利水渗湿和祛风湿类;药性多以温、平为主;药味以甘、辛、苦多见;归经以脾、肝、肾经为主;总结以上用药特点,挖掘出3个核心组方、1个新组方。结论陈修园治疗骨痹以健脾胃、养气血为主,兼以补肾益髓、活血祛瘀、祛湿化痰、祛风散寒。多用性温,味甘、辛、苦,入脾、肝、肾经的中药,其功效多以补虚类、活血化瘀类和温里类为主,基于数据分析的核心组方和新组方的出现可以为临床治疗骨痹提供用药参考。 李璐 戴雨婷 陈俊 吴广文关键词:骨痹 骨关节炎 陈修园 用药规律 细胞焦亡与关节炎的研究进展 被引量:3 2018年 细胞焦亡是一种新近发现并已证实的伴随炎症反应的程序性细胞死亡方式,其经典炎症小体途径由半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)介导,而caspase-1存在于大部分关节炎的滑膜组织中。越来越多的研究发现,细胞焦亡相关信号通路在关节炎的发展过程中扮演着重要的角色,因而细胞焦亡可能会为治疗关节炎提供全新的药物靶点。本文就细胞焦亡的特征和分子机制及与细胞焦亡相关的关节炎(骨关节炎、类风湿关节炎、强直性脊柱炎、痛风性关节炎)的研究进展进行了综述,以期为关节炎的治疗提供理论参考。 林晴 林炜 付长龙 王文义 吴广文 郑春松 叶锦霞关键词:骨关节炎 新定膝痛方急性毒性试验研究 2024年 观察新定膝痛方对灌胃后昆明小鼠是否产生急性毒性反应,为新定膝痛方的临床应用提供安全评价资料。方法 (1)将40只SPF级昆明小鼠,雌雄各半,体重(202)g,随机分为空白组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组各10只;空白组给予10mL/(kg·d)剂量的0.9%氯化钠溶液灌胃,低、中、高剂量组分别以44.8g/(kg·d)、89.6g/(kg·d)、134.4g/(kg·d)剂量的新定膝痛方灌胃。观察小鼠是否出现毒性反应、体重变化以及小鼠的死亡情况。 (2)将20只6周龄SPF级昆明小鼠,雌雄各半,分为空白组和给药组,每组各10只;空白组给予10mL/(kg·d)剂量的0.9%氯化钠溶液灌胃,给药组给予134.4g/(kg·d)剂量的新定膝痛方灌胃。观察小鼠是否出现毒性反应、体重变化以及小鼠的死亡情况,检测空白组与给药组的血生化指标水平并观察组织化学形态的改变。结果 (1)小鼠灌胃后均未见任何毒性反应,无动物死亡,未测出半数致死量,小鼠的最大给药量为134.4g/(kg·d),相当于临床成人推荐日剂量的175倍。(2)小鼠灌胃后均未产生任何毒性反应,无动物死亡,与空白组相比,给药组的血生化指标及各脏器组织化学形态无明显病理学改变。结论 新定膝痛方未见急性毒性作用,该组方安全可靠,可用于临床应用。 董淇 戴雨婷 陈俊 吴钺 吴广文关键词:小鼠 急性毒性 独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠软骨形态的影响 被引量:8 2018年 目的:观察独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠软骨形态的影响,探讨其治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:2月龄雄性SD大鼠80只,适应性喂养1周,随机分为空白对照组(20只)和造模组(60只)。造模组在第1,4,7天双膝关节腔注射0.2 mL质量分数为4%的木瓜蛋白酶。术后2周,拍摄膝关节小动物核磁共振成像(MRI)进行鉴定。造模成功后,随机分为模型对照组、独活寄生汤组和盐酸氨基葡萄糖胶囊组(阳性对照组),每组20只。HE染色和番红-固绿染色后,采用Mankin软骨组织学评分法进行评分。结果:MRI显示,空白对照组关节间隙正常,关节面平整、光滑;与空白对照组比较,模型对照组关节软骨变薄、局部有充盈性缺损,关节腔内积液明显增加。HE染色和番红-固绿染色结果表明,盐酸氨基葡萄糖胶囊与独活寄生汤都可以有效促进膝骨关节炎软骨修复,抑制软骨细胞凋亡,降低Mankin评分,但2组间差异无统计学意义(P> 0.05),组内8周时优于4周(P <0.05)。结论:独活寄生汤能促进软骨生长与修复,保护膝骨关节炎模型大鼠膝关节的软骨形态,延缓软骨退变,从而起到治疗膝骨关节炎的作用。 陈俊 吴广文 黄云梅 李钻芳 林洁 赵忠胜 黄艳峰 李西海 刘献祥关键词:独活寄生汤 软骨 红景天治疗慢性稳定性心绞痛随机对照试验的系统评价 被引量:13 2014年 目的系统评价红景天治疗慢性稳定性心绞痛的疗效及安全性。方法网络检索Cochrane图书馆、PubMed、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普数据库(VIP)、中文期刊全文数据库(CNKI)数据库截止2013年4月已发表的中、英文临床研究文献。纳入红景天或联合西药与西药常规比较治疗慢性稳定性心绞痛的随机对照试验,按照数据提取表提取数据,采用Cochrane手册临床试验质量评价标准评价文献质量,应用Rev Man 5.2软件对资料进行荟萃分析。结局的效应指标以比值比(OR)及其95%可信区间(CI)表示。结果 7篇随机对照试验共662例慢性稳定性心绞痛患者符合纳入标准,全部为中文文献,无1篇设计科学,评价质量高的文献。与单纯西药常规治疗比较,联用口服红景天对心绞痛的症状临床疗效有效率优于常规治疗(OR=2.49,95%CI:1.02~6.09),加用静脉滴注红景天其症状疗效亦优于常规治疗(OR=4.86,95%CI:2.4~9.82);口服红景天不能提高心电图疗效[OR=1.25,95%CI:0.67~2.34),静脉用药则可提高临床疗效(OR=2.94,95%CI:1.61~5.35)。在常规治疗的基础上,静脉加用红景天可改善患者高低切变率全血黏度,逆方差(IV)分别为-1.36、-0.99,95%CI分别为-1.65^-1.07、-1.26^-0.71,而不能降低患者纤维蛋白原和D-二聚体水平;单纯常规治疗不良反应发生率高于加用红景天组(OR=0.1,95%CI:0.02~0.51)。结论在常规治疗基础上,红景天可进一步改善患者的心绞痛症状,加用静脉用药可以提高心电图改善率,降低不良反应。但由于纳入研究的方法学质量较低、样本数目偏少,干预周期偏短等因素影响,该结论需要设计科学合理,样本数更大,且实施严格的多中心临床试验加以验证。 褚剑锋 吴广文 郑国华 郑峰 许剑锋 彭军 洪振丰关键词:红景天 冠心病 心绞痛 随机对照试验 荣筋祛痹方及其制备方法和用途 本发明提供了荣筋祛痹方及其制备方法和用途,本发明荣筋祛痹方是一种祛风散寒除湿、活血化瘀止痛的组合物,由如下重量份数的原料药制成:羌活5~15份、独活5~15份、白芷5~15份、防风5~15份、川乌5~10份、川芎13~1... 陈俊 吴广文 张婷膝关节炎治疗仪对SNP诱导体外大鼠软骨细胞凋亡的影响 2017年 目的:观察膝关节炎治疗仪对硝普钠(SNP)诱导体外大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法:采用膝关节炎治疗仪不同刺激强度干预1 m M SNP诱导第2代大鼠软骨细胞的凋亡模型,镜下观察软骨细胞形态,用噻唑蓝(MTT)法检测软骨细胞的活力,倒置荧光显微镜观察细胞核形态及密度变化。结果:倒置相差显微镜下观察膝关节炎治疗仪能减少细胞凋亡,MTT发现4级干预强度抑制细胞凋亡效果最佳,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察其能有效减轻软骨细胞核固缩。结论:膝关节炎治疗仪可能通过抑制软骨细胞凋亡从而达到防治骨关节炎的作用,但其具体抗凋亡途径有待进一步揭示。 林洁 付长龙 叶锦霞 陈俊 吴广文关键词:骨关节炎 软骨细胞 凋亡