吴广文 作品数:95 被引量:503 H指数:13 供职机构: 福建中医药大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 陈可冀中西医结合发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 化学工程 更多>>
BMSCs体外分离培养的实验研究 被引量:3 2008年 目的探索一种正确的BMSCs抽取﹑分离和体外培养方法,建立BMSCs体外培养体系。方法倒置相差显微镜观察BMSCs细胞生长情况及形态变化特点。结果培养的BMSCs呈多种形态,有粗细不均的胞质突起,并且呈集落样生长。二代细胞形态更加单一,呈均匀生长,细胞因相互接触而产生接触抑制。大白鼠BMSCs经体外培养后生长活跃,具有良好的形态特征及生长特点。结论全骨髓贴壁培养法是分离BMSCs的一种比较理想的方法。 吴追乐 李民 刘献祥 李明波 吴广文 林久茂关键词:BMSCS 体外分离培养 软骨组织工程 挂件(清·脉小冲) 1.本外观设计产品的名称:挂件(清·脉小冲)。;2.本外观设计产品的用途:装饰品。;3.本外观设计产品的设计要点:在于形状与图案的结合。;4.最能表明设计要点的图片或照片:主视图。;5.本外观设计产品为薄型产品,省略左视... 吴广文 黄佳瑜 蔡艺伟 林佳敏 罗清清 吴钺 陈俊疏密波最佳波段组合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化 被引量:7 2009年 背景:已证实疏密波对病变组织有兴奋作用,能够促进病变组织的新陈代谢,课题组前期研究发现其对骨性关节炎具有良好的治疗作用。目的:探讨疏密波诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的最佳波段组合,并从分子生物学水平阐明疏密波调控骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的机制。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-10/2008-03在福建中医学院中西医结合研究院完成。材料:清洁级健康4周龄SD大鼠45只,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。疏密波发射仪由福州大学生物医学仪器研究所提供。根据同一周期疏密波比例的不同,分为以下3种工作模式:模式Ⅰ为疏波∶密波=1∶1,模式Ⅱ为疏波∶密波=2∶1,模式Ⅲ为疏波∶密波=1∶2。方法:抽取大鼠骨髓液,用全骨髓贴壁培养法体外分离纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞。取传至第3代细胞,接种后加入含体积分数为0.15胎牛血清的DMEM培养液,根据仪器工作模式的不同分为:疏密波1∶1组、疏密波2∶1组、疏密波1∶2组、空白对照组。各诱导组按干预时间的不同又分为2个亚组:诱导30min和诱导60min,每天诱导1次,共14d。主要观察指标:RT-PCR半定量分析Cbfa1mRNA及Sox9mRNA的表达,甲苯胺蓝染色检测糖胺聚糖的表达,免疫组化染色检测Ⅱ型胶原基质的表达。结果:体外培养14d可获得均质性较好的骨髓间充质干细胞,传至第3代CD45阳性率为1.91%,CD90阳性率为98.22%。诱导14d后,各疏密波诱导组Cbfa1mRNA,Sox9mRNA均呈阳性表达,而空白对照组未表达。甲苯胺蓝染色可见诱导后细胞胞质和细胞外基质异染,空白对照组无明显异染;免疫组化染色可见各诱导组多数细胞的胞浆呈棕黄色阳性表达,且疏密波1∶2组Ⅱ型胶原的表达优于疏密波2∶1组,疏密波2∶1组优于疏密波1∶1组,空白对照组细胞为阴性表达。结论:疏密波能诱导大鼠骨髓间充 吴广文 刘伯龄 刘献祥 陈文列 黄云梅关键词:骨髓间充质干细胞 疏密波 软骨细胞 独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠软骨形态的影响 被引量:8 2018年 目的:观察独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠软骨形态的影响,探讨其治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:2月龄雄性SD大鼠80只,适应性喂养1周,随机分为空白对照组(20只)和造模组(60只)。造模组在第1,4,7天双膝关节腔注射0.2 mL质量分数为4%的木瓜蛋白酶。术后2周,拍摄膝关节小动物核磁共振成像(MRI)进行鉴定。造模成功后,随机分为模型对照组、独活寄生汤组和盐酸氨基葡萄糖胶囊组(阳性对照组),每组20只。HE染色和番红-固绿染色后,采用Mankin软骨组织学评分法进行评分。结果:MRI显示,空白对照组关节间隙正常,关节面平整、光滑;与空白对照组比较,模型对照组关节软骨变薄、局部有充盈性缺损,关节腔内积液明显增加。HE染色和番红-固绿染色结果表明,盐酸氨基葡萄糖胶囊与独活寄生汤都可以有效促进膝骨关节炎软骨修复,抑制软骨细胞凋亡,降低Mankin评分,但2组间差异无统计学意义(P> 0.05),组内8周时优于4周(P <0.05)。结论:独活寄生汤能促进软骨生长与修复,保护膝骨关节炎模型大鼠膝关节的软骨形态,延缓软骨退变,从而起到治疗膝骨关节炎的作用。 陈俊 吴广文 黄云梅 李钻芳 林洁 赵忠胜 黄艳峰 李西海 刘献祥关键词:独活寄生汤 软骨 红景天治疗慢性稳定性心绞痛随机对照试验的系统评价 被引量:13 2014年 目的系统评价红景天治疗慢性稳定性心绞痛的疗效及安全性。方法网络检索Cochrane图书馆、PubMed、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普数据库(VIP)、中文期刊全文数据库(CNKI)数据库截止2013年4月已发表的中、英文临床研究文献。纳入红景天或联合西药与西药常规比较治疗慢性稳定性心绞痛的随机对照试验,按照数据提取表提取数据,采用Cochrane手册临床试验质量评价标准评价文献质量,应用Rev Man 5.2软件对资料进行荟萃分析。结局的效应指标以比值比(OR)及其95%可信区间(CI)表示。结果 7篇随机对照试验共662例慢性稳定性心绞痛患者符合纳入标准,全部为中文文献,无1篇设计科学,评价质量高的文献。与单纯西药常规治疗比较,联用口服红景天对心绞痛的症状临床疗效有效率优于常规治疗(OR=2.49,95%CI:1.02~6.09),加用静脉滴注红景天其症状疗效亦优于常规治疗(OR=4.86,95%CI:2.4~9.82);口服红景天不能提高心电图疗效[OR=1.25,95%CI:0.67~2.34),静脉用药则可提高临床疗效(OR=2.94,95%CI:1.61~5.35)。在常规治疗的基础上,静脉加用红景天可改善患者高低切变率全血黏度,逆方差(IV)分别为-1.36、-0.99,95%CI分别为-1.65^-1.07、-1.26^-0.71,而不能降低患者纤维蛋白原和D-二聚体水平;单纯常规治疗不良反应发生率高于加用红景天组(OR=0.1,95%CI:0.02~0.51)。结论在常规治疗基础上,红景天可进一步改善患者的心绞痛症状,加用静脉用药可以提高心电图改善率,降低不良反应。但由于纳入研究的方法学质量较低、样本数目偏少,干预周期偏短等因素影响,该结论需要设计科学合理,样本数更大,且实施严格的多中心临床试验加以验证。 褚剑锋 吴广文 郑国华 郑峰 许剑锋 彭军 洪振丰关键词:红景天 冠心病 心绞痛 随机对照试验 荣筋祛痹方及其制备方法和用途 本发明提供了荣筋祛痹方及其制备方法和用途,本发明荣筋祛痹方是一种祛风散寒除湿、活血化瘀止痛的组合物,由如下重量份数的原料药制成:羌活5~15份、独活5~15份、白芷5~15份、防风5~15份、川乌5~10份、川芎13~1... 陈俊 吴广文 张婷膝关节炎治疗仪对SNP诱导体外大鼠软骨细胞凋亡的影响 2017年 目的:观察膝关节炎治疗仪对硝普钠(SNP)诱导体外大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法:采用膝关节炎治疗仪不同刺激强度干预1 m M SNP诱导第2代大鼠软骨细胞的凋亡模型,镜下观察软骨细胞形态,用噻唑蓝(MTT)法检测软骨细胞的活力,倒置荧光显微镜观察细胞核形态及密度变化。结果:倒置相差显微镜下观察膝关节炎治疗仪能减少细胞凋亡,MTT发现4级干预强度抑制细胞凋亡效果最佳,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察其能有效减轻软骨细胞核固缩。结论:膝关节炎治疗仪可能通过抑制软骨细胞凋亡从而达到防治骨关节炎的作用,但其具体抗凋亡途径有待进一步揭示。 林洁 付长龙 叶锦霞 陈俊 吴广文关键词:骨关节炎 软骨细胞 凋亡 透骨消痛颗粒含药血清诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞分化 被引量:6 2013年 背景:骨髓基质干细胞根据环境而有不同的分化路径,在特定的环境中有分化为透明软骨细胞的趋势,可能为治疗骨性关节炎提供新思路。目的:观察透骨消痛颗粒含药血清对骨髓基质干细胞向软骨分化的影响。方法:取SD大鼠四肢建立体外培养的骨髓基质干细胞,取第3代骨髓基质干细胞进行干预,分为生理盐水血清组、透骨消痛颗粒水提物血清组、透骨消痛颗粒醇提物血清组、诱导软骨剂组、透骨消痛颗粒水提物血清+诱导软骨剂组、透骨消痛颗粒醇提物血清+诱导软骨剂组。Real time PCR及Western Blot检测Sox9、collagenⅡ、collagenⅩ mRNA及蛋白表达。结果与结论:含药血清干预14d后,Sox9、collagenⅡ、collagenⅩ mRNA及蛋白表达水平,透骨消痛颗粒水提物血清组、透骨消痛颗粒醇提物血清组、诱导软骨组、透骨消痛颗粒水提物血清+诱导软骨剂组、透骨消痛颗粒醇提物血清+诱导软骨剂组明显高于生理盐水血清组(P<0.05,P<0.01),诱导软骨组、透骨消痛颗粒水提物血清+诱导软骨剂组、透骨消痛颗粒醇提物血清+诱导软骨剂组明显高于透骨消痛颗粒水提物血清组、透骨消痛颗粒醇提物血清组(P<0.01),其中Sox9表达透骨消痛颗粒水提物血清+诱导软骨剂组高于诱导软骨。说明透骨消痛颗粒含药血清通过上调Sox9的表达,加速骨髓基质干细胞细胞向软骨细胞分化。 刘伯龄 李西海 肖丽春 梁珪清 吴广文 李照辉 陈其勇关键词:干细胞 透骨消痛颗粒 软骨分化 补肾活血 软骨细胞 透骨消痛胶囊对KOA大鼠关节软骨uPA系统相关调节因子的影响 被引量:8 2015年 目的观察透骨消痛胶囊对膝骨性关节炎(KOA)大鼠软骨中尿激酶型纤溶酶原激活剂(u PA)系统相关调节因子基质金属蛋白酶3(MMP-3)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨透骨消痛胶囊治疗骨性关节炎的作用机制。方法清洁级SD大鼠144只,分为空白组(24只)与造模组(120只)。造模组采用关节腔注射4%木瓜蛋白酶复制KOA模型,造模成功后随机分为模型组、壮骨关节丸组和透骨消痛胶囊低、中、高剂量组,空白组与模型组分别给予相应剂量的生理盐水灌胃,壮骨关节丸组和透骨消痛胶囊低、中、高剂量组分别给予相应药物灌胃。免疫组化反应观察MMP-3、IL-1β和TNF-α阳性表达;Western blot检测MMP-3、IL-1β和TNF-α蛋白表达情况。结果免疫组化反应显示,透骨消痛胶囊组和壮骨关节丸组MMP-3、IL-1β和TNF-α阳性率均明显降低,透骨消痛胶囊中剂量组和壮骨关节丸组两组间比较无显著性差异;Western blot检测结果与免疫组化具有相同的趋势。结论透骨消痛胶囊治疗KOA的部分作用机制是有效抑制u PA系统相关调节因子MMP-3、IL-1β和TNF-α的表达。 吴广文 叶锦霞 许惠凤 郑春松 叶蕻芝关键词:透骨消痛胶囊 膝骨性关节炎 软骨组织 早期膝骨性关节炎NO炎症途径及中药干预的实验研究 被引量:5 2010年 目的:探讨NO炎症途径在早期膝关节骨性关节炎中的作用及透骨消痛颗粒对膝骨性关节炎早期NO炎症途径的影响。方法:用改良的Hulth法建立骨关节炎动物模型,随机分为6组,模型组、对照组(壮骨关节丸组)、实验Ⅰ组(透骨消痛颗粒低剂量组)、实验Ⅱ组(透骨消痛颗粒中剂量组)、实验Ⅲ组(透骨消痛颗粒高剂量组)及正常组,4周后行关节腔大体观察、关节软骨和滑模组织学观察、关节滑液NO、NOS活性检测、软骨和滑膜组织中iNOS含量测定。结果:骨性关节炎关节局部表达NO。透骨消痛颗粒具有延缓关节大体形态,透骨消痛颗粒可降低关节液NO、NOS含量,降低关节软骨及滑模iNOS的表达。其中透骨消痛颗粒中剂量组及高剂量组作用更明显,但两者之间比较差异无统计学意义。结论:关节局部NO是引起膝骨性关节炎的重要介质;透骨消痛颗粒可抑制NO炎症途径,缓解软骨细胞的退变和软骨基质的降解,有效改善膝骨性关节炎患者的临床症状。 刘伯龄 高雪伟 梁圭清 刘献祥 吴广文 李西海关键词:透骨消痛颗粒 骨性关节炎