姜光域
- 作品数：12 被引量：16H指数：3
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- 一株海洋微生物产蛋白酶抗肿瘤活性的初步探讨
- 2010年
- 研究寄生于沙蚕消化道的嗜麦芽寡养单胞菌D2株外泌胞外蛋白酶(D2蛋白酶)的抗肿瘤活性。选用鼠乳癌细胞EMT6作为靶细胞,经0.2～2000mg/L的D2蛋白酶作用不同时间,采用MTT法对体外培养靶细胞进行细胞增殖抑制率检测,并与阳性对照组(紫杉醇组)和正常细胞对照组(人胚肺细胞组)比较。MTT检测结果显示,D2蛋白酶对鼠乳癌细胞EMT6增殖有抑制作用,且呈现浓度及时间效应关系。检测结果证明D2蛋白酶具有一定的抗肿瘤活性。
- 姜光域王斌闫志勇宋旭霞
- 关键词：海洋微生物抗肿瘤蛋白酶
- 人巨细胞病毒感染及其IE86蛋白对ARPE-19细胞周期的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染ARPE-19细胞后对其细胞周期的影响,观察这种变化与HCMVIE2基因的关系,探讨HCMV感染的发病机制。方法用HCMV感染同步化的ARPE-19作为感染组,同时设模拟感染组为对照组。于感染后第1、2、3、4、5天收获细胞,RT-PCR方法检测HCMV IE mRNA的表达水平,用免疫荧光法检测细胞核内HCMV IE蛋白的表达,Western blot法检测HCMV早期蛋白IE和晚期蛋白pp65的表达。采用PCR方法从质粒pIEP86AD169扩增出IE2片段,构建真核表达质粒pEGFP-N3-IE2,脂质体介导瞬时转染ARPE-19细胞,RT-PCR、免疫荧光法分析IE2基因的表达。流式细胞术检测细胞周期的变化。结果 HCMV IE72、IE86和pp65可分别在病毒感染ARPE-19细胞后第2、3和5天时检测到表达,流式细胞术示感染组在感染第3、4、5天细胞周期的S期细胞比例显著增高,与对照组比较差异均有显著性统计学意义,P(0.05。瞬时转染质粒pEGFP-N3-IE2后细胞周期表现为S期细胞比例显著增高。结论 ARPE-19是HCMV的允许细胞,HCMV可引起ARPE-19细胞周期的改变,这种变化与IE2基因的表达有一定的关系。
- 刘海燕王斌李玲白志强姜光域王海涛钱冬萌赵巍闫志勇丁守怡宋旭霞
- 关键词：人巨细胞病毒ARPE-19细胞周期
- 双黄连口服液体外抗单纯疱疹病毒1型的初步探讨被引量：1
- 2010年
- 目的探讨双黄连口服液体外抗单纯疱疹病毒1型（HSV-1）的作用．方法选用非洲绿猴肾细胞VERO作为体外培养靶细胞，建立HSV-1感染，用不同剂量的双黄连口服液处理HSV-1感染细胞，以50％组织细胞感染量（TCDI50），细胞病变效应（CPE）为评测指标；采用MTT法，RT—PCR及流式细胞技术作为检测手段并比较药物处理组与HSV-1感染组细胞闻病毒表达的差异．结果浓度为标准剂量10％的口服液可明显抑制HSV-1gD基因mRNA的转录，选择性抑制HSV-1DNA的合成；在标准药物剂量0．1％-10％范围内病毒感染组细胞与实验组细胞问凋亡呈现差异性．结论双黄连口服液对体外感染的HSV-1型病毒存在抑制作用，显示出一定的抗病毒活性．
- 姜光域王斌宋旭霞
- 关键词：双黄连口服液抗病毒
- 双齿围沙蚕消化道D2菌株胞外蛋白酶的制备及其抗肿瘤活性的初步探讨
- 背景海洋药物是指以海洋生物及矿产资源为药源。运用现代方法和技术制得的有效药物,包括海洋植物药、海洋动物药和海洋矿物。在过去的几十年里,人们发现了12 000多种海洋天然产物,其中有重要生物活性并已申请专利的新化合物有20...
- 姜光域钱冬萌宋旭霞闰志勇王斌
- 人巨细胞病毒感染对人神经干细胞定向星形胶质细胞分化过程中Notch相关信号分子表达的影响被引量：6
- 2010年
- 目的人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）感染可抑制神经干细胞（neural stem cell,NSC）的增殖和分化,Notch信号对NSC的增殖和分化具有重要的调控功能。文中研究HCMV感染对人NSC向星形胶质细胞分化过程中Notch信号相关分子Notch1~3、Jagged（JAG）1、delta-like（DLL）1及早老素（presenilin,PS）1表达的影响。方法体外分离培养海马NSC,并诱导其向星形胶质细胞分化。同时以感染复数（multiplicity of infection,MOI）为5的HCMV AD169株感染NSC,分别在感染后0、1、3、5、7 d收获细胞,用实时RT-PCR法检测细胞内Notch1-3及其受体JAG1、DLL1的转录水平,Westernblot法检测Notch1细胞内段（Notch 1 intracellular domain,NICD）含量的变化。结果未分化状态的NSC含有大量Notch1NICD,Notch1-3、JAG1、DLL1mRNA呈高表达。诱导分化1d后,Notch各受体、配体mRNA表达均显著下降,3 d后表达回升,至第7天显著升高且可检出大量激活的NICD。HCMV感染组细胞在诱导分化1 d后Notch相关受体、配体mRNA水平亦明显下降,与对照组相比Notch1、Notch2和DLL1的表达更少。在以后各个时间点Notch相关受体、配体mRNA水平均低于对照组。PS1的表达仅在1 d时低于对照组。病毒感染7 d后,细胞内NICD含量明显低于对照组。结论HCMV感染可抑制Notch相关受体、配体的表达与活化,Notch信号异常表达参与HCMV感染所致NSC分化和增殖异常。
- 李玲白志强李鹏刘志军王海涛刘海燕姜光域宋旭霞钱冬萌闫志勇丁守怡王斌
- 关键词：神经干细胞人巨细胞病毒
- HCMV感染诱导定向分化的海马NSCs分泌神经生长因子前体蛋白及其受体p75NTR
- 目的研究HCMV感染对神经干细胞向星形胶质细胞分化过程中神经营养因子(NGF)及其受体p75~(NTR)、trkA表达的影响,为阐明HCMV感染致NSCs损伤的分子机制提供理论依据。材料和方法体外分离并用含hEGF和hb...
- 李玲丁守怡王斌白志强李鹏王海涛刘海燕姜光域宋旭霞钱冬萌闰志勇
- 人巨细胞病毒诱导分化中的神经干细胞分泌神经生长因子前体被引量：4
- 2010年
- 目的研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对人神经干细胞(neural stem cells,NSC)向星形胶质细胞分化过程中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及其受体p75NTR、trkA表达的影响,为阐明HCMV感染致NSC损伤的分子机制提供理论依据。方法体外培养人海马NSC,感染组以感染复数(multiplicity of infectin,MOI)为5的HCMVAD169株感染NSC,对照组只加入与病毒悬液等体积的培养液,在感染病毒的同时,诱导感染组和对照组NSC向星形胶质细胞分化,分别在感染后0、1、3、5、7、9 d收获细胞,用RT-PCR、免疫荧光和Western blot方法检测细胞内NGF及其受体p75NTR、trkA的转录水平和蛋白表达水平。结果对照组NSC不表达NGF及其受体P75NTR和trkA。感染组细胞在第3天开始出现NGFmRNA的表达,第5天出现P75NTRmRNA的表达,且其表达强度随时间增强;第5天出现相对分子质量为40000和100000NGF前体蛋白(ProNGF)和P75NTR蛋白,随时间延长,表达强度升高。免疫荧光检测显示,NGF前体蛋白位于细胞的细胞质;整个感染过程中未检测到trkA的表达。结论 HCMV感染可诱导向星形胶质细胞分化的海马NSC分泌NGF前体蛋白及其受体p75NTR。
- 李玲王斌白志强李鹏王海涛刘海燕姜光域宋旭霞钱冬萌闫志勇丁守怡
- 关键词：人巨细胞病毒神经生长因子P75NTR
- 萤火虫和海肾萤光酶在植物分子生物学中的应用被引量：1
- 2008年
- 在植物分子生物学中,编码生物发光蛋白的基因作为报告基因广泛用于检测基因表达.萤火虫萤光酶和海肾萤光酶都具有定量分析方法上的优势,基于此人们开发了双萤光酶报告基因体系.本文就萤火虫和海肾萤光酶的特点及其在植物分子生物学中的应用作一概述.
- 丁丽丽姜光域刘箭
- HSV-1感染对神经胶质瘤细胞神经生长因子及其受体表达的影响被引量：1
- 2010年
- 神经生长因子(NGF)主要由神经胶质细胞产生,通过特异的靶细胞表面的神经生长因子受体介导产生生物学效应,与神经细胞的生长发育、分化和凋亡等密切相关。单纯疱疹病毒1型(HSV-1)作为一种嗜神经病毒,易造成神经细胞、神经胶质细胞凋亡或死亡。本实验以U251人神经胶质瘤细胞为研究对象,观察HSV-1感染致U251细胞凋亡的过程中NGF及其受体的变化情况。结果发现U251细胞是HSV-1的容许细胞;HSV-1感染致U251细胞凋亡过程中,NGF及其低亲和力受体p75NTR出现表达强度随时间先增强后减弱的趋势,而高亲和受体Tr-kA持续低表达。推测HSV-1感染致神经细胞凋亡中可能调控了神经营养因子的表达。
- 侯云李玲胡明姜光域王倩钱冬萌闫志勇赵巍宋旭霞王斌
- 关键词：单纯疱疹病毒1型神经胶质瘤细胞神经生长因子神经生长因子受体
- 嗜麦芽寡养单胞菌D2外泌蛋白酶抗肿瘤活性初步探讨被引量：3
- 2011年
- 目的研究沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶(D2蛋白酶)的抗肿瘤活性。方法选用鼠乳癌细胞EMT6作为靶细胞,经不同浓度的D2蛋白酶作用不同时间,采用MTT法对体外培养靶细胞进行细胞增殖抑制率检测,并与阳性对照组(紫杉醇组)和正常细胞对照组(人胚肺细胞组)比较。结果 D2蛋白酶对鼠乳癌细胞EMT6增殖有抑制作用,且呈现浓度及时间效应关系。结论 D2蛋白酶具有一定的抗肿瘤活性。
- 姜光域李玲闫志勇钱冬萌赵巍王斌
- 关键词：肽水解酶类
