孙可芳 作品数:41 被引量:35 H指数:3 供职机构: 武汉生物制品研究所 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家科技攻关计划 “九五”国家科技攻关计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
武汉(Wu)系列抗入T细胞及其亚群单抗 被引量:1 1989年 本文报告了Wu系列抗人T及其亚群单抗按国际第三次人白细胞分化抗原专题讨论会要求进行检定的结果。这是国内第一套较全的OKT样系列单抗,即WuT1(OKT1,CD5);WuT3(OKT3,CD3);WuT4(OKT4,CD4);WuT6(OKT6,CD1a):WuT8(OKT8,CD8);WuT9(OKT9,抗转铁蛋白受体,抗TfR);WuT10(OKT10,CD38);WuT11(OKT11,CD2)及Wu-Tac(Tac,CD25)。 史良如 陈善华 王中德 谭向阳 欧阳斌 徐辉 吴晓波 封江南 王志友 孙可芳 赵亚杰关键词:单抗 亚群 T细胞 人白细胞分化抗原 人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体的表达和鉴定 被引量:4 2005年 目的对人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体A12进行可溶性表达及特异性和中和活性检测。方法表达人源单链抗体A12的菌株,经诱导后进行SDS-PAGE及Western blot检测,用流式细胞仪(FACS)检测表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染Vero细胞的能力,用快速荧光灶抑制实验(RFFIT)检测表达产物的中和活性。结果Western blot显示表达产物与抗C-myc抗体在相对分子质量约30 000处出现强阳性表达带。FACS表明A12与表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染的Vero细胞出现特异性反应。RFFIT表明,A12 ScFv在1∶27倍稀释时能完全中和病毒。结论已获得了A12可溶性表达,表达产物能与狂犬病毒G蛋白特异性结合,并对狂犬病毒具有一定的中和活性。 闭兰 张爱华 孙可芳 胡巧玲 祝玉桃 王志友 余模松关键词:单链抗体 基因表达 可溶性表达 治疗用鼠抗人单克隆抗体WuTac功能及药效学的研究 为证实WuTac单克隆抗体可阻断IL-2依赖的T细胞增殖作用,以及对IL-2受体的特异性结合作用,我们采用间接免疫荧光法,进行了阻断试验;同时为了研究WuTac对同种异体抗原刺激的T细胞(MLC)和PHA活化的T细胞增殖... 孙可芳 王志友 陈善华 贾卫关键词:单克隆抗体 白细胞介素-2 药效学 文献传递 荧光素标记抗CD3/CD4/CD8单克隆抗体的质量控制 目的:对本室用荧光素标记的抗CD3、CD4和CD8单克隆抗体进行质量控制。
方法:采用流式细胞术,利用其多参数的流式细胞分析技术,对单色、多色荧光标记抗体的偶联率及偶联效果进行分析与评价。
结果: 荧... 孙可芳 闭兰 端义坤 赵亚杰 张涛 张爱华关键词:荧光标记 单克隆抗体 生物制品 文献传递 抗人T淋巴细胞CD4人-鼠嵌合抗体真核表达的研究 CD4属于Ig超家族,为细胞膜表面单链糖蛋白,是HIV的主要受体。CD4T细胞在大多数自身免疫病发病过程中起中心作用,通过与MHC-II类分子相互作用识别抗原。应用抗CD4抗体可以干扰抗原识别及其对T细胞的激活而抑制CD... 张雪 张爱华 闭兰 赵亚杰 孙可芳 方志正文献传递 精神分裂症外周血T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白测定 被引量:1 1990年 作者测定48例精神分裂症患者外周血 E 花环形成率 IgG、IgA、IgM 值,单克隆抗体检测 T 细胞及其亚群变化,并与健康对照组相比。各项结果均无明显差异,但 T_H/T_S 比值降低,表明 T 抑制细胞(T_S)功能相对亢进,不支持精神分裂症为自身免疫性疾病。此外,病程、家族史及是否用抗精神病药物,对上述各项指标均无明显影响。 臧德馨 王高华 肖家宏 赵厚王 孙可芳 封江南 陈善华 史良如关键词:精神分裂症 免疫球蛋白 淋巴细胞亚群 荧光染料R-藻红蛋白标记小鼠抗人CD4单克隆抗体 被引量:3 2006年 以R-藻红蛋白(R-PE)标记小鼠抗人CD4单克隆抗体,形成单色或和用其他荧光染料标记的CD系列单抗组成双色、多色的荧光试剂,应用于流式细胞仪检测分析。用异双功能交联试剂SPDP和SMCC分别活化R-PE和CD4单抗,用DTT使经SPDP活化后的R-PE巯基化,再与用SMCC活化的CD4单抗交联。使用NEM终止交联反应,经Sephacryl S-300柱在AKTA FPLC快速液相色谱系统(简称AKTA)监测下分离纯化。结果用R-PE标记的抗CD4单抗,检测正常人外周血淋巴细胞表面CD4抗原的表达,经流式细胞仪(简称FACS)分析表明,R-PE标记的CD4抗体特异性保持完好,荧光强度较高,还可与用FITC标记的其它CD系列单抗配伍成双标或多标试剂。使用SPDP,SMCC异双功能交联试剂和DTT还原剂,成功地偶联了R-藻红蛋白和CD4单克隆抗体,可应用于流式细胞仪检测分析。 赵亚杰 闭兰 孙可芳 端义坤 詹骞 金玉玲 吕兰君 张爱华关键词:R-藻红蛋白 荧光标记CD3/CD4/CD8单克隆抗体的质量控制 被引量:1 2007年 目的对荧光素标记的CD3、CD4和CD8单克隆抗体进行质量控制。方法采用多参数的流式细胞分析技术,对单色、多色荧光标记抗体的偶联率及偶联效果进行分析与评价,并进行稳定性试验。结果荧光标记的单克隆抗体特异性保持完好;单色标记的抗体荧光强度均比进口对照低一个数量级;FITC-CD3/PE-CD4平均荧光强度与进口对照相差较大,FITC-CD3/PE-CD8和FITC-CD4/PE-CD8平均荧光强度与进口对照相差较小;FITC标记产物的F/P值控制在1~2之间;标记抗体于2~8℃放置18个月,稳定性良好。结论应用FITC、PE标记的CD3、CD4和CD8单克隆抗体可以采用流式细胞仪进行检测。 孙可芳 肖建 闭兰 端义坤 赵亚杰 张涛 张爱华关键词:流式细胞术 荧光素标记 单克隆抗体 人血清中抗鼠抗体间接ELISA检测方法的建立及临床应用 被引量:2 2009年 目的建立检测人血清中抗鼠抗体(HAMA)的间接ELISA法,并进行临床标本检测。方法采用间接ELISA法,选择最佳实验条件,确定阴阳性血清判定的界值,并进行方法学验证;用该方法检测WuTacⅠ期临床观察的健康志愿者血清抗鼠抗体。结果间接ELISA的最佳试验条件为:抗原包被浓度0.313μg/ml,血清稀释度1∶160,酶标抗体稀释度1∶80 000;阴阳性血清界值为0.210;该方法检测HAMA阳性标本的试验内和试验间变异系数分别为7.46%和5.48%,检测HAMA阴性标本的试验内和试验间变异系数分别为8.03%和14.7%;与马、山羊、兔、猴等动物血清无交叉反应;健康志愿者HAMA约在用药后10~14 d产生。结论已成功建立了检测人血清中抗鼠抗体的间接ELISA法,符合我国生物药品临床试验检测的要求。 郭长福 张囡 李茜 黎维勇 孙可芳 胡豫 张爱华关键词:人抗鼠抗体 间接ELISA WuT3无血清培养上清中单抗的纯化工艺建立 目的:对WuT3杂交瘤细胞无血清生物反应器培养上清中单克隆抗体进行分离纯化,建立中试分离纯化工艺。
方法:采用二步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化wul3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后,进行中量放大和... 詹骞 齐建新 王志友 董之昌 邹昌勇 杜厚明 冷武军 雷继军 杨明 端义坤 孙可芳 侯胜桐关键词:无血清培养 离子交换层析 纯化 生物制品 文献传递