孙成友
- 作品数：32 被引量：117H指数：6
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家奶牛产业技术体系项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 麋鹿朊蛋白全基因的克隆及序列分析
- 2013年
- 为获得中国麋鹿朊蛋白(PRNP)的全基因,并利用DNAStar软件与已报道的其他动物的朊蛋白全基因序列进行同源性分析,根据GenBank中马鹿朊蛋白基因序列设计特异性引物,采用PCR方法从提取的总基因组中扩增得到麋鹿PRNP基因;将其连接到pGEM-T Easy载体中,获得克隆产物并测序。结果,成功扩增出了中国麋鹿PRNP基因,构建了重组质粒pGEM-T-ML;对克隆产物的序列分析表明,麋鹿PRNP基因的开放阅读框包含771bp,编码256个氨基酸的前体蛋白,前体蛋白的分子质量约为28 200u;与已报道的其他鹿科动物朊蛋白全基因的核苷酸及氨基酸序列的同源性均在98.8%以上,与几种非鹿科动物的同源性在96.5%～98.4%之间。结果表明,麋鹿PRNP基因的核苷酸和编码蛋白的氨基酸序列与其他鹿科动物的序列具有高度保守性,而与几种非鹿科动物间的同源性也较高,说明朊蛋白是一种古老的高度保守的蛋白。
- 刘雨田孙成友李娟迟田英张鑫鑫于小静王志亮
- 关键词：麋鹿克隆
- 中国麋鹿朊蛋白核心片段的原核克隆表达与纯化被引量：2
- 2010年
- 从采取的新鲜麋鹿血液中提取麋鹿基因组DNA,通过PCR的方法从麋鹿基因组中扩增麋鹿PrP蛋白核心片段的DNA,并分别在引物的5'和3'端引入EcoR I和HindⅢ两个酶切位点,下游引物将原序列TATTAC突变为TAATAA变成两个终止密码子。通过两个酶切位点将麋鹿PrP蛋白核心片段DNA连接到pET-32a(+),转化DH5α,通过酶切鉴定和PCR鉴定,筛选出阳性克隆送菌液测序,从测序结果分析阳性克隆是否符合要求。测序正确后将核心片段基因连接到pET-32a(+),阳性质粒命名为MPrP-pET-32a(+),阳性质粒转化E.coli BL21(DE3),进行诱导表达、蛋白质纯化鉴定。
- 刘玉亮刘雨田胡国良郭小泉孙成友
- 关键词：酶切纯化
- 牛海绵状脑病诊断技术 牛海绵状脑病诊断技术
- 本标准规定了BSE诊断的临床诊断、实验室诊断及综合判定技术要求。本标准适用于BSE的诊断，其中临床诊断适用于BSE的监测和流行病学调查，H·E组织病理染色法适用于BSE中枢神经系统的病理诊断，免疫组织化学方法和免疫印迹方...
- 王志亮刘雨田孙成友迟田英 宋芳芳邹艳丽于小静吴晓东王树双
- 鹿慢性消耗性疾病免疫组织化学检测方法的建立与优化
- 2012年
- 【目的】在自主研制的抗鹿朊蛋白单克隆抗体基础上,建立和优化了鹿慢性消耗性疾病(chronic wasting disease,CWD)的免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)诊断方法。【方法】按照常规石蜡病理切片制作方法制备阴性和阳性切片,应用ABC法对获得的5株单抗进行免疫组织化学检测。【结果】试验结果表明,5株单抗(编号分别为5A5、3B2、6D12、5E3、1F5)中只有5E3和3B2可以与CWD的阳性鹿延髓切片发生特异性免疫反应,而且5E3的反应较强烈,3B2的反应较弱,其它3株单抗则在试验的浓度范围内无特异性免疫反应。此外,5E3的稀释比例为1:10 000时,免疫反应效果达到最佳状态。【结论】实验结果表明,单抗5E3可以用于我国CWD的监测。
- 张鑫鑫刘焕奇刘雨田孙成友迟田英于小静邓明义王志亮
- 关键词：单抗免疫组织化学
- 非洲猪瘟病毒与天然免疫系统相互作用研究进展被引量：3
- 2021年
- 非洲猪瘟病毒(ASFV)可引起家猪和野猪的出血热,在非洲、欧洲和亚洲持续蔓延,对全球养猪业构成严重威胁。因为没有疫苗,难以有效地控制非洲猪瘟流行。ASFV感染能够诱导宿主的天然免疫,也能够通过调节天然免疫效应分子抑制宿主的天然免疫机能。现对ASFV感染与天然免疫反应及其免疫抑制的现象与机理进行综述。
- 屈海龙戈胜强张永强韩乃君孙成友吴晓东王志亮
- 关键词：天然免疫干扰素免疫抑制凋亡
- 西班牙非洲猪瘟根除计划的经验与借鉴被引量：33
- 2016年
- 非洲猪瘟（African swine fever,ASF）于1921年由Montgomer[y1]首次报道。1928年,Steyn等[2]发现该病也在南非出现。此后有报道称,1933年到1934年发生于南非的非洲猪瘟疫情共涉及11 000头猪,其中8 000多头死亡,2 000多头销毁,只有862头存活,其严重程度可想而知[3]。该病发现的早期只限流行于东非和南非部分地区,而在1957年,该病从安哥拉传入葡萄牙的里斯本,虽然很快被扑灭,但在1960年该地区又暴发疫情,并在亚平宁半岛广泛流行。
- 戈胜强孙成友吴晓东张志城张永强赵永刚梅凝香刘华雷王志亮
- 关键词：非洲猪瘟疫苗
- 对青岛地区4个猪场的猪细环病毒Ⅱ型的分子流行病学调查被引量：2
- 2013年
- 为了解青岛地区各猪场中猪细环病毒II型(TTV2)的存在和感染情况,本实验对2012年3月至5月期间采自青岛地区4个猪场的59份猪血清样品利用病毒核酸提取试剂盒进行了猪细环病毒DNA提取,在此基础上利用TTV2的特异性引物进行PCR检测。结果显示只有莱西1个猪场的血清样品中检测到阳性,阳性率为13.8%,并且存在TTV1与TTV2混合感染的情况,混合感染率为6.9%。本实验结果证实某些猪场中存在猪细环病毒感染,由于TTV在猪的多系统衰竭综合征的病症发展中可能扮演一定角色,所以了解TTV在猪场中的存在状况具有重要意义。
- 孙成友赵永刚徐志国刘文华邹艳丽李希强任炜杰刘春菊吴晓东王志亮
- 关键词：流行病学PCR
- 牛传染性鼻气管炎的诊断、流行病学调查及防控被引量：16
- 2012年
- 牛传染性鼻气管炎是由牛传染性鼻气管炎病毒即牛疱疹病毒Ⅰ型引起的牛的一种急性、热性、接触性传染病。该病呈世界性分布,广泛存在于欧美等许多养牛发达国家,给世界养牛业造成了巨大的经济损失。我国自20世纪80年代初开始已陆续在很多省市自治区检出此病。笔者通过对北京、天津、陕西、山西、山东、新疆、河南、河北等地的11个奶牛场进行了流行病学调查,发现该病的群阳性率77.8%,个体阳性率为0%～55%。本文从牛传染性鼻气管炎的诊断、流行病学调查、防制措施等几方面进行了概述,希望能为该病的防控提供一些依据。
- 王淑娟孙成友孙成友宋晓晖徐天刚徐天刚刘春菊王华张永强刘海生赵永刚
- 关键词：牛传染性鼻气管炎流行病学调查
- 牛结核病的传播特点和风险因素及防控被引量：8
- 2013年
- 牛结核病是一种世界分布的人畜共患传染病,被世界动物卫生组织列为法定报告疾病。其传播风险影响着畜牧业持续发展和人类的健康。本文概述了牛结核病的宿主范围、传播特点、风险因素及其防控措施等方面,旨在为我国牛结核病疫情传播和预防控制提供理论研究。
- 王华孙成友王淑娟吴晓东徐天刚王志亮
- 关键词：人畜共患病
- 西尼罗河热的流行历史、现状及防控被引量：3
- 2016年
- 通过介绍西尼罗河热的全球流行历史与现状,指出该病具有流行区域不断扩展、流行频率增加、致病性严重等特点,提出了加强对国际运输工具的杀虫消毒,以及加强口岸动物检疫、预警性监测和诊断技术储备等建议,以期为科学防控该病提供依据。
- 王淑娟宋晓晖迟田英孙成友王清华吕艳邹艳丽吴晓东王志亮
- 关键词：西尼罗河热
