季顺东
- 作品数：74 被引量：195H指数：9
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究
- 2005年
- 目的:为了研制新型特异性抗血栓制剂。方法:利用噬菌体展示文库技术筛选与vWF- A1区有高亲合力单链抗体(ScFv) ;基因重组的方法构建高效表达载体pET 2 0b(+) ScFv ,在大肠杆菌中诱导表达;夹心ELISA方法鉴定此单抗的抗原结合活性;瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集试验(RIPA)测定ScFv对血小板聚集的抑制作用。结果:噬菌体展示技术筛选的ScFv在大肠杆菌中成功地诱导表达,表达的ScFv占菌体总蛋白的4 1% ,以包涵体形式存在;经纯化复性的ScFv可以与vWF、rvWF- A1、rvWF- A1 A3结合,但不与rvWF A3、BSA反应;ScFv具有抑制RIPA功能,抑制率为73. 7%。结论:在大肠杆菌中高效表达的噬菌体展示技术筛选的抗vWF A1区ScFv可特异性与vWF- A1区结合,而抑制瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集,显示出很好的应用前景,为研制新型抗栓药物奠定基础。
- 祝怀平王迎春季顺东江淼白霞阮长耿
- 关键词：VWF
- 血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ体外表达
- 2005年
- 目的利用基因重组技术体外表达血小板糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)胞外区片段。方法采用PCR方法扩增GPⅥ胞外区片段cDNA,构建表达载体pET-20b(+)-GPⅥ,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导表达。表达产物经Ni-NTAResin纯化后复性;使用Westernblot方法鉴定重组蛋白性质。结果PCR扩增产物经测序证明与GPVI胞外区cDNA序列完全一致;酶切分析证明成功构建了表达载体pET-20b(+)-GPⅥ;原核细胞经诱导表达后出现新的相对分子量为32kd的蛋白条带,诱导产物以包涵体形式存在;Western印迹分析表明重组蛋白可与抗Penta-His抗体和抗GPⅥ多抗特异性结合。结论正确构建了GPⅥ表达载体并成功表达重组蛋白,纯化、复性后的重组蛋白具有良好的抗原性。
- 余自强董宁征白霞祝怀平季顺东江淼阮长耿
- 关键词：血小板胶原
- 抗血管性血友病因子A3区双功能性单克隆抗体的应用
- 本发明涉及医药领域，公开了抗血管性血友病因子A3区双功能性单克隆抗体在制备抗血栓药物中的应用。抗血管性血友病因子A3区双功能性单克隆抗体在动物体内具有显著地抑制周期性血流减少(CFRs)作用，不但抑制血浆VWF与胶原的结...
- 赵益明阮长耿季顺东江淼
- 文献传递
- 抗人血小板、抗血栓单克隆抗体的研制与应用被引量：1
- 2019年
- 抗血小板抗体自从问世以来,一直是研究血小板与血液成分和血管壁相互作用的重要工具.同时,抗血小板抗体在出血、血栓性疾病的检测和诊断方面也起着重要作用,并且成为一类强有力的抗血栓药物.随着对生理性止血和病理性血栓形成过程中血小板作用机制的深入理解,抗血小板、抗血栓抗体也在更好的抗栓效果和更小的出血不良反应之间找到平衡.
- 江森季顺东戴克胜阮长耿
- 关键词：血小板抗体血栓形成
- <Sup>99</Sup>Tc<Sup>m</Sup>－Syt I－C2A标记化合物在制备用于易损动脉粥样硬化斑块的显像剂的用途
- 本发明涉及<Sup>99</Sup>Tc<Sup>m</Sup>-Syt I-C2A标记化合物用于对易损动脉粥样硬化斑块的显像剂的应用，为解决现有技术中的显像剂成像时间长、成本高的问题而发明。本发明<Sup>99</Su...
- 方纬王峰季顺东潘旭东
- 文献传递
- 活化的凝血酶活化的纤溶抑制因子对大鼠内源性纤溶的调节作用
- 2005年
- 目的:研究血浆中活化的TAFI(TAFIa)增加对机体内源性纤溶的影响。方法:①用凝血酶及血栓调 节蛋白(TM)活化TAFI,然后用TAFI活性测定试剂盒检测活化后的TAFI;②以[125I]-纤维蛋白原进行示踪,用batrox obin建立大鼠肺纤维蛋白沉积模型,并运用该模型研究TAFIa对大鼠内源性纤溶的作用。结果:①TAFI被凝血酶／ TM活化后,反应体系中TAFIa达40 mg/L;②Batroxobin组大鼠的肺组织同位素量,5 min时显著高于对照组,而30 min 时由于内源性纤溶系统的激活,比5 min时显著降低,与对照组无显著差异;③给予TAFIa后,大鼠血浆TAFIa增加, 逆转了30 min的降低。结论:首次证实血浆中TAFIa的增高可抑制纤溶,提示抑制TAFIa可能是防治血栓性疾病的 一种新的途径。
- 董宁征吴成亮季顺东江淼阮长耿
- 关键词：巴曲酶纤维蛋白溶解
- 人vWF-A1多肽的融合表达及生物学活性鉴定
- 2003年
- 血管性血友病因子 (vWF)通过与血小板膜糖蛋白结合介导血小板的粘附和聚集 ,在血栓形成过程中发挥重要作用 .通过阻断血小板与vWF的结合可抑制血栓形成 .应用RT PCR方法从人脐带内皮细胞中克隆vWF A1区基因并在原核细胞内进行表达 ,经过纯化、复性 ,获得重组蛋白(rvWF A1) .用流式细胞术检测rvWF A1与转染了糖蛋白Ib(GPⅠb)的CHO K1细胞和血小板GPⅠb的结合能力 ,血小板聚集仪测定rvWF A1对瑞斯托霉素 (ristocetin)诱导的血小板聚集作用的影响 .重组表达载体pET 2 0b(+ ) vWF A1在大肠杆菌BL2 1(DE3)plus中得到有效表达 ,表达的重组蛋白量占菌体总蛋白 30 % .次氮基三乙酸镍琼脂糖 (Ni NTAagarose)柱纯化后 ,其纯度为 95 % .经复性的rvWF A1蛋白具有良好的生物学活性 ,它可与转染了GPⅠb的CHO K1细胞和血小板结合 ,阳性率分别为 96 90 %与 78 6 0 % ,且可以抑制ristocetin诱导的血小板聚集 ,其抑制效应呈剂量依赖性 .IC50 的rvWF A1浓度为 0 5 6 μmol L ,当浓度为 1 4 μmol L时抑制率最高达 84 70 % .结果表明 ,在原核细胞中表达人rvWF A1区蛋白可抑制血浆中野生型vWF与血小板的结合 。
- 祝怀平王迎春赵小娟季顺东白霞阮长耿
- 关键词：生物学活性血管性血友病因子
- 多肿瘤标志物蛋白芯片检测在老年人健康体检中的应用价值及其临床意义被引量：10
- 2016年
- 目的：探讨多肿瘤标志物蛋白芯片技术（C12芯片法）在老年人健康体检中的应用,并量化分析不同年龄和性别体检者肿瘤标志物检测值和阳性率的差别,阐明其临床意义。方法：选择健康体检者9 654人,按年龄分为对照组（40-59岁）、老年组（60-79岁）和高龄组（80岁及以上）。采用多肿瘤标志物芯片检测系统检测各组体检者甲胎蛋白（AFP）、糖链抗原15-3（CA15-3）、糖链抗原19-9（CA19-9）、糖链抗原125（CA125）、糖链抗原242（CA242）、癌胚抗原（CEA）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、铁蛋白（ferritin）、β-人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）、人生长激素（HGH）、前列腺特异性抗原（PSA）和游离PSA（f-PSA）共12项肿瘤标志物水平,以超出正常范围为阳性结果,分析3组体检者样本的肿瘤标志物检测值和阳性率。结果：1体检者9 654人中共检出阳性结果665人,阳性检出率为6.89%,其中32人经内窥镜、病理学和影像学检查确诊为早期或中期肿瘤,肿瘤检出率为0.33%。2男女体检者肿瘤标志物阳性率不同,男性前5位依次为f-PSA、PSA、CEA、CA19-9和NSE;女性前5位依次为CA19-9、CA125、CEA、NSE和CA242。3 CA19-9、CA242、CEA、NSE、PSA和f-PSA阳性率分布呈随年龄增长而升高的趋势（P〈0.01）。4各组体检者AFP、CA125、CA19-9、CA242、CEA、HGH、NSE和PSA检测值随着年龄增长而升高,高龄体检者上述指标高于老年组和对照组（P〈0.01）,老年组上述指标高于对照组（P〈0.01）。结论：C12芯片中CA19-9、CEA、NSE、PSA和f-PSA等肿瘤标志物在老年人、尤其是高龄老年人的健康筛查中阳性率高,有助于发现早期肿瘤。
- 李清茹季顺东
- 关键词：蛋白芯片多肿瘤标志物高龄老年人健康体检
- 佩戴口罩对血液透析患者呼吸道感染的预防作用被引量：1
- 2022年
- 目的分析冬春季佩戴口罩对血液透析患者呼吸道感染的预防作用。方法回顾性分析2017—2020年每年2~4月因肾衰竭行规律血液透析患者的临床资料;其中,2020年患者治疗时严格佩戴口罩,2017—2019年患者治疗时未佩戴口罩。分析佩戴口罩对呼吸道感染率的影响。结果与2017、2018、2019年相比,2020年患者佩戴口罩后呼吸道感染率降低(0.16%vs.0.36%、0.36%、0.47%)(P<0.01)。2020年年龄<60岁和血液透析时间>2年患者佩戴口罩后呼吸道感染率均较2017、2018、2019年降低(0.12%vs.0.44%、0.42%、0.49%和0.18%vs.0.42%、0.43%、0.50%)(P<0.01或P<0.05);而2017—2020年间年龄≥60岁和血液透析时间≤2年患者的呼吸道感染率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在呼吸道感染高发季节佩戴口罩可以有效降低血液透析患者呼吸道感染率,尤其是年龄<60岁和血液透析时间>2年的患者。
- 钱慧雯季顺东高磊季成仲崇科张永红侯纯琦
- 关键词：口罩血液透析呼吸道感染
- 经颅多谱勒检测兔大脑中动脉微血栓栓子的研究
- 2007年
- 目的应用经颅多谱勒(TCD)动态检测兔血栓栓塞模型大脑中动脉(MCA)的微栓子信号(MES),观察栓子的负荷量与缺血性脑血管病(ICVD)发生的相关性。方法将实验动物随机分为3组,即A组含3～5个栓子,B组含6～10个栓子,C组为生理盐水对照组。采用自体动脉血微栓子建立兔局灶性脑缺血模型同时TCD监测MES。栓塞后6 h进行磁共振成像(MRI)及兔脑组织病理观察。结果A、B组TCD均监测到MES;B组MRI的T1WI、T2WI及病理观察见梗死灶,而A组仅在弥散加权成像(DWI)见可疑小缺血灶。结论TCD实时、动态观察微栓子信号,能预测缺血性脑血管病发生的危险性,为临床及早干预治疗提供科学依据。
- 惠品晶刘曼季顺东付志辉潘高争张世明张学光惠国桢
- 关键词：动物大脑中动脉血流动力学缺血性脑血管病
