宋欣
- 作品数：10 被引量：15H指数：3
- 供职机构：华北制药集团新药研究开发有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子与乙型肝炎疫苗协同诱导的特异性免疫应答被引量：4
- 2007年
- 目的考察粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Gm-csf)对乙型肝炎疫苗免疫原性及诱导的体液免疫效果的加强作用。方法将Gm-csf和乙肝疫苗分别采用4种不同的免疫顺序,联合免疫BALB/c小鼠。定期用酶联免疫吸附法检测小鼠产生的抗乙型肝炎表面抗原(抗-HBsAg)的抗体水平。结果联合免疫Gm-csf,可提高小鼠产生的抗-HBsAg抗体水平;②单次免疫后7 d,混合疫苗组的血清抗体滴度最高,为疫苗组的7.5倍;直至免疫后35 d,混合疫苗组仍为最高,为疫苗组的9.2倍;③二次免疫后14 d,混合疫苗组血清中抗体滴度与疫苗组相比有显著性提高(P<0.05),随后GM+疫苗组、混合疫苗组和疫苗+GM组血清中抗体滴度都先后达到峰值,分别为疫苗组的10.0,10.1,8.2倍。④小鼠血清中抗体水平达到稳定状态后,用乙肝疫苗原液进行挑战实验,抗体快速达到峰值,分别为挑战实验前的9.2,5.2,12.8,4.8倍。结论通过Gm-csf的联合免疫,可提高乙型肝炎疫苗的免疫原性,增强乙型肝炎疫苗诱导的体液免疫水平。
- 周兴军王世聪宋欣李立敏董爱华王惠欣谢德娟冯利
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子乙型肝炎疫苗体液免疫免疫记忆
- 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子与乙肝疫苗协同诱导小鼠细胞免疫应答被引量：3
- 2012年
- 目的考察粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Gm-csf)对乙型肝炎疫苗免疫原性及诱导的细胞免疫效果的加强作用。方法将Gm-csf和乙型肝炎疫苗分别采用4种不同方式免疫BALB/c小鼠,免疫后,制备脾细胞,再以相应的HBsAg体外刺激,酶联免疫法(ELISA)测定细胞因子分泌水平,MTT法测定脾细胞对抗原刺激指数;以YAC-1细胞为靶细胞,测定细胞毒性T淋巴细胞活性;同时ELISA法测定血清中特异性抗体IgG1和IgG2a。结果GM+疫苗组小鼠脾细胞产生的IFN-γ水平最高,显著高于其它组(P<0.05),而各免疫组IL-5水平没有显著差别(P>0.05);GM+疫苗组小鼠脾细胞对抗原刺激的刺激指数显著高于其它各组(P<0.05);GM+疫苗组小鼠脾细胞对YCA-1的杀伤性显著高于其它各组(P<0.01)。结论通过Gm-csf的联合免疫,可提高乙型肝炎疫苗的免疫原性,增强乙型肝炎疫苗诱导的细胞免疫水平。
- 周兴军宋欣李立敏董向锋董爱华
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子乙型肝炎疫苗细胞免疫
- 重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白的DNA残留量检测被引量：2
- 2009年
- 目的:重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rhTrail)是一种治疗肿瘤的蛋白药物。其质量控制中,参照2005年《中华人民共和国药典》第三部规定,单支剂量的外源性DNA含量不应超过10ng。通过纯化,我们得到重组大肠杆菌表达的rhTrail蛋白,对其进行了DNA残留检测。方法:参照固相斑点杂交和地高辛核酸探针法,利用DNA地高辛标记和检测试剂盒,制备了地高辛标记宿主DNA探针,对三个rhTrail样品进行DNA残留检测。结果:杂交膜上,宿主DNA带显色,颜色按DNA上样量高低由深至浅,呈梯度差异,三个rhTrail蛋白样品的上样带颜色均较参比的宿主DNA100pg上样带颜色浅。结论:通过换算,三个样品单支剂量的DNA残留均低于10ng,符合DNA残留要求。
- 宋欣郑海洲
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体地高辛
- 大肠杆菌分泌表达重组人肝再生增强因子的纯化、鉴定与活性研究被引量：1
- 2006年
- 目的建立一种大肠杆菌分泌表达型重组人肝再生增强因子(rhALR)的纯化工艺,并对产品进行鉴定和活性研究。方法通过沉淀、色谱等方法的条件优化,建立纯化工艺,通过电泳、HPLC、N-末端氨基酸测序、免疫杂交、同位素掺入、全波长扫描等方法对纯化产品进行鉴定和活性测定。结果建立了rhALR的纯化工艺路线,40%(NH4)2SO4沉淀,Butyl-S FF疏水色谱,CM-S FF离子交换色谱,Superdex-75分子筛色谱纯化,重组蛋白质的纯度大于95%。该蛋白质稳定存在的形式为二聚体,其单体的相对分子质量为15 000。该蛋白质结合辅酶黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),对损伤后的肝细胞具有明显的促进作用,明显优于以包涵体形式表达的rhALR。结论从大肠杆菌分泌表达体系能分离纯化得到高纯度、具有生物学功能和活性的rhALR,是潜在的临床治疗肝病药物。
- 郝爱鱼董爱华赵广荣周兴军宋欣任乐民暴娜高文利贾茜
- 关键词：肝再生增强因子纯化工艺黄素腺嘌呤二核苷酸
- 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在制备治疗或预防乙型肝炎药物中的用途
- 本发明公开了一种重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在制备治疗或预防乙型肝炎药物中的用途，包括同时或先后给予重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和基因工程乙型肝炎疫苗，用于预防或治疗乙型肝炎。
- 周兴军宋欣李立敏王惠欣董爱华王世聪贺建功谢德娟封华
- 文献传递
- 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在制备治疗或预防乙型肝炎药物中的用途
- 本发明公开了一种重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在制备治疗或预防乙型肝炎药物中的用途，包括同时或先后给予重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和基因工程乙型肝炎疫苗，用于预防或治疗乙型肝炎。
- 周兴军宋欣李立敏王惠欣董爱华王世聪贺建功谢德娟封华
- 文献传递
- 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子与三种不同来源的乙肝疫苗协同诱导的特异性免疫应答的比较被引量：1
- 2012年
- 目的比较粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Gm-csf)对三种不同来源的乙肝疫苗免疫原性及诱导的体液免疫效果的加强作用。方法将重组Gm-csf和三种不同来源的乙肝疫苗分别按相同程序,联合免疫小鼠,定期用酶联免疫吸附法检测小鼠产生的抗乙型肝炎表面抗原(抗-HBsAg)的抗体水平。结果免疫1周后,CHO细胞疫苗组、汉逊酵母疫苗组、啤酒酵母疫苗组血清中抗-HBsAg抗体阳性率分别为90%,10%,0%;免疫2周后分别为100%,40%,40%;二次免疫后,三个实验组小鼠血清中抗体持续增加。结论通过Gm-csf的联合免疫,可提高乙型肝炎疫苗的免疫原性,增强乙型肝炎疫苗诱导的体液免疫水平。
- 周兴军董爱华董向锋宋欣李立敏
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子乙肝疫苗体液免疫
- 重组蛋白在大肠杆菌分泌表达的研究进展被引量：5
- 2009年
- 长期以来,大肠杆菌是表达外源蛋白的首选表达系统,重组蛋白分泌表达与胞内表达相比有很大优越性,在细胞周质腔不仅能促进重组蛋白二硫键的形成及正确折叠,还能促进分泌蛋白的N-端加工。本文综述了近年来在大肠杆菌中表达可溶性外源蛋白的进展,目的是为了提高外源蛋白的生物活性。
- 郑海洲刘晓志宋欣
- 关键词：大肠杆菌分泌表达重组蛋白
- 分泌表达的重组人肝再生增强因子的纯化、鉴定和活性研究
- 目的:建立一种可分泌表达的重组人肝脏再生增强因子的纯化工艺,对纯化产品进行鉴定和活性研究.方法:通过疏水层析,离子交换层析和分子筛层析的优化,建立了重组人肝脏再生增强因子的纯化工艺,通过SDS-PAGE、N端氨基酸测序、...
- 郝爱鱼董爱华宋欣任乐明周兴军郑学丽高文利暴娜贾茜
- 关键词：肝再生增强因子纯化层析二聚体分泌表达
- 文献传递
- 鲎试剂法检测二乙酰氨乙酸乙二胺注射液的细菌内毒素
- 2005年
- 目的探讨二乙酰氨乙酸乙二胺注射液的细菌内毒素检测方法。方法参照中国药典2000年版细菌内毒素检查法中干扰试验的基本原理及检查方法。结果将二乙酰氨乙酸乙二胺注射液稀释50倍以上可消除干扰作用。结论本方法灵敏度好,操作简便,检查快速,可用于二乙酰氨乙酸乙二胺注射液的细菌内毒素检查。
- 宋欣景金柱付乃华
- 关键词：二乙酰氨乙酸乙二胺注射液细菌内毒素鲎试剂二乙酰氨乙酸乙二胺细菌内毒素检测注射液鲎试剂法细菌内毒素检查法
