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康琳: 作品数：71 被引量：132H指数：7; 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>

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志贺毒素A/B(ShT-A/B)亚单位基因的克隆与序列分析被引量：3: 2003年; 应用PCR技术从Ⅰ型痢疾志贺茵(Shigella dysenteriae type Ⅰ)中,分别扩增出约895bp和225bp的成熟ShT-A,B基因片段,直接克隆至pGEM-T载体中,经蓝白斑筛选、PCR和双酶切鉴定正确后,命名为pGEM-ShTA_2和pGEM-ShTB_3。测序结果表明,插入的片段是ShT-A,ShT-B,且与GenBank中ShT-A,B核酸序列完全一致,从而为重组ShT-A,B的表达研究奠定了基础。; 喻华英王景林高丰康琳吴东林赵金红; 关键词：基因克隆

一种应用悬浮芯片技术检测霍乱弧菌O139方法: 本发明涉及一种用于霍乱弧菌O139检测的悬浮芯片及其检测方法，该悬浮芯片包括微球载体和固定在载体上的寡聚核苷酸探针，其中该寡聚核苷酸探针是从霍乱弧菌O－抗原基因簇筛选的霍乱弧菌O139特异性基因rfb中的一段DNA序列。...; 王景林赵金银高姗刘艳华康琳; 文献传递

应用xMAP液态芯片多重快速检测四种病原微生物的研究被引量：11: 2008年; 目的:建立一种多重、快速、特异性好、灵敏度高的病原微生物检测方法。方法:根据GenBank数据库中的小肠结肠炎耶尔森氏菌、单核细胞增生性李斯特菌、产气荚膜梭菌、鼠疫耶尔森氏菌基因序列,分别针对ail、hly、cpe、3a基因设计4对引物和4条探针。通过重叠PCR扩增各目的基因并构建重组质粒,以该重组质粒DNA为模板,通过多重PCR同时扩增上述4个基因,建立xMAP液态芯片检测技术,在此基础上对标准菌株基因组DNA进行检测并验证该方法的特异性和敏感性。结果:xMAP液态芯片对质粒DNA和标准菌株基因组DNA的检测结果与多重PCR结果一致。该方法能在3.5 h内同时完成对4种病原菌的检测,特异性好,且敏感性要高于PCR方法,灵敏度最高可达200CFU/ml。结论:xMAP液态芯片技术是病原微生物的多重快速检测的新方法,具有很好的应用价值和前景。; 胡瑞赵金银陈德坤刘艳华高姗康琳高艳丽王景林; 关键词：病原微生物

相思子毒素A链突变体的构建及作为候选疫苗抗原: 本发明公开了一种与相思子毒素疫苗相关蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白质，命名为mATA，是如下1)或2)中任一所述的蛋白质：1)由序列表中的序列2的氨基酸残基序列组成的蛋白质；2)将序列表中的序列2氨基酸残基序列...; 王景林韩艳辉高姗康琳; 文献传递

三种毒素ELISA检测试剂盒的研制: 列入生物武器核查核查清单中攻击人的生物毒素战剂约11大类,其中,绝大多数毒素清单剂我军没有现成的标准检测鉴定方法。为了迎接生物武器核查的挑战、反对生物战和防范生物恐怖袭击,必须及早建立一套标准化的毒素战剂检测和鉴定方法。...; 商姗康琳刘艳华王景林; 关键词：生物武器生物毒素检测试剂盒; 文献传递

重组蓖麻、相思子毒素A链突变体的嵌合表达和免疫效果评价: 虽然美国“9.11”事件发生距今已有十年之久，但是恐怖袭击的阴影依然没有散去，在世界各地时常有或大或小的恐怖袭击事件发生，关于生物恐怖战剂的研究，更是引起了人们的广泛关注.在《禁止生物武器公约》中，蓖麻毒素(RIC)和相...; 韩艳辉高姗康琳王景林; 关键词：免疫效果

A型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆及高效表达被引量：3: 2004年; 目的 :实现产气荚膜梭菌α毒素 (Clostridiumperfringensalphatoxin ,CPa)基因的克隆与表达。方法 :用PCR技术从A型产气荚膜梭菌中扩增出CPa基因 ,克隆到原核表达载体pQE30中 ,构建了重组质粒pQE30_CPa ,转化E .coliM15获得了CPa的高效表达。结果 :序列测定和双酶切表明 ,CPa基因正确插入载体。序列分析发现CPa基因与GenBank中的 4种CPa基因相似率为 76 .7%～ 99.9%。工程菌裂解液经SDS_PAGE分析显示在相对分子质量 4 30 0 0处有一条表达很强的蛋白区带 ,与CPa相对分子质量相符 ,约占菌体总蛋白的 6 2 .88% ,主要以包涵体形式存在。免疫印迹结果表明 ,表达的重组CPa蛋白同抗CPa血清有特异性结合。结论 :为进一步研究CPa重组疫苗和制备CPa的特异性抗体奠定了基础。; 王景林王利春吴东林康琳姜永强; 关键词：Α毒素基因表达

A型肉毒毒素轻链基因的克隆及其结构分析被引量：2: 2003年; 以文献报道的A型肉毒毒素基因全序列为标准,设计并合成一对引物,自肉毒梭菌基因组中扩增出肉毒毒素轻链基因片段,并将扩增产物与pGEM-T载体在体外连接,构建测序重组质粒,进行测序和基因结构分析。PCR扩增获得了产物为1364bp的DNA片段,测序结果与DNA数据库对照检索分析证明,此基因片段与GenBank中的A型肉毒毒素LC基因的一致性达99.9%以上,可以认为克隆的基因为A型肉毒毒素LC基因。; 贾宏丽赵金红王景林康琳; 关键词：A型肉毒毒素轻链基因克隆基因结构毒性肉毒梭菌

重组CPTα的亲和纯化及其单克隆抗体的制备被引量：2: 2004年; 目的 :制备抗A型产气荚膜梭菌毒素α(CPTα)单克隆抗体 (mAb)并鉴定其生物学特性。方法 :利用工程菌株E .coliM15 /pQE30 CPTα表达的重组A型CPTα带有 6个组氨酸 (6×his)标签的特性 ,经Ni NTA螯合亲和层析方法纯化后 ,用纯化的重组CPTα免疫BALB/c鼠 ,以常规杂交瘤细胞融合技术、HAT选择性培养和间接ELISA进行筛选 ,并分析其亚类及中和保护作用。结果 :获得一株能稳定分泌抗CPTα的mAb杂交瘤细胞株 4E2 ,其分泌抗体亚类为IgG1。该mAb与重组CPTα和天然CPTα均可发生特异性反应 ,并可保护小鼠抵抗 2倍最小致死剂量CPTα的攻击 ,属中和性抗体。结论 :应用纯化的重组CPTα成功地获得了特异性的中和抗体mAb 4E2 ,为A型CPTα诊断抗体和治疗性抗体的研制奠定了基础。; 王景林杨利敏吴东林康琳; 关键词：A型产气荚膜梭菌单克隆抗体