张彬
- 作品数：12 被引量：16H指数：2
- 供职机构：宁夏医科大学研究生院（研究生工作部）更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏回族自治区科技厅科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- Cdk5在肾小球足细胞中的表达及作用被引量：3
- 2014年
- 目的研究周期素依赖性蛋白激酶-5(Cdk5)及其激活剂p35在肾小球足细胞中的表达及作用。方法分别培养原代小鼠神经细胞、原代小鼠分化成熟的离体足细胞(简称足细胞)以及人胚肾细胞(HEK293细胞),应用免疫印迹、免疫沉淀及同位素标记等方法检测Cdk5、p35的表达及Cdk5的活性;以原代小鼠分化成熟的离体足细胞为研究对象,分为正常组、ROS组(Cdk5活性抑制组)、Cdk5 siRNA组(Cdk5表达沉默组),观察Cdk5的表达及活性,并应用Cdk5 siRNA、Cdk5化学抑制剂-Roscovitine进行抑制实验。结果离体培养原代小鼠分化成熟的足细胞中均有Cdk5及p35蛋白的表达;Cdk5在足细胞中具有活性;沉默Cdk5表达、应用Cdk5活性抑制剂Roscovitine抑制Cdk5活性后,可引起足细胞特异性标志物WT1的表达减少,说明足细胞受到损伤,数量减少。结论 Cdk5的表达及活性在维持正常足细胞功能中起重要作用。
- 毕逢辰张彬郑亚莉
- 关键词：P35足细胞SIRNA
- TFP5保护高糖诱发的胰岛β细胞损伤
- 2014年
- 目的探讨TFP5对高糖诱发的周期素依赖性蛋白激酶-5(Cdk5)过度活性的抑制作用及其对胰岛β细胞的保护作用。方法体外培养小鼠胰岛细胞株Min6,将TFP5转染到Min6细胞,空病毒载体为对照,比较转染率,并测定Cdk5激酶活性。将细胞分为低糖组(5 mmol·L-1)、高糖组(25mmol·L-1)和高糖+TFP5组,观察3组细胞中Cdk5激酶活性,并通过检测细胞凋亡标记Bax/Bcl-2评估细胞存活情况。结果 TFP5可有效转导进入Min6细胞内;高糖可诱导Cdk5过度活性,TFP5抑制高糖诱导的Cdk5过度活性;高糖刺激下Min 6细胞的Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2升高,细胞凋亡增加,而加入TFP5后可以减低Bax/Bcl-2的比值,减少细胞的凋亡。结论 TFP5可抑制高糖诱发的Cdk5激酶的过度活性、减少高糖刺激下胰岛细胞凋亡,具有潜在的以Cdk5为靶点治疗2型糖尿病的前景。
- 张霞张彬郑亚莉李博郭江涛曹旭芹
- 关键词：周期素依赖性蛋白激酶5葡萄糖胰岛素细胞凋亡
- Cdk5与VEGF在糖尿病肾病小鼠肾小球足细胞中的表达及相关性研究被引量：2
- 2015年
- 目的探讨周期素依赖性蛋白激酶5(Cdk5)和血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病肾病肾小球足细胞中的表达及相关性。方法选用db/db小鼠作为实验组(n=5),C57BL/6J小鼠作为对照组(n=5),2组小鼠在相同的饲养条件下,饲养至第14周并将其处死,取其肾脏,组织切片,采用免疫组化染色法测定Cdk5和VEGF表达并半定量分析。结果实验组、对照组小鼠Cdk5的表达均主要沿肾小球基底膜及足细胞分布,但实验组的表达强度高于对照组(实验组MOD值0.510±0.024,对照组MOD值0.486±0.023,P<0.05);对照组小鼠VEGF仅在足细胞有较弱表达(MOD值0.249±0.015 3),而实验组VEGF除了在肾小球足细胞阳性表达外,还可见系膜区阳性表达且表达强度明显增加(MOD值0.276±0.020),差异有统计学意义(P<0.05);Cdk5与VEGF表达的MOD值呈正相关(r=0.99)。结论 Cdk5和VEGF在糖尿病肾病肾小球足细胞中表达均增加,两者呈正相关关系,提示Cdk5和VEGF可能参与DN的发生发展。
- 张彬保莉张霞郑亚莉
- 关键词：糖尿病肾病足细胞血管内皮生长因子
- 高糖环境诱导胰岛表达p25引起胰岛细胞损伤的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨在高糖环境中p25的表达及其对胰岛细胞损伤及胰岛素分泌的影响。方法实验分为db/db小鼠组(糖尿病组,n=5)和C57/BL小鼠组(正常对照组,n=5),进一步将从C57/BL小鼠胰岛分离的胰岛细胞组分为正常糖浓度糖刺组(5m M)和高浓度糖刺激组(30m M)。研究对象均为雄性小鼠,鼠龄13周,进行胰岛(islets)分离,培养及胰腺组织病理切片。用免疫印迹测定蛋白表达,酶联免疫法测定胰岛素分泌水平,免疫组化染色测定胰岛细胞凋亡。结果 p25在C57/BL组和C57/BL正常糖浓度刺激组的胰岛细胞均无表达,与之比较,p25在db/db组和C57/BL高糖刺激组的胰岛细胞均有明显的表达(P<0.05);与C57/BL组相比较,cleaved caspase3在db/db组胰岛细胞中的表达明显增加(P<0.05);与C57/BL组和C57/BL正常糖浓度组相比较,胰岛素分泌在db/db组和C57/BL高糖刺激组均明显减少(P<0.05)。结论高糖环境可刺激胰岛表达p25,引起胰岛细胞凋亡,减少胰岛素分泌。
- 罗红艳王岩刘冉冉张彬毕逢辰张霞李博郑亚莉
- 关键词：糖尿病模型胰岛胰岛素
- VEGF在DN患者血清中的表达及其与微量白蛋白尿之间的相关性研究
- 目的：探讨DN患者血清中VEGF表达水平的变化及其与尿微量白蛋白的关系，为DN蛋白尿的治疗提供新的治疗方向。 方法：54例糖尿病患者，依据24h尿微量白蛋白定量，将其分为三组：正常蛋白尿组、微量蛋白尿组、大量蛋白尿组，...
- 张彬
- 关键词：血管内皮生长因子尿微量白蛋白
- 周期素依赖性蛋白激酶5过度活性与肾小球足细胞凋亡的关系研究被引量：1
- 2016年
- 目的通过在肾小球足细胞中转染p25基因,探讨周期素依赖性蛋白激酶5(Cdk5)的活性对足细胞结构及功能的影响。方法 2014年度,于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中培养分化成熟的小鼠离体足细胞,将足细胞分为对照组、空转染组和p25转染组。应用p Ad Track-CMV病毒载体克隆p25基因,并转染足细胞,48 h收集细胞;采用Western blotting法测定Cdk5、p25、p35及细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase3的表达水平;应用免疫沉淀和同位素γ-32P标记法测定Cdk5活性;足细胞免疫荧光化学染色,观察Cdk5、p35在足细胞中的表达,以及足细胞Actin的排列情况。结果 HEK293细胞Cdk5表达阳性,p35表达阴性,肾脏皮质、足细胞和肾小球中均有不同程度的Cdk5和p35的表达。对照组和空转染组p25表达阴性,p25转染组p25表达阳性。各组细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase3表达水平和Cdk5活性比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中p25转染组细胞凋亡相关蛋白Cleaved caspase3表达水平和Cdk5活性高于对照组和空转染组(P<0.05)。p25转染组足细胞内Actin排列紊乱,细胞形态发生异常改变,对照组和空转染组细胞内Actin排列正常,细胞形态没有发生改变。结论 p25引起Cdk5过度活性可致肾小球足细胞形态改变,Actin排列紊乱,诱发细胞凋亡。因此,Cdk5的活性在维持足细胞正常结构和功能方面发挥重要作用。
- 陆晓华郑亚莉张霞李博保莉罗红艳曹丽鄂静张彬毕逢辰
- 关键词：足细胞P35
- Cdk5活性抑制肽CIP对糖尿病治疗作用机制的相关研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨周期性依赖性蛋白激酶5(Cdk5)的活性抑制肽(CIP)在糖尿病中的治疗作用及其机制。方法体外培养Min6小鼠胰岛细胞(以下简称胰岛细胞),应用基因克隆CIP质粒,转入腺病毒,转染细胞。根据是否导入CIP基因分为空载体组(EV组)和CIP转染组。应用不同浓度的葡萄糖(5 mmoL/l和25 mmol/L)刺激胰岛细胞,分为EV+5 mM组、EV+25 mM组、CIP+5 mM组、CIP+25 mM组。用免疫印迹和免疫荧光检测基因的表达和细胞凋亡情况,同位素标记测定酶的活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定胰岛素的分泌水平。体内试验,正常小鼠、糖尿病小鼠组、CIP+糖尿病小鼠组,喂养14周时腹腔内注射EV和CIP病毒,检测各组小鼠体重、血糖、糖化血红蛋白指标及各种分子病理实验。结果在同样浓度的高糖刺激Min6细胞下,Cdk5的活性在CIP组较EV组明显受到抑制(P<0.01);高糖(HG)+EV组较低糖(LG)+EV组细胞凋亡相关蛋白表达增加(P<0.01),而转染了CIP基因细胞的凋亡相关蛋白较HG+EV细胞明显下降(P<0.01);胰岛素基因的表达和分泌在EV组高糖刺激6 h的细胞较2 h的细胞明显降低,而转染CIP的细胞较EV细胞胰岛素基因的表达和分泌均明显升高(P<0.01);体内试验结果显示,体重、血糖和糖化血红蛋白指标,在db/db组与db/db+CIP组差异无统计学意义(P>0.05);细胞凋亡蛋白在db/db+CIP组较db/db组明显降低;胰岛素基因的表达db/db+CIP组较db/db组明显增高。结论 CIP可以降低Min6细胞由于高糖导致的Cdk5的过度活性,抑制胰岛细胞的凋亡,恢复胰岛素的分泌,这可能是CIP在糖尿病中起到保护性作用的机制之一。
- 陆晓华王慧郑亚莉张彬保莉毕逢辰曹丽李博
- 关键词：胰岛素细胞凋亡
- 通过测量肾小球面积评估嘌呤霉素肾炎大鼠肾小球硬化的过程被引量：1
- 2013年
- 目的研究不同时间点嘌呤霉素氨基核苷(PAN)大鼠肾病模型的肾小球面积,及其与肾小球硬化指数之间的关系,评估肾小球硬化的进展过程。方法成年雄性SD大鼠,体重200～250 g。PAN组大鼠尾静脉注射PAN,对照组注射等量生理盐水。成模后于4、14及20周处死大鼠,取其肾脏,石蜡包埋,切片,高倍镜下观察拍片,测定肾小球面积及硬化指数,进行统计学分析并观察肾脏病理组织变化。结果 PAN组在4周时肾小球面积与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);14周时,PAN组明显>正常对照组(P<0.01);但是在20周时PAN组肾小球面积<对照组(P<0.001),且20周时肾小球硬化指数与肾小球面积之间的相关系数为-0.82,呈强负相关关系。结论肾小球面积测定在评估PAN诱导肾炎肾小球硬化的发展中起重要作用。疾病的早期小球面积代偿性增大,随着疾病的进展、肾小球的面积随着硬化程度的增加而减小,与肾小球硬化指数存在强负相关关系。因此,观察肾小球面积的改变可以反映肾小球疾病进展及肾小球硬化的典型过程。
- 保莉兰小梅张彬毕逢辰郑亚莉
- 关键词：肾小球硬化
- FTP5通过抑制Cdk5活性调节胰岛β细胞的胰岛素分泌被引量：1
- 2013年
- 目的探讨FTP5通过抑制周期素依赖性蛋白激酶(Cdk5)活性调节高糖环境下胰岛β细胞分泌胰岛素的作用。方法体外培养小鼠胰岛β细胞株(Min6细胞)。①体外抑制实验。将Cdk5活性抑制肽(CIP)和P5蛋白与Cdk5+p25激酶在试管混匀测定酶的活性,分为:p25+Cdk5组、p25+Cdk5+CIP组,p25+Cdk5+P5组。②细胞内试验。应用腺病毒表达空载体(EV),含有p5的重组腺病毒(p5)、和FITC-TAT合成的短肽(FTP5),分别转染细胞并给不同浓度的葡萄糖3 mmol(低糖,LG)和25 mmol(高糖,HG)刺激,分组为LG+EV组、HG+EV组、HG+FTP5组、HG+p5组。用免疫印迹和免疫荧光检测Cdk5和p35等蛋白表达,同位素标记测定Cdk5的活性,酶联免疫吸附试验测定胰岛素的分泌水平。结果 p5与CIP均可抑制Cdk5的活性,且前者的抑制作用更强;①高糖可以诱发p35表达增高,抑制胰岛素分泌;②FTP5和p5均抑制在高糖(25 mmoL)刺激下的Cdk5活性、恢复胰岛素的分泌,FTP5的作用更强(P<0.05)。结论 FTP5可以抑制Cdk5的过度活性,恢复胰岛素分泌,在2型糖尿病治疗中可能有潜在的广阔前景。
- 张彬张霞毕逢辰高永才郑亚莉
- 关键词：周期素依赖性蛋白激酶5胰岛素P5
- 视黄醇结合蛋白在慢性肾脏病患者血液透析中的临床意义被引量：1
- 2015年
- 目的探讨血清视黄醇结合蛋白水平检测在终末期肾脏疾病行血液净化治疗患者中的临床意义。方法实验组选取因慢性肾脏疾病（CKD）5期行规律血液净化治疗〉6个月的患者63例,男45例,女18例,平均年龄（49±15）岁;对照组选取因CKD 1~4期住院但未行血液净化治疗的患者67例,男42例,女25例,平均年龄（51±17）岁,其中CKD 1期患者19例,CKD 2期患者10例,CKD 3期患者24例,CKD 4期患者14例。检测所有患者外周血清中视黄醇结合蛋白（所有患者采集空腹静脉血,CKD5期采集透析前静脉血）,同时收集临床资料行分析。结果 CKD 5期患者血中视黄醇结合蛋白水平（134.5±47.7）mg·L-1高于CKD 4期（88.5±32.8）mg·L-1、CKD 3期（65.0±27.4）mg·L-1、CKD 2期（55.4±20.1）mg·L-1、CKD 1期（52.9±21.3）mg·L-1（P〈0.05）;CKD 5期患者血中RBP水平与透析前血肌酐、尿素氮水平呈现正相关,与血红蛋白、全段甲状旁腺激素水平、血钙、血磷、血白蛋白水平均无相关性。结论血清视黄醇结合蛋白水平检测对于判断终末期肾病行血液净化治疗患者的体内毒素水平有一定临床意义,但该指标并未很好地反应患者慢性肾功能衰竭并发症的程度。
- 张霞张彬曹丽王慧郑亚莉
- 关键词：慢性肾脏疾病血液透析视黄醇结合蛋白
