张通 作品数:26 被引量:112 H指数:7 供职机构: 广州市第一人民医院 更多>> 发文基金: 广州市医药卫生科技项目 广东省科技计划工业攻关项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
藤黄酸体外诱导人结直肠癌细胞凋亡的机制 被引量:4 2018年 目的探讨藤黄酸对体外培养人结直肠癌细胞株增殖凋亡的影响以及诱导凋亡的可能机制。方法 CCK-8法检测不同浓度(0、1、2、4μmol/L)不同时间点(0、24、48、72 h)藤黄酸处理对人结直肠癌细胞株(SW480、LOVO细胞)增殖活性影响;流式细胞术检测细胞凋亡情况;免疫荧光检测细胞Cleaved caspase-3表达;Western blot技术检测Bax、Bcl-2、细胞色素C、多聚ADP核糖聚合酶和Cleaved caspase-3蛋白的表达。结果藤黄酸对SW480、LOVO细胞均有显著的增殖抑制作用,抑制率与药物浓度和作用时间呈正相关;相同处理时间,随着藤黄酸浓度增加,细胞凋亡的百分比增加;免疫荧光染色发现藤黄酸作用24 h后,细胞Cleaved caspase-3表达增加;藤黄酸处理SW480/LOVO细胞后,Bax/Bcl-2比值、细胞色素C、多聚ADP核糖聚合酶和Cleaved caspase-3蛋白表达均明显增加。结论藤黄酸可能通过激活线粒体凋亡通路体外诱导人结直肠癌细胞株的凋亡。 张通 杨平 魏建昌 陈华翠 李旺林 钟俊斌 曹杰关键词:藤黄酸 结直肠癌 BAX 细胞色素C CASPASE-3 藤黄酸抑制人结肠癌SW480细胞增殖过程中APC蛋白的表达变化 被引量:6 2013年 目的观察藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖和APC蛋白表达的影响,探讨其可能抗肿瘤的作用机制。方法以不同浓度(0、0.5、1、4μg/ml)的藤黄酸干预体外培养的人结肠癌细胞株SW480,分别于24、36、48h后,应用MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western-blot分析APC蛋白的变化。结果 1μg/ml以上浓度的藤黄酸可以显著抑制人结肠癌细胞株SW480细胞增殖,且随浓度增加效果增强,随着时间增加抑制率显著增加(P<0.01)。藤黄酸浓度达到4μg/ml时,G2/M期细胞达到54.74%;藤黄酸浓度为0、0.5、1、4μg/ml时SW480细胞的凋亡率分别为(0.17±0.08)%、(0.85±0.19)%、(7.12±1.21)%、(15.87±1.59)%。用不同浓度的藤黄酸处理SW480细胞株24h,APC蛋白的表达随药物浓度的升高而增加(P<0.01)。结论藤黄酸能够抑制人结肠癌细胞株SW480增殖并诱导其凋亡,干扰SW480细胞周期使其阻断于G2/M期,高表达APC蛋白有可能是藤黄酸抗癌作用的重要机制。 杨平 曹杰 张通 王强 孙政 张伟健 曾山崎关键词:结肠肿瘤 藤黄酸 APC蛋白 无瘤技术在腹腔镜直肠癌根治术中的应用 被引量:5 2012年 目的探讨无瘤技术在腹腔镜结直肠癌根治术的临床价值。方法回顾分析无瘤技术在59例腹腔镜直肠癌根治术中应用的临床资料,并总结其手术方法及随访结果。结果本组59例中无一例手术死亡,58例行全直肠系膜切除术,结直肠吻合术;1例行腹会阴联合切除术;术中失血量50~150mL,平均80mL;手术时间80~180min,平均120min;肠功能恢复时间12~48h,平均22h。术后无患者发生吻合口漏。未发生术后腹腔出血、吻合口狭窄及吻合口出血。术后排便习惯改变,有便频、排便不尽感33例,3个月后上述症状均明显改善。随访5~36个月,平均25个月,术后2例局部复发,1例肝转移,无肺转移。结论无瘤技术在腹腔镜结直肠癌根治术中安全可靠,术中出血少,住院时间短,胃肠功能恢复快,值得临床推广应用。 李旺林 曹杰 张伟健 杨平 王强 钟俊斌 杨建荣 张通关键词:无瘤技术 直肠肿瘤 腹腔镜 旋毛虫感染对小鼠结肠上皮通透性的影响 2012年 目的:观察旋毛虫(T.spiralis)感染对小鼠结肠上皮通透性的影响及其作用机制。方法:T.spiralis感染BALB/c小鼠。7 d后直肠灌注辣根过氧化物酶(HRP),在其后的0 min、60 min、120 min,分别检测小鼠血液中HRP的情况,尾静脉采血检测IgG1和IgG2a,随后处死小鼠,以ELISA法和流式细胞术检测肠系膜淋巴结中白细胞介素4(IL-4)的表达。另外,以T.spiralis感染STAT6敲除小鼠,同前法一样操作,观察相同指标。结果:T.spiralis感染组结肠通透性明显增加,IL-4和IgG1明显增高,IgG2a明显降低(均P<0.05)。STAT6敲除小鼠实验,T.spira-lis感染并未导致结肠通透性的增加(P>0.05);与BALB/c感染组小鼠相比,STAT6敲除感染组小鼠IL-4明显较低(P<0.05)。结论:T.spiralis感染能够导致小鼠结肠上皮通透性的增加,其作用机制可能是通过诱导IL-4的分泌来实现的。 李旺林 曹杰 张伟健 杨平 钟俊斌 杨建荣 张通关键词:旋毛虫 结肠上皮 白细胞介素4 巨细胞病毒嵌合癌胚抗原介导单纯疱疹病毒胸苷激酶联合丙氧鸟苷自杀基因体系靶向性治疗结肠癌的效果 被引量:1 2015年 目的观察巨细胞病毒(CMV)嵌合以癌胚抗原为启动子,以腺病毒为载体的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因重组构建体Ad-CMV-CEA-HSV/TK联合丙氧鸟苷(GCV)体内抗结肠癌的疗效。方法构建人结肠癌裸鼠移植瘤模型,按不同浓度梯度Ad-CMV-CEA-HSV/TK(1.0×109/kg、5.0×109/kg、10.0×109/kg)经尾静脉注射带瘤小鼠后,腹腔注射相同浓度GCV(50 mg/kg),并设空白对照组及不同浓度的Ad-CEA-HSV/TK/GCV对照(1.0×109/kg、5.0×109/kg、10.0×109/kg),共设A^G 7组,每组各10只小鼠。观察肿瘤体积、重量、肿瘤体积-时间曲线、肿瘤抑制率及生存期。结果 Ad-CMV-CEA-HSV/TK/GCV及Ad-CEA-HSV/TK/GCV对人结肠癌裸鼠移植瘤生长均具有抑制作用,对移植瘤的体积及重量抑制呈作用物浓度依赖性;且Ad-CMV-CEA-HSV/TK/GCV抑制能力较Ad-CEAHSV/TK/GCV显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ad-CMV-CEA-HSV/TK/GCV体系对结肠癌具有明确的实验性治疗作用,为人结肠癌及结肠癌远处转移灶的Ⅰ期临床治疗试验提供科学实验依据,具有广阔的临床应用前景。 王成兴 曾山崎 杨平 张通 魏建昌 陈华翠 曹杰关键词:结肠癌 巨细胞病毒 癌胚抗原 脑特异性新生血管抑制因子1在结直肠癌中的表达及其与结直肠癌患者临床病理学特征的关系 被引量:1 2018年 目的探究脑特异性新生血管抑制因子1(BAI1)在结直肠癌中的表达与结直肠癌患者临床病理学特征的关系。方法 2016年5月~2017年7月,购买包含有208个结直肠癌和8个正常结肠组织及其临床信息的组织芯片。查询癌症基因组图谱数据库,内含192例结直肠癌患者的m RNA表达信息。通过免疫组化检测组织芯片正常结肠组织与结直肠癌组织中BAI1表达的情况,检测BAI1表达与结直肠癌患者临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier法和Log-rank秩检验方法进行生存曲线。最后使用Cox回归模型进行单变量分析和多变量分析,判断BAI1对预后的判断价值。结果 BAI1在结直肠癌组织中的含量较正常组织显著上升(P<0.001)。高BAI1表达与临床分期(P=0.004)和肿瘤浸润(P=0.006)相关。癌症基因组图谱(TCGA)中结直肠癌患者的BAI1m RNA表达进一步提示了较晚的临床分期(P=0.027)、较严重的肿瘤浸润(P=0.021)的结直肠癌中BAI1表达水平更高。Kaplan-Meier生存曲线提示BAI1 m RNA高表达的患者比低表达水平的患者总生存期明显减少(P=0.02)。BAI1 m RNA的高表达是结直肠癌预后的独立影响因素(HR=2.895,95%CI:1.012~8.281,P=0.047)。结论 BAI1与结直肠癌的恶性相关。BAI1的高表达可能提示结直肠癌患者的不良预后。 魏建昌 胡鹤 王强 陈转鹏 杨平 张通 曹杰关键词:结直肠癌 临床病理学特征 CCN2及APC蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义 被引量:8 2012年 目的探讨CCN2及APC蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP技术检测正常结直肠黏膜组织、癌旁组织、结直肠腺瘤、非转移性结直肠癌、转移性结直肠癌(metastatic colorectalcancer,mCRC)及远处转移癌组织各30例中CCN2蛋白及APC蛋白的表达情况;结合结直肠癌患者的临床病理参数进行分析。结果非转移性结直肠癌、mCRC及远处转移组织中CCN2蛋白的表达率分别为76.67%、73.33%和70.00%;而在癌旁组织、结直肠腺瘤和正常结直肠黏膜组织中的表达率分别为6.67%、23.33%和0.00%,差异有统计学意义(2=74.263,P=0.000);APC蛋白在非转移性结直肠癌、mCRC及远处转移组织中均表现为低表达(表达率分别为26.67%、23.33%和16.67%),在癌旁组织、结直肠腺瘤、正常结直肠黏膜组织中均表现为高表达,分别为86.67%、76.67%和90.00%,差异有统计学意义(2=70.00,P=0.000);CCN2表达与结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤最大径和肿瘤组织病理分型无明显关系(P>0.05),而与肿瘤的TNM分期及5年生存率相关(分别为2=4.689,P=0.03;2=4.13,P=0.042);APC蛋白表达与CCN2表达呈明显负相关(rs=-0.467,P=0.001)。结论 CCN2基因是一种癌基因,CCN2在结直肠癌中表达与结直肠癌临床病理指标有关系,CCN2可考虑作为诊断结直肠癌或判断结直肠癌预后的指标;CCN2在结直肠癌中表达与APC有关,且可能受Wnt信号通路的调节。 孙政 曹杰 梁立源 杨平 张通 张伟健 唐伟镖关键词:结直肠癌 APC WNT信号通路 藤黄酸对人结直肠癌细胞凋亡及Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响 被引量:11 2016年 目的:研究藤黄酸对结直肠癌细胞凋亡及Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响。方法:藤黄酸对SW480、LOVO细胞进行干预,CCK-8法检测增殖抑制;光镜观察细胞形态变化;免疫荧光染色技术检测凋亡;Western Blot法测定Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。结果:藤黄酸抑制SW480、LOVO细胞增殖,且抑制作用随浓度及时间的增加而增强(P<0.05);藤黄酸诱导SW480、LOVO细胞发生凋亡,增强Bax、Caspase-3蛋白的表达,减弱Bcl-2蛋白的表达,提高Bax/Bcl-2比值(P<0.05)。结论:藤黄酸抑制SW480、LOVO细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能与提高Bax/Bcl-2比值、激活Caspase-3相关。 魏建昌 张通 杨平 曾山崎 王成兴 陈华翠 曹杰关键词:结直肠肿瘤 藤黄酸 BAX/BCL-2 CASPASE-3 RNA干扰血管内皮生长因子受体2基因表达提高结肠癌细胞对奥沙利铂敏感性的研究 被引量:1 2017年 目的研究RNA干扰血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)基因表达对人结肠癌细胞生长的抑制作用和对奥沙利铂的化疗增敏作用。方法构建靶向VEGFR-2基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒并转染人结肠癌细胞株SW480;通过RT-PCR和Western blot方法检测VEGFR-2 siRNA对人结肠癌细胞株SW480 VEGFR-2mRNA和蛋白表达的影响;采用MTT实验和流式细胞术检测该siRNA及协同奥沙利铂对细胞增殖及凋亡的影响。结果 VEGFR-2 siRNA显著下调结肠癌细胞VEGFR-2 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。VEGFR-2 siRNA协同奥沙利铂使结肠癌细胞的生长变得更加缓慢,增殖受到明显抑制,细胞抑制及凋亡明显增强(P<0.05)。结论RNA干扰VEGFR-2基因表达可以抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,促进其凋亡,并能提高结肠癌细胞对奥沙利铂的敏感性。 杨平 魏建昌 陈华翠 张通 曾山崎 曹杰关键词:结肠癌 血管内皮生长因子受体2 小分子干扰RNA 奥沙利铂 藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖及VEGFR2表达的影响 被引量:15 2012年 目的:观察藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖和血管内皮细胞受体2(VEGFR2)表达的影响,探讨其可能抗肿瘤的作用机制。方法:以不同浓度的藤黄酸干预体外培养的人结肠癌细胞株SW480,分别于24、36、48h后,应用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western-blot分析VEGFR2蛋白的变化。结果:藤黄酸对结肠癌细胞株SW480生长增殖具有明显抑制作用,其效应呈浓度和时间依赖性。流式细胞仪分析显示SW480细胞呈G2/M期阻滞;SW480细胞的凋亡率随藤黄酸浓度增加逐步上升。用不同浓度的藤黄酸处理SW480细胞株24h,VEGFR2蛋白的表达随药物浓度的增加而减少(P<0.01)。结论:藤黄酸能够明显抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,诱导SW480细胞发生G2/M期阻滞,其作用机制可能与抑制VEGFR2表达有关。 杨平 曹杰 张通 王强 孙政 张伟健 曾山崎关键词:结肠肿瘤 藤黄酸 VEGFR2