徐彬彬
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 不同层面人肝CYP2C8代谢活性的个体差异及比较
- 目的:探讨人肝CYP2C8对其特异底物紫杉醇在微粒体水平、肝脏水平及总CYP水平代谢的个体差异,比较3种CYP2C8活性表示方法的差异,探索CYP体外活性最合理的表示方法。方法:采用差速离心法制备人肝微粒体(HLM),B...
- 张海风徐彬彬刘婷婷齐冰郜娜齐海灵
- 人源细胞色素P450 2E1与细胞色素P450氧化还原酶的共表达被引量：2
- 2014年
- 目的利用大肠埃希菌(E.coli)表达系统异源表达细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1),并与细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)实现共表达,使其具有代谢活性,为药物代谢的研究提供单一性的酶源。方法以人肝组织RNA为模板,RT-PCR扩增CYP2E1基因,插入pCW空载体,构建重组表达质粒pCW-2E1,转化E.coli DH5α,IPTG诱导表达,表达产物经Western blot鉴定;利用双启动子原理构建CYP2E1与POR共表达的重组质粒pCW-2E1-POR,采用对氨基苯酚法检测CYP2E1重组酶的代谢活性,并对不同培养时间(18、28、38 h)的代谢活性进行比较。结果质粒pCW-2E1经PCR鉴定,证明构建正确;表达的重组人CYP2E1蛋白相对分子质量约56 000,主要以可溶性形式表达。质粒pCW-2E1-POR经PCR及酶切鉴定,证明构建正确;导入质粒pCW-2E1-POR的重组菌提取的蛋白样品具有明显的代谢活性,培养18、28、38 h后,代谢活性均值分别为(0.195±0.004)、(0.189±0.003)和(0.192±0.004)nmol/(min·mg),差异无统计学意义(P>0.05),但与导入质粒pCW-2E1的重组菌提取的蛋白样品的代谢活性相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了具有代谢活性的CYP2E1重组酶,且3个培养时间段之间的代谢活性无明显差异。
- 徐彬彬张海风刘秀赵勤王俊平单杰
- 关键词：细胞色素P450原核细胞基因表达
- 细胞色素P450氧化还原酶基因多态性对其mRNA及活性的影响
- 研究背景: 细胞色素P450氧化还原酶(Cytochrome P450 oxidoreductase，POR)是存在于人肝微粒体中内质网膜上的一种黄素蛋白质。它传递电子给所有的微粒体细胞色素P450酶，进而实现个体对药...
- 徐彬彬
- 关键词：基因多态性药物代谢药代动力学
- 文献传递
