施鸣铭
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- p38-2G4蛋白高表达对小鼠红白血病细胞增殖和分化的影响
- 2014年
- 目的探讨小鼠增殖相关蛋白p38-2G4基因表达上调对小鼠红白血病(MEL)细胞增殖和诱导分化能力的影响。方法构建p38-2G4-pLJM1高表达重组载体与pCMV-VSV-G和pCMV-dR8.2包装质粒共转染HEK293T细胞慢病毒,感染MEL细胞,建立稳定高表达p38-2G4蛋白的MEL细胞系,Western blotting检测稳定株p38-2G4蛋白的表达。MTT实验和联苯胺染色法检测p38-2G4蛋白高表达对MEL细胞增殖和诱导分化能力的影响。结果高表达稳定株中p38-2G4蛋白表达量明显高于对照组细胞(P<0.05)。p38-2G4蛋白的高表达能显著影响MEL诱导分化过程,导致血红蛋白合成减少(P<0.05),但不能明显改变细胞活力(P>0.05)。结论 p38-2G4蛋白的高表达对MEL细胞增殖无明显影响,但能显著影响其被丁酸钠诱导分化的过程。
- 朱晓芳施鸣铭杨祖立赵辅昆张世馥
- 关键词：慢病毒转染免疫印迹法小鼠
- 二甲基亚砜诱导小鼠红白血病细胞分化的差异蛋白质组学被引量：2
- 2014年
- 目的利用二甲基亚砜(DMSO)诱导小鼠红白血病(MEL)细胞分化,系统地分析和鉴定诱导分化不同时间的差异蛋白质组学。方法 DMSO诱导MEL细胞分化,通过联苯胺染色、MTT比色法和Ter119免疫荧光等实验检测细胞分化的比率和细胞的活力,并利用双向电泳耦联质谱技术,结合生物信息学分析诱导MEL细胞分化过程中差异表达的蛋白质。结果 1.2%DMSO诱导MEL细胞分化,分别培养0h、6h、12h、24h、36h、48h、72h、96h、120h,利用双向电泳和质谱分析,共鉴定出87种蛋白质。1.2%DMSO作用MEL细胞120h后,细胞诱导分化率达到67%。MTT实验显示,1.0%、1.2%、1.4%的DMSO对MEL细胞的活力无明显的抑制作用。结论 DMSO对MEL细胞有诱导分化作用,但无明显地抑制细胞增殖。87种双向电泳差异蛋白质按功能可分为12类,比例最大的前3类分别是:占41%的酶类蛋白、15%的结构蛋白、13%的调节蛋白。
- 杨祖立朱晓芳施鸣铭胡繁赵辅昆张世馥
- 关键词：分化双向电泳小鼠
- P38-2G4蛋白在红系细胞分化过程中的动态表达分析
- 2014年
- 目的 分析小鼠P38-2G4蛋白在红系细胞分化中的表达及功能,初步研究该蛋白是否参与红系分化过程.方法 制备E10.5 ～E16.5胎肝细胞、FVA细胞及诱导剂丁酸钠和六亚甲基二乙酰胺诱导不同时间的小鼠红白血病细胞MEL,用Western blot检测P38-2G4蛋白在上述3种细胞中的表达,同时以联苯胺染色法检测细胞分化的标志蛋白血红蛋白的表达.结果 在不同分化期的胎肝细胞中,P38-2G4蛋白的表达先升高后降低;在FVA细胞分化过程中,P38-2G4表达量同样先增加后减少;而在诱导剂诱导MEL细胞分化过程中,P38-2G4表达量呈下降趋势.结论 P38-2G4蛋白在不同红系分化组织中的差异性表达提示该蛋白参与了小鼠红系细胞的分化过程.
- 施鸣铭杨祖立朱晓芳郑雅娟张世馥
- 关键词：胎肝红系分化
- 盐酸苯肼诱发小鼠网织红细胞条件的优化被引量：1
- 2013年
- 目的利用盐酸苯肼诱发小鼠产生网织红细胞的最佳条件选择。方法每天背部皮下给ICR和BALB/c小鼠注射1%盐酸苯肼100～400μL,连续9 d。每天尾静脉取血,利用煌焦油蓝染色,观察染色后网织红细胞的诱发效率并进行统计学分析。结果注射200μL盐酸苯肼的小鼠诱发的网织红细胞状态最好,第4天诱发效率最高,可达83.16%±3.41%;注射300和400μL盐酸苯肼的小鼠诱发的网织红细胞形态不规则,细胞状态较差小鼠很快死亡。结论 ICR小鼠及BALB/c小鼠网织红细胞诱发的最佳条件为:体质量25～35 g的小鼠每天注射200μL 1%盐酸苯肼,连续注射4 d。
- 曹玲玲何超薛建有毛群铨施鸣铭戚武林张世馥
- 关键词：网织红细胞
